王绮如
- 作品数：82 被引量：147H指数：6
- 供职机构：中南大学湘雅医学院病理生理学系更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划湖南省科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 血清及细胞因子对人骨髓间质干细胞增殖的影响被引量：12
- 2003年
- 目的 :探讨影响体外骨髓间质干细胞增殖的因素。方法 :取胸部外科手术无血液系统疾病病人肋骨 ,采用密度梯度离心法分离单个核细胞 ,以每皿 5× 10 5个的细胞浓度接种 ,9d后 ,瑞士 吉姆萨染色 ,计数集落并进行统计分析。结果 :在 5 %～ 30 %的血清浓度范围内 ,骨髓间质干细胞集落数随血清浓度的升高而增多。bFGF ,IL 1α ,IL 3,IL 6等细胞因子可促进骨髓间质干细胞的增殖。结论 :血清浓度与细胞因子bFGF ,IL 1α ,IL 3,IL
- 雷军程腊梅谭孟群王绮如
- 关键词：骨髓间质干细胞增殖血清细胞因子
- 三类骨髓基质细胞条件培养液体外扩增巨核系细胞被引量：5
- 2005年
- 为了研究骨髓成纤维细胞、内皮细胞和巨噬细胞条件培养液对巨核细胞的体外扩增作用,本文通过分离纯化骨髓成纤维细胞、内皮细胞和巨噬细胞,收集无血清骨髓成纤维细胞条件培养液(fibroblast conditioned medium,F-CM)、骨髓内皮细胞条件培养液(endothelial cell conditioned medium,E-CM)和骨髓巨噬细胞条件培养液(macrophage conditioned medium,M- CM),分别离心、超滤,获得原液、分子量(MW)>10 kDa组分及MW<10 kDa组分。将三种无血清条件培养液及其> 10 kDa组分和<10 kDa组分,分别加入巨核细胞体外液体培养体系,观察成熟巨核细胞的生成。结果表明:F-CM和E-CM 及其>10 kDa组分加入培养体系后,成熟巨核细胞的生成显著增多,分别为对照组的(287.33±16.77)%、(141.21±17.47)%、(236.67±39.72)%和(179.03±30.98)%;F-CM的作用明显大于E-CM(P<0.001);F-CM和E-CM的<10 kDa组分、M-CM 及其>10 kDa组分和<10 kDa组分加入培养体系后成熟巨核细胞数无明显改变。分别将F-CM、E-CM、M-CM加入巨核细胞液体扩增体系,24 h后取细胞作巨核细胞集落形成单位(colony forming unit-megakaryocyte,CFU-Meg)的测定。结果表明:F-CM和E-CM对CFU-Meg生成均有促进作用,M-CM对CFU-Meg生成无明显影响,扩增强度分别为扩增前的(168.18 ±30.24)%、(215.17±17.4)%和(85.0±7.0)%。逆转录聚合酶链式反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT- PCR)实验结果表明:骨髓成纤维细胞表达促血小板生成素(thrombopoietin,TPO),不表达转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1);骨髓内皮细胞表达TGF-β1,不表达TPO。上述结果提示:F-CM、E-CM及其>10 kDa组分均对巨核系成熟细胞及巨核系祖细胞体外扩增有促进作用;F-CM对巨核系成熟细胞体外扩增的促进作用强于E-CM。
- 黄艳红王绮如
- 关键词：骨髓基质细胞条件培养液巨核细胞扩增
- 骨髓内皮细胞条件培养液促进小鼠胚胎干细胞生成造血集落形成细胞被引量：1
- 2008年
