蒲春雷
- 作品数：2 被引量：67H指数：2
- 供职机构：中国科学技术大学更多>>
- 发文基金：安徽省教委自然科学基金安徽省“十五”科技攻关项目安徽省自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 蜜环菌胞外漆酶的合成、纯化及性质研究被引量：26
- 2002年
- 研究了蜜环菌胞外漆酶合成条件和酶学性质。实验表明 ,培养基初始pH5 .5、培养温度 2 5℃有利于菌株产酶 ;与麦芽糖、山梨糖和半乳糖相比 ,纤维二糖和棉子糖作为碳源时漆酶产量更高 ;有机氮源比无机氮源有利于漆酶合成。泥炭提取液可显著诱导漆酶生成 ,当其含量为 5 0 %时 ,菌株漆酶最高产量是对照组的 7倍。在蜜环菌发酵上清液中检测到 3个漆酶同功酶组分 ,其主要活性 (约占 75 % )组份漆酶A经 (NH4) 2 SO4沉淀、制备级PAGE电泳和阴离子交换柱层析被分离纯化至电泳均一 ,SDS PAGE法测得酶亚基分子量 5 9kD ,凝胶过滤色谱法测定活性酶分子量 5 8kD。纯化的漆酶A等电点pI为 4.0 ,氧化愈创木酚的最适反应pH为 5 6 ,最适温度为 6 0℃ ,在 6 0℃和6 5℃时半衰期分别为 45min和 36 8min ,在pH5 2～ 7 2范围内稳定性较好。 10 0mmol LCl- 对该酶有显著抑制作用 ,1mmol LSO2 -4 对漆酶有激活作用 ,1mmol LNaN3 可完全抑制酶活性 ,10mmol LEDTA对漆酶活没有明显影响 ,1mmol LCu2 +对漆酶有激活作用。以愈创木酚为底物时 ,测得酶的Km =1 0 2 6mmol L ,Vmax=5 μmol (min·mg) ;以ABTS为底物时 ,测得其Km=0 2 2mmol L ,Vmax=6 9μmol (min·mg)。
- 肖亚中王军王怡平蒲春雷施蕴渝
- 关键词：蜜环菌胞外漆酶纯化发酵条件酶学性质
- 壳聚糖固定化真菌漆酶及其用于处理酚类污染物的研究被引量：42
- 2003年
- Trametessp.AH2 8 2在液体培养条件下经邻甲苯胺诱导能有效合成漆酶同工酶A。以壳聚糖为载体 ,戊二醛为交联剂进行了漆酶A的固定化研究 ,确定酶固定化适宜条件为 :0 1g壳聚糖与 1 5mL 5 %戊二醛交联 8h后 ,加入 30 0U酶固定 1 2h。在此条件下获得的固定化漆酶催化能力为 1 76 4U g载体 ,酶活回收率 5 8 5 %。与游离酶相比 ,固定化漆酶与作用底物愈创木酚的亲和力降低 ,但固定化酶的稳定性有明显改善。固定化漆酶的最适温度为5 5℃ ,比游离酶提高 5℃ ;70℃条件下保温 8h ,固定化酶保留酶活 5 6 5 % ,而在相同条件下游离酶酶活明显下降。使用固定化漆酶反应装置进行酚类化合物转化实验 ,连续进行 1 2批次操作 ,固定化酶酶活仍保持 60 %以上 。
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- 关键词：壳聚糖固定化真菌漆酶酚类污染物
