靳秋月 作品数:77 被引量:249 H指数:9 供职机构: 南京医科大学 更多>> 发文基金: 天津市应用基础与前沿技术研究计划面上项目 军队科研计划项目 天津市自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 文化科学 生物学 更多>>
芸香苷诱导K562细胞凋亡机制 被引量:9 2006年 目的研究芸香苷诱导白血病K 562细胞凋亡过程中caspase-3基因及细胞色素C的表达。方法体外培养白血病K 562细胞,M TT法观察细胞毒作用,测定IC50,Hoechst 33342/P I双荧光染色后,荧光显微镜下观察细胞核形态,流式细胞仪检测细胞周期,TR IZOL试剂提取K 562细胞RNA,核酸定量仪检测纯度,RT-PCR扩增,紫外透射检测扩增产物,扩增产物测序,观察caspase-3的表达,4×1-0 5m o l/L药物处理细胞后,分离细胞线粒体和胞浆,经SDS-PAGE电泳分离蛋白,W estern b lotting检测线粒体、细胞浆细胞色素C表达。结果芸香苷浓度为2×1-0 5、4×10-5、8×10-5m o l/L时,细胞生长受到显著抑制,并呈剂量依赖性;不同浓度芸香苷处理K 562细胞44h后,应用M TT比色法计算IC50为4×1-0 5m o l/L;4×10-5m o l/L芸香苷处理细胞24 h后,Hoechest 33342/P I双荧光染色可观察到明显核固缩、凝集等细胞凋亡表现;流式细胞仪检测芸香苷处理后G2期细胞显著增多(64.7%),DNA合成受抑,凋亡率增加;PCR产物经过琼脂糖凝胶电泳,紫外透射仪下明显观察到500 bp条带,产物经过序列测定证实芸香苷处理细胞诱导caspase-3基因的表达;W estern B lotting检测线粒体细胞色素C表达水平下调,细胞浆出现明显细胞色素C蛋白条带。结论芸香苷诱导K 562细胞caspase-3基因表达,细胞色素C通过线粒体膜进入胞浆,导致细胞线粒体功能异常,细胞发生凋亡,线粒体途径诱导白血病细胞凋亡是其作用机制之一。 陈立军 靳秋月 王瑞珉 王玮 呼文亮 陈虹关键词:芸香苷 CASPASE-3 细胞凋亡 细胞色素C Survivin反义寡核苷酸对5-FU诱导人红白血病细胞系K562凋亡的影响 2006年 【目的】探讨survivin反义寡核苷酸(Antisense Oligodeoxy-nucleotid,ASODN)对5-FU(5-氟尿嘧啶)诱导人红白血病细胞系K562细胞凋亡的影响。【方法】体外培养K562细胞,合成survivin ASODN并经脂质体转染至K562细胞内,MTT法观察survivin ASODN组、5-FU组及5-FU联合survivin ASODN的细胞毒作用,Hoechst33342/PI双荧光染色观察各组细胞核形态,镜下计算各组细胞凋亡率。【结果】400、600、800、1000nmol/L survivin ASODN处理K562细胞44 h后,IC50为800 nmol/L;与单独使用survivin ASODN或5-FU相比,5-FU联合800 nmol/L survivin ASODN后细胞生长明显受到抑制(P<0.01);Hoechest33342/PI双荧光染色可观察到survivin ASODN组、5-FU组及5-FU联合survivin ASODN组均出现明显核固缩、凝集等细胞凋亡表现。镜下细胞计数,survivin ASODN组、5-FU组及5-FU联合survivin ASODN组细胞凋亡率分别为54.55%、53.85%、86.70%。【结论】Survivin ASODN可增强K562细胞对5-FU的敏感性。 靳秋月 王瑞珉 谢红 陈立军关键词:反义寡核苷酸 K562细胞 双氢青蒿素诱导人肿瘤细胞凋亡及其分子机制的研究 被引量:8 2007年 目的:研究双氢青蒿素诱导人白血病细胞凋亡作用及其机制。