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郑佐华

作品数：11 被引量：68H指数：5
供职机构：复旦大学更多>>
发文基金：国家自然科学基金上海市自然科学基金国家重点实验室开放基金更多>>
相关领域：生物学医药卫生更多>>

合作作者

文献类型

  • 10篇中文期刊文章

领域

  • 9篇生物学
  • 1篇医药卫生

主题

  • 3篇逆转
  • 3篇逆转录
  • 3篇转录
  • 3篇聚合酶
  • 3篇基因
  • 3篇合酶
  • 3篇FD
  • 2篇逆转录酶
  • 2篇转录酶
  • 2篇耐热
  • 2篇基因组
  • 2篇TAQ
  • 2篇DNA
  • 2篇DNA聚合酶
  • 1篇蛋白
  • 1篇蛋白质
  • 1篇点突变
  • 1篇定点突变
  • 1篇移码
  • 1篇异构酶

机构

  • 10篇复旦大学

作者

  • 10篇郑佐华
  • 9篇毛裕民
  • 5篇季朝能
  • 3篇杜汉森
  • 2篇周宗祥
  • 1篇张丽萍
  • 1篇盛小禹
  • 1篇张炜
  • 1篇张炜
  • 1篇陈燃
  • 1篇汪训明
  • 1篇赵炜
  • 1篇袁有忠
  • 1篇徐迈
  • 1篇朱蔚
  • 1篇王顺德
  • 1篇谈家桢
  • 1篇张洁
  • 1篇殷长传
  • 1篇赵炜

传媒

  • 2篇Journa...
  • 2篇中国生物化学...
  • 1篇生命科学
  • 1篇科学通报
  • 1篇中华微生物学...
  • 1篇复旦学报（自...
  • 1篇云南大学学报...
  • 1篇生物工程学报

