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肿瘤抗原MAGE2HLAA2限制性CTL表位的预测被引量：7: 2000年; 目的　预测黑色素瘤抗原MAGE 2的HLA A2限制性CTL表位。方法　采用超基序法与量化基序法的联合应用。结果　发现 8个HLA A2限制性CTL表位。; 耿淼贾正才万瑛赵建平吴玉章; 关键词：肿瘤抗原 CTL表位 HLA-A2

肿瘤抗原MAGE-2多抗原肽疫苗的设计合成及免疫原性研究被引量：5: 2004年; 目的　采用多抗原肽 (multipleantigenpeptide ,MAP)设计方案 ,提高线性短肽的免疫原性。方法　对肿瘤抗原MAGE 2 2 2 0 2 2 8细胞毒性T细胞 (cytotoxicTlymphocyte ,CTL)表位进行分子修饰 ,设计、合成四分支多抗原肽 (MAP4)。标准Fmoc合成方案进行合成 ,液相色谱质谱联用 (LC MS)进行目的肽鉴定。以体外刺激人外周血单核细胞 (PBMC)诱导CTL效应及IFN γ分泌 ,标准 51 Cr释放实验与Elispot实验进行免疫原性的研究。结果　标经准 51 Cr释放实验验证 ,低浓度的MAP4可以诱导出有效的CTL效应 ,Elispot实验显示MAP4能够有效诱导的IFN γ分泌。结论　MAP的构建能够增强CTL效应和IFN γ的分泌。; 耿淼吴玉章管孝鞠贾正才周伟邹丽云; 关键词：MAP 免疫原性

DC-SIGN荧光融合蛋白的构建、表达和生物学功能初探被引量：5: 2006年; 目的构建绿色荧光蛋白(EGFP)标记的DCSIGN分子(DCSIGNEGFP融合蛋白),并在哺乳动物细胞中获得功能性表达。方法PCR方法获得DCSIGN分子和EGFP分子的cDNA,分别克隆入真核表达载体pEGFPN1和真核表达载体pCI,使EGFP荧光蛋白分别位于DCSIGN蛋白的C末端和N末端。在转染COS7细胞后,在激光共聚焦显微镜和流式细胞仪检测重组分子的表达及融合蛋白在细胞定位情况。激光共聚焦显微镜检测融合蛋白的功能情况。结果获得了预期的重组表达质粒,经DNA测序证实开放阅读框正确,转染COS7细胞后绿色荧光蛋白位于细胞膜,仅EGFP位于DCSIGNN末端的融合蛋白可被抗DCSIGN抗体结合。EGFP位于DCSIGNN末端的融合蛋白可有效摄取DCSIGN受体的高亲和力配体le(x)寡糖。结论所构建的DCSIGNEGFP融合蛋白在细胞内表达后具有细胞表面受体分子的特征性分布,可被抗DCSIGN抗体检测及摄取特异性配体,为进一步深入研究DCSIGN分子功能提供了良好的模型。; 王靖雪张小萍贾正才耿淼吴玉章

肿瘤抗原MAGE-12的表位及二级结构预测被引量：13: 2001年; 目的预测肿瘤抗原 MAGE- 12的α-螺旋二级结构、B细胞表位和 MAGE- 12的 HL A- A2限制性 CTL表位。方法用 Garnier- Robson和 Chou- Fasman方案预测肿瘤抗原 MAGE- 12的α-螺旋二级结构 ;用 Kyte- Doolittle亲水方案预测肿瘤抗原 MAGE- 12的 B细胞表位 ;用简单基序 ( simple motifs)和延展基序 ( extended m otifs)对肿瘤抗原 MAGE- 12的 HL A-A2限制性 CTL 表位进行预测。结果 MAGE- 12可能含有较多的 α-螺旋 ;B细胞识别的表位可能在 82～ 93残基 ( QSDEGSS-NEEQE)或附近和 3～ 14残基 ( L EQRSQHCKPEE)或附近 ;发现 1个 HL A- A2限制性 CTL 表位为 FL WGPRAL V( 2 71～2 79)。结论用亲水性方案和基序法预测肿瘤抗原 MAGE- 12的 B细胞表位和 MAGE- 12的 HL A- A2限制性 CTL 表位 ,为实验方法探索 MAGE- 12的表位提供有用线索。; 李艳秋吴玉章贾正才耿淼万瑛管孝鞠; 关键词：肿瘤抗原表位 MAGE-12

