苏琳琳
- 作品数:7 被引量:17H指数:3
- 供职机构:第四军医大学西京医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
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- 人羊膜上皮干细胞来源外泌体对大鼠全层皮肤缺损创面愈合的影响被引量:7
- 2017年
- 目的探讨人羊膜上皮干细胞来源外泌体对大鼠全层皮肤缺损创面愈合的影响。方法(1)取笔者单位妇产科5名足月分娩孕妇的羊膜组织,采用胰蛋白酶消化法分离人羊膜上皮干细胞并观察细胞形态;取第3代细胞,用罗丹明标记的鬼笔环肽染色,观察细胞骨架;另取第3代细胞,采用流式细胞仪检测细胞表面标志物CD29、CD31、CD34、CD90、CD105、SSEA3、SSEA4和免疫相关标志物人白细胞抗原DR位点(HLA-DR)的表达;另取第3代细胞,进行成脂、成骨诱导分化鉴定。(2)取第3代人羊膜上皮干细胞,用含体积分数10%无外泌体FBS的DMEM培养基培养,超速离心法从细胞培养上清液中提取人羊膜上皮干细胞来源外泌体,用扫描电镜观察其形态。(3)取6只成年SD大鼠,于每只大鼠背部制备4个面积为1 cm×1 cm的全层皮肤缺损创面,按随机数字表法将每只大鼠创面分为对照组及25、50、100 μg/mL外泌体组(每组6个创面),分别于创面四周皮下多点均匀注射总体积100 μL的PBS及25、50、100 μg/mL人羊膜上皮干细胞来源外泌体。伤后7、14、21 d,观察创面愈合情况计算创面愈合率。伤后21 d,取各组创面愈合组织,HE染色,观察计数皮肤附件;Masson染色,观察胶原纤维排列。对数据行重复测量方差分析、随机区组方差分析、单因素方差分析及Bonferroni检验。结果(1)分离培养的细胞呈典型的鹅卵石样,细胞表面分布较多微绒毛;细胞CD29、CD90、SSEA3、SSEA4阳性表达率高于50.0%,CD105阳性表达率为8.0%,CD31、CD34和HLA-DR阳性表达率几乎为0;细胞经诱导后可分化为脂肪细胞和成骨细胞。综上,培养细胞鉴定为人羊膜上皮干细胞。(2)人羊膜上皮干细胞来源外泌体为直径50~150 nm的圆形或椭圆形囊泡。(3)伤后7、21 d,各组创面愈合率相近(P值均大于0.05)。伤后14 d,50、100 μg/mL
- 赵彬吴高峰张熠杰张伟杨芳芳肖丹曾凯旋石继红苏琳琳胡大海
- 关键词:羊膜干细胞外泌体
- 活化沉默信息调节因子1对大鼠严重烫伤早期心肌损害的影响被引量:3
- 2014年
- 目的 探讨活化沉默信息调节因子1(SIRT1)对大鼠严重烫伤早期心肌损害的作用.方法 取24只健康雄性SD大鼠,按照随机数字表法分为假伤组、单纯烫伤组、白藜芦醇治疗组,每组8只.单纯烫伤组和白藜芦醇治疗组大鼠背部于95℃热水浴18s,制成30% TBSAⅢ度烫伤模型,2组大鼠即刻分别腹腔注射生理盐水10 mL(50 mL/kg)与相同剂量生理盐水+白藜芦醇10 μL(1 g/mL,50 mg/kg);假伤组大鼠仅背部于20℃室温水浴18s模拟烫伤过程.伤后6h收集3组大鼠心脏组织及腹主动脉血,HE染色观察组织形态,ELISA法检测血清肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)含量,蛋白质印迹法和实时荧光定量RT-PCR法检测组织中SIRT1、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)的蛋白和SIRT1、caspase-3、IL-1β、TNF-α mRNA表达水平(蛋白水平以灰度值表示).对数据行单因素方差分析、LSD-t检验. 结果 (1)假伤组大鼠心肌纤维呈不规则圆柱形、排列整齐、横纹清晰.单纯烫伤组大鼠心肌间质水肿,心肌纤维排列紊乱并断裂、溶解.白藜芦醇治疗组大鼠心肌间质水肿、心肌纤维排列紊乱及溶解程度均较单纯烫伤组减轻.