年份

  • 6篇1999
  • 2篇1998
  • 1篇1996
  • 1篇1994
共 11 条 记 录，以下是 1-10
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排序方式：
FD耐热逆转录酶的部分酶学性质研究被引量：5
1998年
ＦＤ耐热逆转录酶（ＦＤ－ＴＲＴ）来自一株栖热杆菌菌株．通过ＲＴ－ＰＣＲ方法，论文对ＦＤ－ＴＲＴ的部分酶学性质进行了研究．ＦＤ耐热逆转录酶能耐受９５℃的高温，最适反应温度在６５～７５℃左右，这时ＲＮＡ的高级结构能解开，可以提高逆转录反应的效率；同时引物和ＲＮＡ模板识别的专一性强，可大大提高逆转录的特异性．实验表明ＦＤ－ＴＲＴ逆转录反应的最适条件为：２５ｍｍｏｌ／ＬＴｒｉｓ－ＨＣｌ（ｐＨ８．８，１５ｍｍｏｌ／Ｌ（ＮＨ４）２ＳＯ４，１００μｇ／ｍｌ明胶，５００μｍｏｌ／ＬｄＮＴＰｓ，２５ｐｍｏｌ逆转录引物，１ｍｍｏｌ／ＬＭｎＣｌ２，２ＵＦＤ耐热逆转录酶，反应在６５～７０℃下进行．在上述条件下，用ＲＴ－ＰＣＲ可检出少于５ｐｇ外周血总ＲＮＡ中特异的α珠蛋白ｍＲＮＡ．
郑佐华周宗祥朱蔚殷长传季朝能毛裕民
关键词：逆转录酶耐热逆转录PCR
耐热碱性磷酸酯酶的活性区域定位
1999年
郑佐华季朝能盛小禹毛裕民
关键词：耐热碱性磷酸酯酶
FD耐热逆转录酶的同源模建及结构同源性分析
1998年
FD－TRT是一种耐热逆转录酶（是自行表达并提纯的），根据TapDNA聚合酶的晶体结构为模板，采用计算机同源模建的方法建立FD－TRT的三级结构模型，并对FD－TRT和DNA聚合酶家族的其他蛋白功能差异的结构基础以及保守性功能性残基的作用进行研究，从而为进一步改造FD－TRT分子、提高其耐热性、反应活性以及对RNA模板和DNA模板的选择性提供良好的基础．
张王顺德郑佐华毛裕民
关键词：同源建模嗜热细菌逆转录酶
水稻线粒体基因组中发现线性DNA分子的报道
1994年
高等植物的线粒体基因组比较大,一般从200—2500kb,加上其组织结构相当复杂,研究起来比较困难.目前的研究途径主要是两条,一是借助于脉冲电泳技术进行的,如完整线粒体DNA的脉冲电泳分析、结合某些稀有酶切位点的限制性酶的酶切,某些线粒体大分子DNA的大尺度物理图谱的构建;二是构建线粒体基因组的物理图谱.但因为线粒体结构比较复杂,含有较多的重复序列,构建图谱的难度较大,而且构建的结果有待进一步的检验.
郑佐华汪训明谈家桢
关键词：水稻线粒体基因组脉冲电泳DNA
编码序列的(G+C)%与蛋白质的耐热性相关性分析被引量：7
1999年
运用计算机统计方法，对以木糖异构酶为主的几个蛋白质家族的核酸和氨基酸序列进行分析，发现密码于各位上的（G+C）％与编码序列的（G＋C）％成线性正相关。大多数氨基酸的含量与编码序列的（G＋C）％也存在相关性。按其相关性，将氨基酸分为正相关、负相关和不相关3类。对木糖异构酶氨基酸序列和酶的耐热性的统计发现，那些在统计学上显著的、可能提高蛋白质耐热性的氨基酸替换，往往伴随着编码序列中GC含量的上升。这提示了GC的水平上升，不仅能提高核酸的稳定性，而且有助于提高蛋白的耐热性。
朱蔚郑佐华袁有忠周宗祥毛裕民
关键词：木糖异构酶耐热性
一种移码差错率大幅度下降的聚合酶N端缺失体的研究
1999年
采用双引物定点突变法，构建了以２３６位氨基酸为起始密码子的Ｔａｑ酶（ＴａｑＮＤ２３６）的高表达质粒。并以－１移码突变质粒ｐＦＤＰＭＩ１８作为模板，建立了测定ＤＮＡ聚合酶的体外合成精确性的Ｇａｐｐｅｄ－ＤＮＡ系统。通过转化大肠杆菌ＴＧ１菌株后计数Ｘ－ｇａｌ平板上蓝白菌落的比例，测定了Ｔａｑ和ＴａｑＮＤ２３６两种ＤＮＡ聚合酶在ＤＮＡ体外合成中的移码突变率，发现缺失后的ＴａｑＮＤ２３６复制精确性提高了１０倍以上。
张洁季朝能杜汉森郑佐华毛裕民
关键词：定点突变
全长cDNA的获得──RACE及其他方法进展被引量：32
1999年
全长cDNA的获得是基因克隆的重要内容，也是基因组研究的重要内容之一。cDNA末端快速扩增技术（RACE）是获得全长cDNA的主要辅助手段之一，本文对RACE技术的原理、改进和近几年发展起来的新型RACE（包括RNA连接酶介导的RACE、oligo－capping等）作了综述。同时，对用干全长CDNA克隆的其他技术，如引物载体法、固相支持物法作了介绍。
赵炜郑佐华毛裕民
关键词：RACE全长CDNA基因组
Taq DNA耐热聚合酶在大肠杆菌中的克隆和高表达被引量：8
1996年
从水生栖热菌(Thermus aquaticus)YT-1中分离得到的Taq DNA 聚合酶是一种广泛应用于PCR的耐热DNA聚合酶。由于天然菌株酶产量较低,培养条件要求严格,酶的纯化过程极为繁琐而使产品成本较高,因而促使人们构建适合于大规模生产的基因工程菌株。已有人分别通过不同的途径,使用不同的载体,成功地在大肠杆菌菌株中表达了Taq 耐热DNA聚合酶基因。我们通过与前人不同的途径,把这一基因克隆到大肠杆菌的载体质粒pJLA503上并使其得以高表达,为降低生产成本和进一步研究该酶的各种特性提供了有利条件。
杜汉森季朝能徐迈马匆匆郑佐华毛裕民
关键词：DNA聚合酶基因克隆
FD耐热逆转录酶介导的逆转录 nestedPCR检测丙型肝炎病毒被引量：1
1999年
目的　为检测丙型肝炎病毒，建立 Ｆ Ｄ 耐热逆转录酶介导的逆转录ｎｅｓｔｅｄ Ｐ Ｃ Ｒ 系统。方法　用该系统对１０８ 例可疑患者的血液进行检测，并与 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ 法的结果进行比较。结果　实验表明， Ｆ Ｄ 耐热逆转录酶介导的逆转录ｎｅｓｔｅｄ Ｐ Ｃ Ｒ 比 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ 检出了更高的阳性率。结论　该系统是一种灵敏、有效、特异的 Ｈ Ｃ Ｖ 检测方法。
郑佐华张丽萍赵炜张炜张炜张炜
关键词：FD丙型肝炎病毒
Taq DNA聚合酶功能区域的定位被引量：10
1999年
通过参Ｕ法定点突变产生了ＴａｑＤＮＡ聚合酶Ｎ端分别缺失３个，２３５个，２８７个和４４３个氨基酸的４个缺失体，利用Ｂａｌ－３１连续缺失法产生了ＴａｑＤＮＡ聚合酶的Ｃ端分别缺失了２个、１６个、２９个、３２个、３４个氨基酸的５个缺失体．经ＤＮＡ聚合酶活性测定表明Ｎ端缺失３个，２３５个，２８７个氨基酸后活力和完整的Ｔａｑ相近，而缺失４４３个氨基酸后则失去了ＤＮＡ聚合酶活力；Ｃ端的５个缺失体都失去了ＤＮＡ聚合酶活性．据此ＴａｑＤＮＡ聚合酶的功能区域被定位在２８７～８３２氨基酸之间．
季朝能杜汉森郑佐华黄啸宇毛裕民
关键词：TAQDNA聚合酶
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