陈少良 作品数:65 被引量:556 H指数:13 供职机构: 北京林业大学生物科学与技术学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 高等学校学科创新引智计划 北京市自然科学基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 理学 电子电信 更多>>
初始盐胁迫下ABA与CaM对胡杨叶片气体交换的调控 被引量:18 2008年 以典型的耐盐树木胡杨(Populus euphratica)为试验材料,研究叶片气体交换对初始盐胁迫的响应机制。在初始盐胁迫下,胡杨叶片ABA和CaM水平提高,叶片气孔导度、蒸腾速率和净光合速率相应迅速下降,表明ABA和Ca2+.CaM参与了胡杨盐诱导的气孔关闭。5mmol.L-1钨酸钠(ABA合成抑制剂)、10mmol.L-1EGTA(胞外Ca2+螯合剂)和5mmol.L-1 LaCl3(Ca2+通道抑制剂)处理胡杨根部,对照苗木叶片的EVAP、Gs和Pn未受到影响,却提高了盐处理苗木(50mmol.L-1NaCl,4h)的气体交换。结果显示,盐诱导内源ABA和CaM水平的提高导致了胡杨叶片的气孔关闭,这是因为:1)钨酸钠处理降低了盐处理苗木的ABA水平,增加了CaM的含量;2)EGTA或LaCl3处理显著降低了胡杨叶片的CaM水平,但ABA水平显著升高。此外,通过茎导入ABA来模拟盐诱导内源ABA水平的提高,发现茎部导入的ABA(10μmol.L-1)能使胡杨叶片ABA和CaM水平迅速升高,叶片Gs、EVAP和Pn相应迅速下降,而先于ABA导入的5mmol.L-1LaCl3或5mmol.L-1EGTA虽然提高了ABA的水平,但却显著降低了CaM水平,ABA诱导胡杨的气孔关闭也受到明显抑制。研究结果显示,钨酸钠、EGTA和LaCl3的使用,都能抑制盐诱导胡杨的气孔关闭,因此,在初始盐胁迫诱导胡杨气孔关闭的过程中,ABA和CaM很可能是共同作用:诱导胞质Ca2+水平升高,激活外向的K+通道和Cl-通道,诱导气孔关闭,从而降低经由蒸腾流进行的根冠盐离子运输。 张云霞 石勇 王瑞刚 陈少良 李妮亚 邵杰 张华 李静 孙健关键词:叶片 气体交换 盐胁迫下胡杨调控细胞内K+/Na+平衡的生理和信号机制 土壤盐渍化是影响植物生产力的最主要的非生物胁迫之一。在高盐生境下维持细胞质内高K+低Na+的平衡状态是植物抵御盐害的重要手段之一。胡杨是我国西北干旱盐碱的荒漠和戈壁地带惟一能够形成森林的高大乔木树种,具有很强的抗盐性,是... 孙健 王美娟 丁明全 邓澍荣 陈少良初始盐胁迫下ABA与CaM对胡杨叶片气体交换的调控 以典型的耐盐树木胡杨(Populus euphratica Oliv.)为实验材料,研究叶片气体交换对初始盐胁迫的响应机制。在初始盐胁迫下,胡杨叶片 ABA 和 CaM 水平提高,叶片气孔导度、蒸腾速率和净光合速率相应迅... 张云霞 石勇 王瑞刚 陈少良 李妮亚 邵杰 张华 李静 孙健关键词:气体交换 钨酸钠 EGTA LACL3 文献传递 胡杨PeXTH基因的克隆及其转基因烟草的抗镉性分析 被引量:3 2014年 【目的】克隆胡杨木葡聚糖内转糖苷酶/水解酶基因PeXTH,并研究该基因和植物抗Cd2+性之间的关系。【方法】利用RT-PCR方法从胡杨中克隆一个木葡聚糖内转糖苷酶/水解酶基因PeXTH,将该基因的全长cDNA克隆到植物表达载体pGreen0029上,然后通过农杆菌介导法,将重组表达载体转入烟草,并对转基因烟草的抗Cd2+能力进行初步分析。