(2)单纯烫伤组大鼠血清CK、LDH含量分别为(2 385 ±712)、(2 551±196)U/L,显著高于假伤组的(290±59)、(759±60) U/L(£值分别为9.466、25.452,P值均小于0.01).白藜芦醇治疗组大鼠血清CK、LDH含量[(1 336±149)、(2 209±133)U/L]显著低于单纯烫伤组(£值分别为-4.506、-4.860,P值均小于0.01).(3)单纯烫伤组大鼠心脏组织SIRT1、caspase-3蛋白表达量分别为0.47±0.11、0.48 ±0.12,显著高于假伤组的0.18±0.06、0.09 ±0.05(t值分别为4.813、9.014,P值均小于0.01).白藜芦醇治疗组大鼠心脏组织SIRT1蛋白表达量(0.74±0.18)显著高于单纯烫伤组(t=4.561,P<0.01),caspase-3蛋白表达量(0.21 ±0.08)显著低于单纯烫伤组(£=-6.239,P
- 樊磊白晓智杨龙龙王姝月杨晨李超苏琳琳吕根法胡大海
- 关键词:心肌半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3白细胞介素1Β
- 活化沉默信息调节因子1对大鼠严重烧伤早期肾损害的影响被引量:3
- 2017年
- 目的探讨行沉默信息调节因子1(SIRT1)活化对大鼠严重烧伤早期肾损害的影响。方法取30只雄性SD大鼠,按照随机数字表法分为假伤组、单纯烧伤组、SIRT1激动剂组,每组10只。单纯烧伤组和SIRT1激动剂组大鼠背部造成30%TBSAⅢ度烫伤(下称烧伤),伤后即刻分别腹腔注射生理盐水、终质量浓度为1mg/mL白藜芦醇溶液50mL/kg;假伤组大鼠致假伤,伤后即刻腹腔注射生理盐水50mL/kg。伤后24h收集3组大鼠肾脏组织及腹主动脉血,HE染色观察。肾脏组织形态,ELISA法检测血清肌酐、尿素氮含量,蛋白质印迹法检测肾脏组织中SIRT1、Bax、Bcl-2蛋白表达,实时荧光定量RT-PCR法检测肾脏组织中TNF-α、IL-1β、IL-10的mRNA表达。对数据行单因素方差分析、LSD-t检验。结果(1)假伤组大鼠肾小管、肾小球结构完整;单纯烧伤组大鼠肾小管内管型形成,小管结构不清,肾小球固缩;SIRT1激动剂组大鼠肾小管结构较为完整,肾小球固缩程度较单纯烧伤组轻且固缩的肾小球数量较少。(2)单纯烧伤组大鼠血清肌酐、尿素氮含量分别为(67±14)μmol/L、(22.0±4.4)mmol/L,显著高于假伤组的(28±7)μmol/L、(5.5±1.2)mmol/L(t值分别为6.07、11.53,P值均小于0.01)。SIRT1激动剂组大鼠血清肌酐、尿素氮含量分别为(39±9)μmol/L、(14.1±1.7)mmol/L,显著低于单纯烧伤组(t值分别为4.09、4.17,P值均小于0.01)。(3)单纯烧伤组大鼠肾脏组织中SIRT1、Bcl-2蛋白表达量显著低于假伤组(t值分别为16.32、19.58,P值均小于0.01),Bax蛋白表达量显著高于假伤组(t=5.98,P〈0.01)。SIRT1激动剂组大鼠肾脏组织中SIRT1、Bcl-2蛋白表达量显著高于单纯烧伤组(t值分别为6.94、5.37,P值均小于0.01),Bax蛋白表达量显著低于单纯烧伤组(t=3.44,P〈0.01)。(4)�
- 白晓智何亭刘洋张伟韩夫杨晨蔡维霞贾艳慧石继红韩军涛苏琳琳胡大海
- 关键词:烧伤细胞凋亡炎症反应
- 缺氧对人真皮成纤维细胞向肌成纤维细胞表型转化的影响及其机制被引量:2
- 2017年
