王麒
- 作品数:7 被引量:4H指数:1
- 供职机构:第二军医大学长征医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
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- ShRNA-AKT2对人脑胶质瘤U87细胞株增殖及凋亡的影响
- 2014年
- 目的研究通过慢病毒载体靶向抑制丝/苏氨酸蛋白激酶2(AKT2)基因表达对胶质瘤细胞株U87增殖、凋亡的影响。方法利用慢病毒介导的短发夹RNA(shRNA)干扰载体感染U87细胞株,逆转录酶-聚合酶链式反应(RT-PCR)和蛋白印迹技术(Western blot)分别检测转染后细胞株AKT2 mRNA和蛋白表达水平变化,四唑盐(MTT)法检测细胞增殖的影响,流式细胞术检测细胞凋亡率、细胞周期改变。结果转染AKT2-shRNA可有效降低U87细胞株内的AKT2表达。干扰组细胞从第3 d开始增殖明显降低(P<0.05);AKT2-shRNA干扰组细胞的凋亡率为11.80%±1.83%,明显高于阴性对照组的2.01%±0.20%和未转染组的2.13%±0.32%(P<0.05);AKT2-shRNA干扰组细胞周期S期细胞百分比显著低于对照组,而G0/G1期细胞比分比显著高于对照组(P<0.05)。结论 AKT2-shRNA可抑制胶质瘤细胞株的增殖,并导致肿瘤细胞凋亡增加。
- 崔勇邹勇象王麒王君玉董艳胡国汉骆纯卢亦成
- 关键词:胶质瘤增殖凋亡
- 垂体腺瘤合并垂体脓肿、垂体性甲亢1例
- 2011年
- 1病历摘要 男,24岁。反复发热、头痛1月余入院。神志清,心率110次/分。双侧视乳头水肿,颜色淡红,边界不清,生理凹陷消失。甲状腺Ⅱ度肿大。
- 崔勇潘源王麒卢亦成
- 关键词:垂体肿瘤脑脓肿甲状腺功能亢进症
- AKT2基因短发夹结构RNA慢病毒载体的构建及鉴定被引量:2
- 2011年
- 目的:构建丝/苏氨酸蛋白激酶2(AKT2)基因RNA干扰(RNAi)慢病毒载体。方法:利用公用网站按照RNAi序列设计原则,设计RNAi靶点序列并合成靶序列的Oligo DNA,退火形成双链DNA,与经MluI和ClaI进行酶切后的PLVTHM载体连接产生shRNA慢病毒载体。应用shRNA慢病毒载体转染293T细胞及U87细胞,测定病毒滴度,流式细胞仪测定U87细胞的转染效率,PCR及Western blot鉴定AKT2基因在U87细胞中的下调作用。结果:成功构建了shRNA-AKT2慢病毒载体,经测序与设计合成的靶向链完全一致。荧光显微镜下观察293T细胞感染效率大于90%,病毒滴度为3.59×107TU/ml;流式细胞仪测定对AKT2细胞的转染效率为86.93%。PCR测定shRNA载体感染U87细胞后AKT2的干扰效率为68%。Western Blot结果显示该慢病毒载体对AKT2的表达有较为显著的敲减作用。结论:成功构建了人胶质瘤细胞株AKT2基因RNAi慢病毒载体,为后续的体内外功能学试验创造了条件。
- 崔勇陈静王君玉王麒胡国汉骆纯卢亦成
- 关键词:RNA干扰慢病毒载体
- RLIP76对人胶质细胞瘤生物学行为及化疗药物敏感性的影响
- 恶性星形胶质细胞瘤(多形性胶质母细胞瘤和间变性星形细胞瘤)在成人的中枢神经系统原发肿瘤中是最常见的原发性恶性肿瘤,年发病率约0.005%。虽然相对其他系统肿瘤比较罕见,但相对于其他中枢神经肿瘤其有较高的发病率及致死率,这...
- 王麒
- 关键词:TUNELRAC1JNK泛素化
- RLIP6对人胶质细胞瘤生物学行为及化疗药物敏感性的影响
- 恶性星形胶质细胞瘤(多形性胶质母细胞瘤和间变性星形细胞瘤)在成人的中枢神经系统原发肿瘤中是最常见的原发性恶性肿瘤,年发病率约0.005%。虽然相对其他系统肿瘤比较罕见,但相对于其他中枢神经肿瘤其有较高的发病率及致死率,这...
- 王麒
- 关键词:胶质细胞瘤RNA干扰替莫唑胺化疗敏感性生物学行为
- 胶质瘤U87细胞中AKT2基因表达对化疗药物替尼泊苷敏感性的影响被引量:1
- 2013年
- 目的探讨脑胶质瘤U87细胞中AKT2基因表达对替尼泊苷(VM-26)敏感性的影响。方法体外将慢病毒介导的AKT2-shRNA表达载体转染胶质瘤U87细胞,作为实验组;转染GFP-shRNA的U87细胞作为阴性对照组,未转染的U87细胞作为空白对照组。应用RT-PCR、Western blot检测3组U87细胞中AKT2 mRNA和蛋白的表达变化。应用MTT法检测3组U87细胞对VM-26敏感性的变化。结果与阴性对照组和空白对照组比较,实验组转染后的U87细胞AKT2 mRNA和蛋白的表达水平明显下降(P<0.01)。实验组VM-26对U87细胞的半数抑制量(IC50)为(6.46±0.42)μg/ml,阴性对照组为(1.16±0.25)μg/ml,空白对照组为(1.15±0.22)μg/ml,实验组与两对照组间差异有统计学意义(P<0.05)。结论 AKT2-shRNA抑制AKT2基因表达,能增加人脑胶质瘤U87细胞株对化疗药物VM-26的敏感性。
- 崔勇林靖王麒王君玉董艳胡国汉骆纯卢亦成
- 关键词:神经胶质瘤替尼泊苷
- 慢病毒干扰载体抑制胶质瘤细胞株中CCND1表达的试验研究
- 目的制备在胶质瘤细胞系SHG-44中稳定抑制CCND1表达的重组病毒,建立CCND1表达降低的SHG-44细胞系,以便研究该基因的作用。材料与方法针对人CCND1基因序列,设计RNA干扰靶点序列并合成靶序列的寡聚核苷酸,...
- 崔勇王君玉刘震洋王麒赵玮董艳胡国汉骆纯卢亦成
- 关键词:细胞周期素D1慢病毒载体
- 文献传递