肽疫苗修饰研究进展被引量：1: 2001年; 随着免疫学和组合化学的进展 ,肽疫苗研究已取得了极大成功 ,但在对其实验与应用中发现肽疫苗存在许多缺陷 ,导致免疫原性相对较弱。国内外根据其不足进行了多种修饰 ,以改善其免疫原性。; 耿淼; 关键词：肽疫苗修饰免疫原性

利用分子模拟技术筛选HLA-A2限制性CTL表位肽被引量：4: 2003年; 以肿瘤抗原MAGE-2为例,运用分子模拟方法对其4个优势候选HLA-A2限制性CTL表位进行初步鉴定,再通过多肽结合实验对鉴定结果进行验证.结果表明,4个候选肽中有3个与HLA-A2分子有较好的亲和力,进一步进行体外诱导CTL效应实验显示,3个高亲和力的表位肽可在体外有效诱导特异性CTL效应.利用计算机辅助鉴定CTL表位,克服了以往筛选肽要将肽逐一洗脱下来的繁琐实验过程,并且可直接观测到多肽复合物的结合模式,该技术在筛选大量优势CTL表位中具有较大的应用价值.; 耿淼吴玉章林治华贾正才周伟邹丽云; 关键词：分子模拟免疫抗原递呈

人源轮状病毒vp7基因的克隆与转基因植物研究被引量：14: 2003年; 目的　克隆人源轮状病毒外壳蛋白vp7基因 ,以制备转基因植物疫苗。方法　用RT PCR方法制备vp7基因 ,以植物高效表达质粒PBI12 1为载体 ,构建重组DNA质粒。重组体用载体上的通用引物为测序引物 ,鉴定克隆的正确性。再将鉴定过的重组质粒用农杆菌介导法转染马铃薯外植体 ,分别用PCR、Westernblot法鉴定阳性转化植株中vp7基因的表达。结果　成功地将vp7转入马铃薯植株中 ,并且在转化植株中检测出了vp7的表达。结论　成功地构建了重组PBI12 1 hvp7质粒。; 李晋涛吴玉章费蕾邹丽云唐艳牟芝蓉耿淼; 关键词：生物医学工程转基因植物克隆表达

MAGE-2新CTL表位免疫识别与抗原分子设计的研究: 随着肿瘤分子免疫学与分子生物学研究的进展，治疗性肿瘤疫苗的研究成为肿瘤治疗研究的主要发展方向。以往的研究已证明细胞毒性T细胞/(Cytotoxic T lymphocyte，CTL/)介导的特异性细胞免疫是主要的抗肿瘤机...; 耿淼; 文献传递

肿瘤抗原MAGE-2 HLA-A2限制性新CTL表位的鉴定被引量：6: 2002年; 目的　寻求新的HLA A2限制性肿瘤抗原MAGE 2CTL表位。方法　经超基序与量化基序相结合预测的肿瘤抗原MA GE 2的 4个表位作为研究对象 ,标准的51 Cr实验与肽结合实验相结合进行验证。结果　预测表位肽MAGE 2 2 2 0 2 2 8,MAGE 2 2 71 2 79经体外刺激PBMC后可有效的诱导CTL效应产生 ,当效靶为 10 0∶1时溶破靶细胞效率分别为 74 4% ,68 2 %。HLA A2分子亲和力分析 ,荧光系数分别为 0 61、0 2 4阳性肽荧光系数为 0 79。结论　多肽MAGE 2 2 2 0 2 2 8、MAGE 2 2 71 2 79可作为新的HLA A2限制性CTL表位。; 耿淼吴玉章贾正才周伟; 关键词：CTL表位肿瘤抗原肿瘤免疫治疗

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耿淼