郝朝亮
- 作品数:4 被引量:15H指数:2
- 供职机构:广西大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金广西壮族自治区自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 广西巴马小型猪hGFAP-DsRed转基因克隆胚胎的构建研究
- 广西巴马小型猪是我国特有的小型地方猪品种,其体格微小,器官大小及生理特征与人类比较接近,是理想的医学动物模型。胶质纤维酸性蛋白(GlialFibrillaryAcidicProtein,GFAP)是成熟星形胶质细胞中间丝...
- 郝朝亮
- 关键词:广西巴马小型猪脂质体法转染效率
- 文献传递
- 脂质体法构建广西巴马小型猪转基因体细胞及转基因克隆胚的生产被引量:12
- 2014年
- 脂质体法是一种传统的向哺乳动物细胞导入外源基因的方法,然而其转染效率受多种因素影响。本研究将从脂质体和质粒DNA量、转染暴露时间以及混合孵育时间等四方面进行探索,以寻找最佳的转染体系。试验结果表明最佳转染体系为:脂质体1.25μL、DNA 0.7μg、脂质体-DNA混合孵育0 min以及转染暴露6 h。随后我们用优化过的转染体系对新生广西巴马小型猪肾脏成纤维细胞进行转绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)操作,获得了(26.45±2.11)%的转染率,并以此为核供体经体细胞核移植技术成功构建表达GFP的广西巴马小型猪克隆胚胎,同时证实转基因克隆胚的体外发育能力比得上非转基因克隆胚。这为我们构建用于人类疾病研究的基因修饰广西巴马小型猪奠定了基础。
- 郝朝亮朱向星曾永联全守能卢晟盛
- 关键词:脂质体转染法转基因克隆广西巴马小型猪
- 巴马小型猪肾脏成纤维细胞转染外源基因条件的优化
- 引言体细胞克隆和转基因技术的结合是目前生产转基因动物的有效方法,建立针对特定细胞系和转染试剂的稳定高效的转染方法是关键环节之一。本文优化出巴马小型猪肾脏成纤维细胞转染的高效的转染条件,包括脂质体浓度、质粒浓度、质粒-脂质...
- 胡林林郝朝亮燕志光娄娟卢晟盛杨小淦卢克焕
- 文献传递
- 胰岛素和胚胎培养密度对猪孤雌胚早期体外发育的影响被引量:3
- 2010年
- 为了探讨胰岛素和胚胎培养密度对猪孤雌胚早期体外发育的影响,进一步优化猪早期胚胎培养体系,分别进行了胚胎培养液(NCSU-23)中添加不同批号和浓度的胰岛素以及不同胚胎培养密度(培养滴体积)对猪孤雌胚早期胚胎体外发育的影响试验,并于第2、7天分别统计胚胎分裂率和囊胚发育率。结果表明:①在NCSU-23中添加5.0μg/mL批号为I-1882(Sigma公司)的胰岛素,其囊胚发育率最高,为(33.48±12.79)%;②在体外培养25枚猪孤雌胚时,按胚胎数(枚)l培养液体积(μl)为1∶2.0~1∶3.0的比例进行培养,其培养效果较好。
- 宋雪梅许惠艳郝朝亮梁世忠卢晟盛卢克焕
- 关键词:孤雌胚体外培养胰岛素