方法:用双氢青蒿素处理K562细胞,通过MTT比色法检测细胞增殖抑制的效果;荧光显微镜观察细胞的凋亡;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测半胱氨酰-天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)的表达,蛋白印迹技术(Western blot)检测线粒体、胞浆细胞色素C的表达。结果:双氢青蒿素处理K562细胞48h后MTT检测,570nm波长处测定半数细胞抑制浓度为8×10-5mol.L-1;Hoechst33342/PI双荧光染色可观察到明显核固缩、凝集等细胞增殖抑制表现;RT-PCR检测到caspase-3的表达,Western-blot检测线粒体细胞色素C表达下调,胞浆中细胞色素C表达阳性。结论:双氢青蒿素能够在体外抑制人白血病细胞增殖并诱导其凋亡,而促进细胞色素C的释放,激活caspase-3可能是其作用机制之一。 谢红 陈立军 姚丽 靳秋月 呼文亮关键词:双氢青蒿素 凋亡 细胞色素C 人白血病细胞 不同强度训练负荷对大鼠认知情绪变化及NMDA受体、PSD-95和KIF-17mRNA和蛋白表达的影响 被引量:1 2016年 目的:建立SD大鼠中等和高强度持续训练运动模型,探究不同训练负荷下,大鼠海马N-甲基-D-天冬氨酸受体(NMDARs)、突触后致密物质-95(PSD-95)和驱动蛋白家族蛋白17(KIF-17)表达及认知和情绪功能的变化。方法:实验建立SD大鼠跑台运动模型,分别进行中等和高强度持续训练4周,中等强度运动时采用递增负荷训练,高强度运动时采用高速训练,并设立正常对照组。测量运动后大鼠体质量减轻程度的变化,real-time PCR和Western blotting分别检测不同训练负荷对大鼠海马NMDA受体,PSD-95和KIF-17 m RNA和蛋白表达的影响。结果:相比对照组,中等强度持续运动精神状态明显更佳,高强度持续运动状态萎靡。中等强度持续训练组PSD-95、KIF-17和NMDA受体的m RNA和蛋白的表达显著上升(P<0.05),而高强度持续训练组m RNA和蛋白的表达则受到抑制(P<0.05)。结论:不同训练负荷对大鼠认知情绪及精神状态有较大影响,可以影响大鼠NMDA受体、PSD-95和KIF-17 m RNA和蛋白的表达。适量的运动训练不仅可以减轻缺氧对海马的损害,更可以有效地改善海马的功能。 任鹤菲 陈立军 于利人 靳秋月关键词:谷氨酸受体 情绪 几种中草药活性成分抗肿瘤研究 陈立军 于利人 陈虹 靳秋月 呼文亮 闫冬 王火 谢红 李爱秀 姚丽 王瑞珉 樊嵘 王玮 杨磊 张东昌 哥纳香醇甲是我国科学家从番荔枝科哥纳香属植物海南哥纳香根和茎皮中分离得到的一种化合物,近年发现其具有显著抗肿瘤活性;芸香苷是食物中常见的类黄酮物质,属黄酮醇类,为槲皮素衍生物。研究发现,黄酮类化合物具有抗炎、抗氧化、抗肿...关键词:关键词:抗肿瘤 细胞凋亡 芸香 不同训练负荷大鼠骨骼肌肌浆网钙转运能力的变化 被引量:2 2014年 目的观察不同训练负荷条件下大鼠骨骼肌肌浆网钙转运能力的变化,为武警官兵科学训练提供实验依据。方法 24只SD大鼠随机分为正常对照组(n=8),在笼内自由活动;有氧运动组(n=8),在跑台上每天定时进行递增速度运动,运动强度为64%~76%VO2max;无氧运动组(n=8),在跑台上每天定时进行高速间歇运动,强度〉80%VO2max。上述各组4周后处死取样,采用高速离心机提取骨骼肌肌浆网,采用紫外分光光度计检测钙转运能力的变化。结果有氧运动组大鼠骨骼肌肌浆网Ca^2+最大摄取量和最大释放量分别为(57.17±4.62)和(33.54±4.97)nmol/mgprot,均明显高于无氧运动组〔(33.18±3.90)、(16.17±2.89)nmol/mgprot,P〈0.05〕和正常对照组〔(34.67±4.25)、(24.81±3.75)nmol/mgprot,P〈0.05〕,3组间骨骼肌肌浆网Ca^2+最大摄取速度和最大释放速度的差异也呈同上趋势(P〈0.05)。