- 目的：为观察骨髓内皮细胞条件培养液（mouse bone marrow stromal cell-conditional medium,mBMEC-CM）对鼠胚胎干细胞生成造血集落形成细胞的影响。方法：将鼠胚胎干细胞系D3细胞（embry-onic stem cell line-D3，ES-D3）形成4d拟胚体（day-4 embryoid bodies，ddEBs），再用mBMEC-CM诱导4dEBs生成高增殖潜能集落形成细胞（high proliferation potential-colony-formation cell，HPP-CFC）和红系爆式集落形成单位（burst forming unit-erythroid，BFU-E）。以形成造血集落的数量为检测指标，观察mBMEC-CM诱导浓度、天数和诱导生成的细胞数与形成HPP-CFC和BFU-E数之间的关系。结果：形成的HPP-CFC和BFU-E集落数均与诱导生成的4dEBs细胞数呈正相关（HPP-CFC：r=0．916，P〈0．05；BFU-E：r=0．927，P〈0．05），且均随着种入的细胞数（在1×10^7～4×10^7／L范围内）增加而呈现相应的增加。当种入的细胞数增加到5×10^7／L时两种集落数均不再增加。mBMEC-CM诱导浓度（在0～20％范围内）与其诱导生成的HPP-CFC和BFU-E数呈剂量依赖性正相关（HPP-CFC：r=0．909，P〈0．05；BFU-E：r=0．927，P〈0．01）。20％浓度mBMEC-CM诱导4dEBs来源的细胞于3，6和9d形成的HPP-CFC和BFU-E数，以诱导3d者最高，6d次之，9d最低。结论：骨髓内皮细胞条件培养液能促进鼠胚胎干细胞分化为HPP-CFC和BFU-E。
- 赵惠萍卢光琇王绮如
- 关键词：胚胎干细胞拟胚体造血造血干细胞骨髓
- 小鼠骨髓内皮细胞系的长期传代培养和生物学特性鉴定被引量：6
- 2007年
- 小鼠骨髓内皮细胞系建立、保存和传代培养已10年之久。本研究的目的是对该内皮细胞系的生物学特性进行新的鉴定,以便利用该内皮细胞系进行进一步研究。取经传代培养的该内皮细胞系细胞,进行显微光镜和电子显微镜观察、分子标志检测、吞噬实验、生长动力学分析以及核型鉴定等。结果表明:细胞在亚汇合贴壁层中多为椭圆形、圆形或梭形,部分可呈条索状排列,在汇合层中一般为鹅卵石状。CD31、vWF抗体染色阳性细胞占94%以上,摄取DiI-Ac-LDL的细胞达98.5%。在常规培养条件下,快速增殖期的细胞群体倍增时间约为54.6小时,分裂指数最高达到38‰。集落产率介于4.33%-7.40%。核型主要为超二倍体。结论:该细胞系保持了内皮细胞的基本特征,生长动力学和一些生物学行为与建系之初稍有差异。
- 黄畅朱文彪朱海林汪保和王绮如
- 关键词：内皮细胞系传代培养生物学特性
- 小鼠骨髓内皮细胞无血清条件培养液及其超滤组分对粒巨噬系祖细胞生长的影响被引量：2
- 1999年
- 本研究通过传代培养小鼠骨髓内皮细胞系细胞,收集无血清条件培养液(mBMECCM),将其作多级串联超滤,获得分子量大于10、3～10、1～3、05～1kD和小于05kD超滤组分。进行粒巨噬系造血祖细胞集落形成试验,检测了它们的作用。mBMECCM和3～10kD组分对粒巨噬系祖细胞(CFUGM)生长未见明显影响,而分子量大于10kD和05～1kD组分促进CFUGM的增殖,分子量1～3kD和小于05kD组分则抑制CFUGM的增殖。这4种超滤组分对CFUGM生长的效应均有剂量依赖性。这些结果提示,在体外培养条件下,小鼠骨髓内皮细胞分泌若干种活性成分。
- 汪保和王绮如
- 关键词：骨髓内皮细胞
- 降钙素基因相关肽对支气管上皮细胞表达基质金属蛋白酶-9的研究
- ＜正＞支气管上皮细胞是炎症和物理刺激因子的靶细胞。气道疾病常伴有不同程度气道上皮结构完整性的破坏和功能受损,而疾病的缓解有赖于上皮完整性的修复与维持。气道上皮的修复包括细胞向损伤部位的迁移、增殖和铺展以及上皮下基膜的修复...
- 管茶香刘永平秦晓群张长青刘惠君王绮如
- 文献传递
- 骨髓内皮细胞产物对 CFU-F、CFU-GM和WEHI-3细胞生长的作用
- 2000年
- 为了研究骨髓内皮细胞的造血调控功能 ,采用串联超滤技术从小鼠骨髓内皮细胞无血清条件培养液 ( m BMEC- CM)中制备出不同相对分子质量 ( Mr)范围的超滤组分 ,进行细胞集落形成实验 ,检测了 m BMEC- CM及其超滤组分对骨髓成纤维祖细胞 ( CFU- F)、粒巨噬系造血祖细胞 ( CFU- GM)和小鼠粒单系白血病细胞系 WEHI- 3细胞生长的作用 .结果显示 :m BMEC- CM抑制 CFU- F的生长 ,对 CFU- GM和 WEHI- 3细胞的生长却未见明显影响 ;Mr>1 0 4 组分对 CFU- F的生长无明显作用 ,但促进 CFU- GM的生长和抑制 WEHI- 3细胞的生长 ;Mr<3× 1 0 3组分对这 3种细胞的集落形成均有抑制作用 .
