胡茂志
- 作品数：35 被引量：114H指数：6
- 供职机构：扬州大学生物科学与技术学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 抗猪肺炎支原体特异性P36蛋白单克隆抗体的制备与鉴定被引量：6
- 2006年
- 表达P36基因的重组菌BL21(6P-1-P36)经诱导表达,超声波裂解后高速离心,分别收集上清和沉淀。可溶性表达产物亲和层析纯化后用于单抗筛选;同时,用GST-P36包涵体抗原腹腔注射免疫BALB/c小鼠(400μg/只)。利用淋巴细胞杂交瘤技术,获得了1株能分泌特异性抗体的杂交瘤细胞株5A7-2。生物学特性鉴定表明,腹水单抗的间接ELISA效价为1∶2.5×106;免疫球蛋白亚类为IgG2a。免疫印迹结果显示,腹水单抗能与GST-P36融合蛋白反应而不与谷胱苷肽转移酶(GST)反应,并且在猪肺炎支原体(Mycop lasma hyopneumoniae,Mhp)蛋白36000位置也有明显的条带,说明5A7-2所分泌的是针对MhpP36蛋白的单抗。P36蛋白是Mhp种特异性蛋白,其单克隆抗体的制备,为Mhp种特异性检测方法的建立奠定了基础。
- 胡茂志焦新安潘志明邵国青刘秀梵
- 关键词：猪肺炎支原体单克隆抗体
- 鸡CD3分子单克隆抗体及其免疫生物学特性
- 研制抗鸡CD3分子特异性单克隆抗体(mAb)。用重组真核表达质粒pcDNA3.1-CD3免疫6周龄BALB/c小鼠,应用淋巴细胞杂交瘤技术,制备抗鸡CD3分子mAb。共获得7株特异性分泌抗鸡CD3分子的mAb,分别命名为...
- 张小燕白海焦新安潘志明胡青海胡茂志孙林李玉君董慧单艳菊张成全
- 关键词：单克隆抗体
- 文献传递
- 抗猪肺炎支原体特异性P36蛋白单克隆抗体的制备与鉴定
- 表达P36基因的重组菌BL21(6P-1-P36)经诱导表达,超声波裂解后高速离心,分别收集上清和沉淀.可溶性表达产物亲和层析纯化后用于检测;同时,用GST-P36包涵体沉淀腹腔注射免疫BALB/c小鼠(400μg/只)...
- 胡茂志焦新安潘志明黄金林邵国青刘秀梵
- 关键词：猪肺炎支原体单克隆抗体融合蛋白
- 文献传递
- 流式细胞术在活化T淋巴细胞检测中的应用被引量：3
- 2009年
- 免疫细胞的活化和增殖是免疫应答产生的一种标志。静止T淋巴细胞经过抗原刺激活化后,表现出一系列的特征,如细胞膜表面活化分子的表达、细胞分裂和产生细胞因子等。近年来,已有利用流式细胞术(FCM)通过检测免疫细胞活化后的特性,来分析抗原特异性免疫应答及其应答规律的报道。论文分别从几个不同的角度综述了FCM在活化T淋巴细胞检测中的应用。
- 胡茂志孟闯潘志明焦新安刘秀梵
- 关键词：T淋巴细胞活化流式细胞术
- 猪肺炎支原体特异性蛋白P36基因的克隆与表达
- 猪气喘病也称猪支原体性肺炎(Mycoplasma Pneumonia of Swine,MPS),是由猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae,Mhp)引起的一种慢性呼吸道传染病。本病广泛分布于世界...