结论有氧运动更有利于提升骨骼肌肌浆网对Ca^2+的转运功能。 张敏 靳秋月 王大宁 陈立军关键词:有氧运动 无氧运动 肌浆网 钙转运 Isogoniotriol衍生物对肿瘤细胞DNA的损伤 被引量:1 2005年 目的:研究Isogoniotriol衍生物对肿瘤细胞DNA的损伤作用。方法:用Isogoniotriol衍生物处理体外培养白血病K562细胞,MTT法测定IC50,应用单细胞凝胶电泳(SCGE)检测细胞核DNA的损伤。结果:Isogoniotriol衍生物处理K562细胞IC50为4×10-5mol/L,不同浓度的Isogoniotriol衍生物处理细胞后可见彗星状拖尾。结论:Isogoniotriol衍生物可造成肿瘤细胞DNA损伤,抑制肿瘤细胞生长。 于利人 靳秋月 谢红 陈立军关键词:肿瘤细胞DNA 抑制肿瘤细胞生长 细胞DNA损伤 细胞核DNA IC50 Survivin反义寡核苷酸诱导SW620细胞凋亡过程中对caspase-3表达的影响 2009年 目的:观察survivin反义寡核苷酸(ASODN)对人结肠癌细胞株SW620增殖、凋亡的影响,并初步探讨其分子机制。方法:靶向survivin基因中与caspase-3结合的部位设计、合成反义寡核苷酸并通过脂质体将其转染至人结肠癌细胞SW620中。噻唑蓝(MTT)法观察survivin ASODN对SW620细胞增殖的抑制作用,测定IC50;转染36h后,Hoechst33342染色荧光显微镜下观察检测SW620细胞核变化,RT-PCR检测survivin ASODN处理后SW620细胞中caspase-3mRNA表达,分光光度法检测caspase-3酶活性。结果:转染8h后,SW620细胞中可见黄绿色荧光均匀分布。不同浓度survivin ASODN处理SW620细胞44h后,SW620细胞增殖显著受到抑制,IC50为1×10-6M。2×10-7,4×10-7,6×10-7,8×10-7and1.2×10-6M的survivin ASODN处理后,细胞生长抑制率分别为15.38±0.022%、24.04±0.023%、30.87±0.027%、45.02±0.018%和65.01±0.024%。Hoechest33342染色后荧光显微镜下可观察到染色质凝集并出现凋亡小体,RT-PCR检测到caspase-3mRNA表达上调,另外caspase-3酶活性显著升高。结论靶向survivin基因中与caspase-3结合的部位设计合成的survivin ASODN可抑制显著结肠癌SW620增殖、诱导细胞凋亡,其机制与诱导caspase-3表达,提高caspase-3酶活性有关。 靳秋月 张东昌 史娜 谢红 陈立军关键词:反义寡核苷酸 细胞凋亡 半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶-3 瘦素的研究进展 2001年 瘦素是由LEP基因编码的一种分泌型蛋白质,由脂肪组织产生,在体内主要作用于中枢神经系统,调节能量代谢,从而使人或动物的体脂保持相对稳定。本文从瘦素及瘦素受体的结构、瘦素的生理功能、影响瘦素分泌的因素及瘦素的代谢情况对其研究进展做一综述。 靳秋月 陈立军 战丽 张东昌关键词:瘦素 瘦素受体 肥胖基因 STAT3基因siRNA表达载体的构建及鉴定 目的:STAT3在人类白血病、多发性骨髓瘤、头颈部鳞状细胞癌、乳腺癌、结直肠癌、前列腺癌及肺癌等多种肿瘤组织与细胞系中异常表达或活性增强,提示 STAT3调控异常与肿瘤的发生发展密切相关。其发挥作用时,两个 STAT3单... 靳秋月 陈立军 张东昌 刘洋文献传递