- 目的探讨缺氧对人真皮Fh向肌Fh表型转化的影响及其机制。方法取对数生长期第3代健康成人真皮Fb,用含体积分数10%FBS的DMEM培养基培养,进行以下5项实验。(1)实验1、2、3均将所取细胞按随机数字表法分为常氧组、缺氧组,每组10皿。常氧组细胞于含体积分数21%氧气环境中培养,缺氧组细胞于含体积分数1%氧气环境中培养。培养0、48h,2组分别取5皿细胞,实验1用实时荧光定量RT—PCR法检测细胞中肌Fh标志物α平滑肌肌动蛋白(α—SMA)、Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原mRNA表达,实验2用蛋白质印迹法检测细胞中α-SMA、Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原蛋白表达,实验3用蛋白质印迹法检测细胞中NF-κB蛋白表达。(2)实验4将细胞按随机数字表法分为常氧组、缺氧组、缺氧+吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(PDTC)组,每组5皿。前2组细胞同实验1处理,缺氧+PDTC组细胞同缺氧组细胞处理并在培养基中加入4mL终物质的量浓度为10μmol/LPDTC。培养48h,蛋白质印迹法检测各组细胞中NF—κB蛋白表达。(3)实验5将细胞按随机数字表法分为常氧组、缺氧组、缺氧+PDTC组、常氧+PDTC组,每组5皿。前3组细胞均同实验4处理,常氧+PDTC组细胞同常氧组细胞处理并在培养基中加入4mL终物质的量浓度为10μmol/LPDTC。培养48h,蛋白质印迹法检测各组细胞中α—SMA、Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原蛋白表达。对数据行析因设计方差分析、单因素方差分析、LSD—t检验。结果(1)与常氧组相应时相点比较,缺氧组Fb培养0h时α-SMA、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原mRNA和蛋白表达量以及NF-κB蛋白表达量均无明显变化(t值为-1.21~2.04,P值均大于0.05),培养48h时α—SMA、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原mRNA和蛋白表达量以及NF—κB蛋白表达量均显著升高(t值为-12.57~-3.44,P值均小于0.01)。(2)培养48h,缺氧组Fh中NF—κB�
- 赵彬韩夫张伟王许杰张健杨芳芳石继红苏琳琳胡大海
- 关键词:缺氧成纤维细胞肌成纤维细胞表型转化
- 瘢痕性秃发手术方法选择及临床疗效评估被引量:2
- 2017年
- 目的总结瘢痕性秃发患者手术治疗的临床经验,探讨临床手术治疗瘢痕性秃发的最佳策略。方法回顾性分析2012年1月至2016年12月间的80例瘢痕性秃发患者手术治疗的临床资料,收集患者临床一般资料,记录手术方法及相关不良事件,术后1周、1、3、6个月和1~2年复诊。按照非常满意、满意、不满意和无效4级标准以问卷的方式进行疗效评定。结果本组80例瘢痕性秃发患者,40例采用扩张皮瓣+毛囊单位提取移植术(FUE),10例采用瘢痕部分切除+FUE修复,30例直接采用FUE修复。20例一期手术完成治疗,60例均经二期治疗。一期患者术后非常满意者占70%,满意者占30%。二期患者术后非常满意者占85%,满意者占15%。结论瘢痕性秃发需要综合手术治疗,FUE是扩张器技术之后的又一利器,联合扩张器治疗大面积瘢痕性秃发的临床效果优于单一方法治疗组。
- 张伟韩夫计鹏胡晓龙赵彬张熠杰白晓智苏琳琳雷惠斌胡大海
- 缺氧通过NF-κb信号通路促进人真皮成纤维细胞向肌成纤维细胞表型转化
- 观察缺氧对人皮肤成纤维细胞向肌成纤维细胞表型转化的影响和机制,探讨缺氧在皮肤增生性瘢痕发病机制中的作用.结果表明:缺氧通过NF-κb信号通路促进人真皮成纤维细胞向肌成纤维细胞表型转化,缺氧与皮肤增生性瘢痕的形成密切相关。
- 赵彬韩夫张伟王许杰张健杨芳芳石继红苏琳琳胡大海
- 关键词:增生性瘢痕人真皮成纤维细胞肌成纤维细胞NF-ΚB信号通路
- 严重烫伤早期活化SIRT1对大鼠肾脏损伤的影响
- 本文探讨活化沉默信息调节因子1(SIRT1)在严重烫伤早期大鼠肾脏损伤中的作用.30只健康雄性SD大鼠,按照随机数字表法分为假伤组、单纯烫伤组、烫伤+SIRT1激动剂处理组,每组10只.单纯烫伤组和烫伤+SIRT1激动剂...
- 白晓智何亭刘洋张伟韩夫杨晨蔡维霞贾艳慧石继红韩军涛苏琳琳胡大海
- 关键词:烫伤肾脏损伤肾保护作用