【结果】PeXTH基因的开放阅读框(ORF)长867bp,含ATG起始密码子和TAG终止密码子,编码由288个氨基酸组成的蛋白;多重氨基酸序列比对结果显示,PeXTH蛋白含有木葡聚糖内转糖苷酶/水解酶(XTHs)的保守催化活性域DEIDFEFLG和N-糖基化位点NLSG;Real-Time PCR检测结果表明,PeXTH基因已经成功在2个转基因株系(L6和L14)中过表达;Cd2+胁迫后,转基因烟草根组织中积累的Cd2+含量显著高于野生型,而叶组织中积累的Cd2+含量明显低于野生型;Cd2+胁迫下,转基因烟草叶片的相对电导率显著低于野生型,但抗氧化酶活性、营养元素含量、叶片净光合速率和蒸腾速率等生理指标都要明显高于野生型。【结论】PeXTH基因的过表达提高了烟草对Cd2+的抗性,为进一步深入研究PeXTH基因在植物抗Cd2+机制中的作用奠定了良好基础。 韩彦莎 鲁彦君 于瑞 赵瑞 沈昕 陈少良关键词:烟草 盐胁迫下胡杨和毛白杨叶细胞中的离子区隔化 以抗盐的胡杨(Populus euphratica)和盐敏感的毛白杨(P.tomentosa)组培再生苗为实验材料,利用X-射线微区分析技术研究盐胁迫下(为期20d的盐处理)叶片各种类型细胞内主要元素Na+、Cl、K+的... 戴松香 陈少良 Eberhard Fritz Andrea Olbrich Christine Kettner Andrea Polle Aloys Hüttrmann关键词:盐胁迫 毛白杨 叶细胞 非泌盐红树植物-秋茄和木榄耐盐生理机制研究 李妮亚 陈少良 刘强 周晓阳 王瑞刚 李春艳 邵杰 朱慧娟 张云霞 两种非泌盐红树有着不同的耐盐机理:1.秋茄植株在低盐(100mM-200mMNaCl)浓度时,能够通过根系控制盐离子吸收及转运,以降低地上部分盐离子的积累。同时,秋茄植株根系能够迅速感应盐胁迫,合成ABA,并在盐胁迫过程...关键词:关键词:秋茄 木榄 红树 致倦库蚊GSTe1和CYP9J40的时空表达特点 被引量:1 2014年 【目的】细胞色素P450单加氧酶(P450)和谷胱甘肽-S-转移酶(GST)是生物降解外源有毒物质的重要解毒酶家族,在昆虫适应杀虫剂选择的过程中发挥重要的作用。以往在致倦库蚊Culex pipiens quinquefasciatus对硫磷抗性研究中,发现了一个Epsilon GST基因(GSTe1)和一个P450 CYP9家族基因(CYP9J40)在抗性品系中高表达。研究它们在蚊虫中的时空表达模式对理解它们的生物学功能有重要意义。【方法】本研究利用实时定量PCR和原位杂交的方法探讨了这两个解毒酶基因在蚊虫中的时空表达。【结果】定量PCR显示GSTe1和CYP9J40在对硫磷抗性蚊虫中的转录水平分别是敏感蚊虫的4.2倍和1.9倍,它们在蚊虫整个生活周期的表达模式相似,均为幼虫期表达量相对较低,从蛹期开始表达量显著升高,到成虫期雌虫达到顶峰,而雄虫与幼虫期表达量相当。原位杂交结果表明这两个基因在肌肉、消化道和卵巢中都有表达,且CYP9J40的表达更广泛,在脑和胸部神经节也有明显表达。【结论】基因表达的发育阶段特异性和广泛的组织分布说明GSTe1和CYP9J40除了参与蚊虫对杀虫剂的抗性,还可能具有其它生理功能,如对雌虫发育有重要的影响。 王炜 陈少良 崔峰关键词:致倦库蚊 解毒酶 P450 GST 抗药性 Isolation of Protoplast and Ion Channel Recording in Plasma Membrane of Suspension Cells of Populus euphratica 被引量:4 2002年 The authors used suspension cells of Populus euphratica to isolate protoplast in the present study. Protoplasts were successfully obtained after 4 hours incubation in enzyme solution containing 