葛瑞良
- 作品数：11 被引量：25H指数：3
- 供职机构：第二军医大学东方肝胆外科医院更多>>
- 发文基金：上海市科学技术委员会科研基金国家重点基础研究发展计划上海市科学技术委员会资助项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 肝癌细胞系EHBC-512的建立及其生物学特性分析
- 2009年
- 目的:建立一株新的肝癌细胞系EHBC-512并分析其生物学特性,为后续研究奠定基础。方法:切取肝癌手术标本进行体外原代培养,采用光镜、电镜观察细胞形态,流式细胞检测细胞周期,并进行染色体核型分析,免疫荧光及化学发光法检测细胞上清液AFP的表达;裸鼠体内种植观察异种成瘤情况。结果:光镜下细胞形态具有肝癌细胞特征;电镜下细胞具有较多的线粒体,核异形性明显,染色体众数为110～120条。细胞群体倍增时间为48h,贴壁率达90%。免疫荧光染色显示:细胞AFP、CK18表达,CEA、CK19未表达;细胞高分泌AFP,上清液AFP含量>1210μg/L。裸鼠体内成瘤病理检测与原发灶保持相同的结构和细胞形态。结论:成功建立一株生物学特性稳定并能体外高分泌AFP的人类肝癌细胞系(EHBC-512),为肝癌研究提供新的研究工具。
- 邹奇飞侯瑛刘健葛瑞良沈锋
- 关键词：肝肿瘤肝细胞癌细胞培养细胞系
- 一种肝癌细胞系EHBC-512及其应用
- 本发明涉及一种肝癌细胞系EHBC-512，所述的肝癌细胞系EHBC-512保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏编号为：CCTCC NO：C200911。本发明还提供了肝癌细胞系EHBC-512的用途。本发明优点在于：本发明...
- 邹奇飞沈锋侯瑛葛瑞良刘健
- 文献传递
- TRAIL受体在人肝细胞癌中的表达及TRAIL诱导肝癌细胞调亡研究
- 【引言】肝细胞肝癌是一种恶性程度很高的消化系统肿瘤，临床治疗主要采用以手术为主的综合治疗方式。TRAIL 是肿瘤坏死因子家族新成员，它可特异性诱导多种肿瘤细胞的凋亡，而对正常细胞发生凋亡赦免。随后的研究发现，TRAIL ...
- 葛瑞良
- 关键词：肝细胞癌TRAIL受体免疫组织化学
- 文献传递
- 原发性肝癌患者手术治疗远期疗效的影响因素被引量：15
- 2014年
- 目的探讨原发性肝癌患者手术治疗远期疗效的影响因素。方法 413例原发性肝癌并行肝部分切除术患者,剔除失访的41例后,对其余372例患者的远期生存状况进行观察,并对其相关影响因素进行分析。结果 5年生存率为14.78%(55/372),余317例死亡患者,根据术后是否存在复发转移分为复发转移组(n=194)与非复发转移组(n=123)。两组患者在有无乙肝及肝硬化、肿瘤大小、包膜完整与否、分化程度、是否存在血管癌栓及多结节融合等方面相对比,差异均有统计学意义(P<0.05);两组患者在术中出血量、输血情况、手术时间及肝门阻断时间、手术切缘、是否存在血管侵犯及肿瘤破裂等方面比较,差异并无统计学意义(P>0.05)。经Logistic回归分析发现,乙肝、肝硬化、肿瘤大小、包膜完整与否、分化程度、多结节融合及血管癌栓是否存在,为影响原发性肝癌患者术后复发转移的独立危险因素(P<0.05)。结论复发转移是影响患者远期生存状况的重要因素,而乙肝、肝硬化、肿瘤大小、包膜完整与否、分化程度、多结节融合及血管癌栓是否存在,为影响原发性肝癌患者术后复发转移的独立危险因素。
- 王伟葛瑞良胡雷王义
- 关键词：原发性肝癌肝部分切除术影响因素
- 糖原合酶激酶-3β在肝癌细胞迁移过程中的作用被引量：1
- 2010年
- 目的通过调节糖原合酶激酶-3β(GSK-3β)来观察其对肝癌细胞迁移能力的影响,研究GSK-3β在肝癌细胞迁移过程中发挥的作用。方法分别应用GSK-3特异性抑制剂LiCl和SB216763抑制GSK-3β的活性,或转染GSK-3βWT、GSK-3βS9A、GID5-6质粒影响GSK-3β的活性,通过划痕实验、小室迁移实验、微管组织中心体(MTOC)实验等观察处理前后肝癌细胞系SMMC-7721和Hep3B迁移能力的改变,并用免疫细胞化学法观察肝癌细胞迁移后磷酸化GSK-3β(pGSK-3β)的分布。结果划痕实验发现,用LiCl和SB216763处理后,SMMC-7721细胞的相对迁移率分别下降36.44%和41.78%,Hep3B细胞的相对迁移率都下降26.66%。