- 汪保和王绮如
- 关键词：骨髓内皮细胞造血调控CFU-FCFU-GM
- 灵芝复方诱导HL-60白血病细胞凋亡的研究被引量：10
- 2000年
- 应用体外集落与液体培养、细胞形态学观察、DNA片段凝胶电泳及 DNA片段百分率测定等方法观察灵芝复方对人骨髓 CFU- GM生长及 HL- 6 0细胞增殖和凋亡的作用。发现灵芝复方在一定浓度范围内对人骨髓 CFU - GM生长有促进作用 ,而对白血病细胞系 HL - 6 0细胞集落生长则表现出剂量依赖性抑制 ;细胞形态学结果表明 ,灵芝复方对 HL- 6 0细胞凋亡具有剂量和时间依赖性诱导作用。 8和 16 mg/ m L 灵芝复方作用48h,可使 HL - 6 0细胞 DNA片段百分率明显升高 ;DNA片段凝胶电泳显示有明显的细胞凋亡“梯形”表现。
- 钟理蒋德昭王绮如
- 关键词：HL-60细胞白血病中医药疗法
- 人骨髓内皮细胞的分离、纯化和培养被引量：2
- 1998年
- 人骨髓内皮细胞的分离、纯化和培养汪保和王绮如骨髓内皮细胞是构成造血微环境的重要基质细胞之一，它的纯化培养对其功能的研究十分必要。近来，已有应用免疫磁珠法、荧光激活细胞分类（ＦＡＣＳ）进行人骨髓内皮细胞的分离、纯化的报道［１，２］。我们首次采用细胞培养...
- 汪保和王绮如
- 关键词：骨髓内皮细胞纯化
- 小鼠卵黄囊内皮细胞的体外培养及其细胞因子表达的检测被引量：1
- 2003年
- 目的 :分离纯化小鼠卵黄囊内皮细胞 (YS -EC) ,并检测其细胞因子的表达。方法 :显微分离小鼠卵黄囊 ,经酶消化得到卵黄囊细胞 ,卵黄囊细胞经贴壁培养、传代纯化得到小鼠YS -EC ,酵母碎片吞噬实验检测YS-EC的吞噬功能 ,免疫组化方法检测YS -ECvWF的表达 ,应用AtlascDNAExpressionArray对卵黄囊内皮细胞表达的细胞因子进行检测。结果 :经体外培养纯化的小鼠卵黄囊内皮细胞大小形态均一 ,为圆形或卵圆形贴壁细胞 ,具有克隆形成能力 ,在传代培养过程中可形成血管条索样结构 ,具有吞噬功能 ,表达vWF ,符合内皮细胞的生物学特征。小鼠卵黄囊内皮细胞中有转化生长因子 β2 (TGF - β2 )、干扰素γ(IFN -γ)、胎肝激酶配基 (FL)、骨形态发生蛋白- 4 (BMP - 4 )、巨噬细胞炎性蛋白 - 1β(MIP - 1β)、骨形态发生蛋白 - 2A (BMP - 2A)、fms样酪氨酸激酶 2 (FLT2 )、内皮素 2 (endothelin 2 )、胸腺素β10 (thymosinβ10 )、白细胞介素 6 (IL - 6 )、白细胞介素 9(IL - 9)、白细胞介素 13(IL - 13)、小分子可诱导性化学因子A5 (SCYA5 )和酰基辅酶A结合蛋白 (ACBP)等细胞因子mRNA的表达。结论 :体外培养纯化的小鼠卵黄囊内皮细胞符合内皮细胞的生物学特征 ,有TGF - β2、IFN -γ、FL、BMP - 4、MIP - 1β、BMP - 2A?
- 那晓东王绮如赵自平
- 关键词：卵黄囊细胞因子类内皮细胞