1 0% cellulase “onozuka” R\|10, 0\^01% pectolyase Y\|23,0\^15% macerozyme R\|10 and 0\^1% hemicellulase at 25℃. Outward and inward single channels in plasma membrane were observed using cell\|attached recording of patch\|clamp technique. In this study, single channel records showed that more than one species of channel were obtained. These attempts in protoplast isolation and ion channel recording offers the opportunity to characterize cellular mechanisms of salt tolerance in tree species. 陈少良 戴松香 李金克 王沙生 Andrea Polle Aloys Hüttermann关键词:PROTOPLASTS 胡杨果糖-1,6-二磷酸醛缩酶的定位及功能研究 被引量:2 2013年 将从胡杨中克隆的果糖-1,6-二磷酸醛缩酶基因(PeALD)构建到pGEX-4T-1载体上,经IPTG诱导成功获得融合蛋白GST:PeALD,并将蛋白进行纯化,其大小约为52 kD,转化大肠杆菌的耐盐性实验表明,PeALD基因的成功表达有利于提高大肠杆菌菌株的耐盐性。为研究该基因编码蛋白在植物细胞中的定位,将基因的ORF区构建到定位表达载体pMDC85上,通过PEG介导的拟南芥瞬时转化法观察融合蛋白PeALD:GFP在细胞中的定位情况,结果显示该蛋白定位于胞质中,由此说明实验克隆得到的该胡杨果糖-1,6-二磷酸醛缩酶基因编码的是胞质蛋白。烟草种子在盐培养基上的萌发实验结果显示转基因烟草具有更高的耐盐性;烟草水培苗经200 mmol/L NaCl处理一周后,可溶性糖的质谱检测结果显示转基因植株中葡萄糖的含量有很大提高。表明胡杨果糖-1,6-二磷酸醛缩酶通过促进糖酵解和有氧呼吸途径来提高植物对盐胁迫的适应性。 胡月 张帆 申泽丹 于瑞 赵瑞 沈昕 陈少良关键词:果糖-1,6-二磷酸醛缩酶 原核表达 亚细胞定位 耐盐性 Ca^(2+)-ATPase参与植物耐盐性调控的研究进展 2024年 盐胁迫下细胞质Ca^(2+)浓度升高,细胞会激活Ca^(2+)调节的靶酶或者与Ca^(2+)高度亲和的受体蛋白,其中,与Ca^(2+)高度亲和的受体蛋白中,植物钙泵(Ca^(2+)-ATPase)是P型ATP酶,包含内质网Ca^(2+)-ATPases与质膜Ca^(2+)-ATPas‐es,通过主动运输将Ca^(2+)从细胞质转移到质外体或细胞器。大量研究表明,植物的耐盐性在很大程度上与其维持钙泵即Ca^(2+)-ATPase活性的能力有关。多种植物Ca^(2+)-ATPase对盐胁迫表现出敏感性,并受到外源Ca^(2+)的保护,表明外源钙处理与Ca^(2+)-ATPase活性可能在盐胁迫下的细胞内钙稳态和信号转导中起重要作用。该研究概述了植物Ca^(2+)-ATPase类型、结构与性质,亚细胞定位Ca^(2+)-ATPase及外源钙与亚细胞定位Ca^(2+)-ATPase参与植物耐盐调控研究进展,重点对质膜、液泡膜、核膜、内质网及高尔基体Ca^(2+)-ATPases参与植物耐盐调控的研究进展进行了综述,并提出展望。该研究为了解植物耐盐性生理及分子机制提供帮助,同时为作物耐盐栽培提供新思路。 马秀英 李金克 周晓阳 陈少良关键词:质膜 液泡膜 内质网 核膜