- 胡茂志焦新安张小荣潘志明黄金林殷月兰张晓明邵国青刘文博刘秀梵
- 文献传递
- 抗鸡γ-干扰素单克隆抗体的研制及鉴定被引量：3
- 2007年
- 应用淋巴细胞杂交瘤技术,以纯化的原核表达产物His-ChIFN-γ作为免疫原,以纯化的GST-ChIFN-γ作为检测原,制备抗鸡γ-干扰素(ChIFN-γ)mAb;采用ELISA、Dot-ELISA和ECL法鉴定单克隆抗体(mAb)的生物学特性。获得4株可稳定分泌抗ChIFN-γmAb的杂交瘤细胞株1G10、2C3、3E5、3E3,其腹水ELISA效价为2×104~8.2×105;Ig亚类分别为IgG1、IgG1、IgG1和IgG2a。Dot-ELISA和ECL试验结果均表明:4株mAb只与表达ChIFN-γ的重组大肠杆菌反应,而与未表达ChIFN-γ的菌株不反应,表明4株mAb均特异性针对ChIFN-γ。鸡脾脏淋巴细胞经PMA刺激后,经固定、破膜,用mAb 2C3标记,利用流式细胞术可成功地检测到表达ChIFN-γ的T淋巴细胞。mAb为家禽的免疫检测、免疫细胞功能分析和免疫调节等研究提供依据。
- 戴华郑佳玉胡茂志陈俊华潘志明焦新安
- 关键词：Γ-干扰素单克隆抗体流式细胞术
- 嵌合鞭毛蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)和沙门菌SL5928中的表达与组装分析（英文）
- 2017年
- 鞭毛蛋白根据能否组装可以表达为单体或多聚体。目前,关于它们之间的区别少有报道。文中,将重组质粒p ET-fli C/M2e2分别导入大肠杆菌BL21(DE3)和沙门菌SL5928中来表达嵌合鞭毛蛋白mfli C/M和pfli C/M,然后分析它们的组装特性。SDS-PAGE结果表明,两重组菌成功表达了嵌合鞭毛蛋白。透射电镜观察显示,在重组大肠杆菌表面未见鞭毛,而重组沙门菌表面呈现鞭毛。将嵌合蛋白纯化后,圆二色谱(Circular dichroism,CD)分析表明,两者的CD信号明显不同,pfli C/M的CD信号与野生型鞭毛蛋白一致,而mfli C/M基本上没有CD信号出现。动态光散射分析表明,mfli C/M的聚集程度明显低于pfli C/M。将嵌合蛋白转染小鼠腹腔细胞3 h后,两者均能诱导产生IL-1β,但mfli C/M组高于pfli C/M组。以上结果对于鞭毛蛋白表达形式的选择具有重要的参考价值。
- 胡茂志潘志明杨芸孟闯张磊耿士忠焦新安
- 关键词：鞭毛蛋白白细胞介素1Β
- 猪肺炎支原体单克隆抗体的制备与鉴定
- 用KM2培养基(含马血清)培养猪肺炎支原体(Mhp)ZCF23株。高速离心收获培养物并用PBS悬浮,经反复冻融裂解后作为免疫原,腹腔注射免疫BALB/c小鼠。利用淋巴细胞杂交瘤技术,获得了5株分泌特异性抗体的单克隆细胞株...
- 胡茂志焦新安潘志明黄金林刘业兵邵国青刘秀梵
- 关键词：猪肺炎支原体单克隆抗体
- 文献传递
- 小鼠巨噬细胞系体外感染卡介苗的应答被引量：1
- 2010年
- 【目的】探讨小鼠巨噬细胞系RAW264.7体外感染卡介苗的应答。【方法】体外感染RAW264.7细胞23h后,分析细胞形态和细胞表面共刺激分子的表达。然后去除培养上清中的卡介苗,继续培养不同时间,通过CFSE、annexin V/PI和Rh123标记,分析宿主细胞的应答。【结果】卡介苗感染23h后,细胞生长状态良好,细胞内能明显观察到吞噬泡中的BCG。细胞表面共刺激分子CD40、CD54、CD80、CD86、CD11b的表达明显升高,CD11c、I-Ad以及H-2Kd的表达变化不明显。CFSE标记卡介苗后,随着培养时间的延长,荧光强度逐渐减弱,但是4天后仍然明显地高于对照组。除去培养上清中的卡介苗后继续培养,含有卡介苗的细胞逐渐减少,继续培养60h后基本检测不到。另外,卡介苗感染不能诱导细胞凋亡,线粒体膜电位先升高后降低,5d后,基本上与对照组一致。【结论】通过以上分析,为卡介苗免疫机理的研究提供了重要数据。
- 胡茂志陈义芳韩璐季琰郑佳玉孟闯周海霞陈祥焦新安刘秀梵
- 关键词：卡介苗RAW264.7共刺激分子线粒体膜电位
- 枸杞酰胺体外对镉致成骨细胞凋亡的保护作用被引量：1
- 2023年
- 旨在探究枸杞酰胺(aurantiamide acetate,AA)在镉(Cd)致成骨细胞凋亡中的保护效应,本研究以ROS1728大鼠成骨细胞系为研究对象,添加5μg·mL^(-1)AA预处理3 h后,加入20μg·mL^(-1)氯化镉(CdCl2)继续处理6 h。利用流式细胞术检测细胞凋亡率、线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,MMP)、活性氧簇(reactive oxygen species,ROS),Western blot检测Bcl-2、Bax蛋白,高内涵细胞成像分析系统观察和分析细胞线粒体纹理结构和指数变化。结果显示,经过AA预处理后,较Cd处理组,AA极显著抑制Cd导致的ROS1728细胞凋亡率上升,Bax/Bcl-2比值增高,MMP下降,线粒体纹理结构指数下降,ROS含量增多(P<0.01)。上述结果表明,AA通过降低细胞内过氧化物含量,维持细胞线粒体结构的完整,抑制镉诱导的ROS1728细胞凋亡。
- 常颖艳赵鸿雁胡茂志胡茂志
- 关键词：镉凋亡线粒体ROS