转染GSK-3βWT后,GSK-3β和pGSK-3β表达上调,SMMC-7721细胞相对迁移率降为61.27%;转染GSK-3βS9A后,GSK-3β表达上调,pGSK-3β变化不明显,SMMC-7721细胞相对迁移率降为38.61%;转染GID5-6后,GSK-3β变化不明显,pGSK-3β表达增多,SMMC-7721细胞相对迁移率降为36.49%。免疫细胞化学可见,在正常培养的条件下肝癌细胞发生迁移3h后,细胞内pGSK-3β呈现出在细胞前沿边缘附集的现象;而加入LiCl后,pGSK-3β的分布则未呈现这种边缘附集的现象。MTOC实验发现,未加入抑制剂时Hep3B细胞MTOC阳性率在60%以上,而应用GSK-3β抑制剂后MTOC阳性率明显下降。结论GSK-3β在肝癌细胞的迁移过程中起到重要作用,应用针对GSK-3β的特异性抑制药物能够影响肝癌细胞的极性化,降低肝癌细胞的迁移能力。
- 王剑飞侯瑛葛瑞良王以政沈锋吴孟超
- 关键词：糖原合酶激酶-3Β肝肿瘤肝细胞癌细胞迁移
- 原发性肝癌的非手术治疗进展被引量：3
- 2008年
- 原发性肝癌的治疗已形成以手术为主的综合模式。然而,由于原发性肝癌症状隐匿,多数患者在获得临床诊断时已失去了手术切除的机会,因此非手术途径在原发性肝癌的治疗中占有重要地位。近年来,原发性肝癌的非手术治疗已取得了明显进展,尤其是生物治疗在临床方面的应用已取得了突破。本文就原发性肝癌的非手术治疗进展作一综述。
- 孙媛媛葛瑞良于凤海
- 关键词：肝肿瘤介入治疗生物治疗
- trail受体在人肝细胞癌中的表达及trail诱导肝癌细胞凋亡研究
- 【目的】研究trail各受体在肝癌和癌旁组织的差异性表达,确定死亡受体、诱骗受体的表达与trail的作用关系,探讨trail应用于临床肝癌治疗的可能性.该实验证明了trail的凋亡诱导作用,而且作用有剂量依赖性,随着tr...
- 葛瑞良
- 关键词：肝细胞癌TRAIL受体RT-PCR方法
- 文献传递网络资源链接
- 计算机辅助手术导航系统在肝细胞癌肝切除术中的初步应用被引量：3
- 2012年
- 在我国，以肿瘤为中心的局部切除仍然是当前肝细胞癌肝切除的主要术式。相对于规则性肝切除，肝细胞癌局部切除手术更复杂，对肝内血管的处理方案决定了肝细胞癌肝切除的安全性和疗效。肝内血管三维成像的应用使我们在术前就可以清楚了解肝内血管与肿瘤间的立体解剖关系，并据此进行术前虚拟手术规划，从而精确地指导肝切除的实施。
- 袁磊张友磊王义葛瑞良程月娥吴孟超
- 关键词：肝切除术肝细胞癌规则性肝切除肝内血管局部切除
- TRPC通道阻滞剂SKF96365调节人血管内皮细胞内游离钙离子浓度被引量：1
- 2008年
- 孙媛媛葛瑞良邹奇飞沈锋
- 关键词：钙离子瞬时受体电位通道SKF
- TPRC3通道对MPP^＋所致MN9D细胞损伤的保护作用被引量：2
- 2008年
- 目的探讨经典瞬间受体电位通道蛋白(transient receptor potential-canonical channel,TRPC)家族在1-甲基-4-苯基吡啶离子(1-Methyl-4-phenylpy ridinium ion,MPP+)导致的MN9D细胞毒性损伤中的作用。方法用不同浓度(62.5、125、250、500、1000μmol/L)的MPP+处理MN9D细胞24h,500μmol/L MPP+处理MN9D细胞不同时间(3、6、12、24、36h),建立细胞损伤模型。用RT-PCR的方法检测MN9D细胞中内源性TRPC的表达情况;500μmol/L MPP+作用于MN9D细胞,以Western blot法检测MN9D细胞内源性TRPC表达的变化;构建GFP与TRPC3-GFP腺病毒载体,转染到MN9D细胞中,以四甲基偶氮唑盐比色法(methods the tetrazolium,MTT)的方法检测过表达的TRPC3对MPP+引起的MN9D细胞损伤的保护作用。结果500μmol/LMPP+处理MN9D细胞6h就可以显著降低细胞内TRPC3蛋白水平的表达,但对TRPC6的表达无影响。过表达TRPC3能够保护MN9D细胞免受MPP+的毒性损伤。结论MPP+特异性地降低MN9D细胞TRPC3蛋白水平,过表达TRPC3可以抑制MPP+引起的MN9D细胞损伤。这种现象提示TRPC3通道可能参与了帕金森病发病的分子机制。
- 张雷王军锋葛瑞良王晓民
- 关键词：帕金森病神经保护
