王绮如
- 作品数:83 被引量:147H指数:6
- 供职机构:中南大学湘雅医学院病理生理学系更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家高技术研究发展计划湖南省科技计划项目更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 血清及细胞因子对人骨髓间质干细胞增殖的影响被引量:11
- 2003年
- 目的 :探讨影响体外骨髓间质干细胞增殖的因素。方法 :取胸部外科手术无血液系统疾病病人肋骨 ,采用密度梯度离心法分离单个核细胞 ,以每皿 5× 10 5个的细胞浓度接种 ,9d后 ,瑞士 吉姆萨染色 ,计数集落并进行统计分析。结果 :在 5 %~ 30 %的血清浓度范围内 ,骨髓间质干细胞集落数随血清浓度的升高而增多。bFGF ,IL 1α ,IL 3,IL 6等细胞因子可促进骨髓间质干细胞的增殖。结论 :血清浓度与细胞因子bFGF ,IL 1α ,IL 3,IL
- 雷军程腊梅谭孟群王绮如
- 关键词:骨髓间质干细胞增殖血清细胞因子
- 三类骨髓基质细胞条件培养液体外扩增巨核系细胞被引量:5
- 2005年
- 为了研究骨髓成纤维细胞、内皮细胞和巨噬细胞条件培养液对巨核细胞的体外扩增作用,本文通过分离纯化骨髓成纤维细胞、内皮细胞和巨噬细胞,收集无血清骨髓成纤维细胞条件培养液(fibroblast conditioned medium,F-CM)、骨髓内皮细胞条件培养液(endothelial cell conditioned medium,E-CM)和骨髓巨噬细胞条件培养液(macrophage conditioned medium,M- CM),分别离心、超滤,获得原液、分子量(MW)>10 kDa组分及MW<10 kDa组分。将三种无血清条件培养液及其> 10 kDa组分和<10 kDa组分,分别加入巨核细胞体外液体培养体系,观察成熟巨核细胞的生成。结果表明:F-CM和E-CM 及其>10 kDa组分加入培养体系后,成熟巨核细胞的生成显著增多,分别为对照组的(287.33±16.77)%、(141.21±17.47)%、(236.67±39.72)%和(179.03±30.98)%;F-CM的作用明显大于E-CM(P<0.001);F-CM和E-CM的<10 kDa组分、M-CM 及其>10 kDa组分和<10 kDa组分加入培养体系后成熟巨核细胞数无明显改变。分别将F-CM、E-CM、M-CM加入巨核细胞液体扩增体系,24 h后取细胞作巨核细胞集落形成单位(colony forming unit-megakaryocyte,CFU-Meg)的测定。结果表明:F-CM和E-CM对CFU-Meg生成均有促进作用,M-CM对CFU-Meg生成无明显影响,扩增强度分别为扩增前的(168.18 ±30.24)%、(215.17±17.4)%和(85.0±7.0)%。逆转录聚合酶链式反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT- PCR)实验结果表明:骨髓成纤维细胞表达促血小板生成素(thrombopoietin,TPO),不表达转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1);骨髓内皮细胞表达TGF-β1,不表达TPO。上述结果提示:F-CM、E-CM及其>10 kDa组分均对巨核系成熟细胞及巨核系祖细胞体外扩增有促进作用;F-CM对巨核系成熟细胞体外扩增的促进作用强于E-CM。
- 黄艳红王绮如
- 关键词:骨髓基质细胞条件培养液巨核细胞扩增
- 骨髓内皮细胞条件培养液诱导胚胎干细胞向造血细胞分化
- 目前,诱导胚胎干细胞(ES细胞)向造血细胞分化主要应用小鼠成纤维细胞系与ES细胞共培养的方法。本课题探讨利用骨髓内皮细胞条件培养液(mBMEC-CM)诱导小鼠E5细胞向造血细胞分化,以消除外源性细胞污染,为诱导人ES细胞...
- 赵惠萍卢光秀王绮如
- 关键词:胚胎干细胞细胞分化拟胚体
- 体外诱导小鼠胚胎干细胞生成造血干/祖细胞
- 体外诱导胚胎干细胞(Embryonic Stem Cells,ES Cells)生成造血干细胞,可用于骨髓移植和基因治疗,有极好的应用前景。本实验采用分阶段方法先诱导胚胎干细胞ES-D3细胞形成4天拟胚体(4dEBs),...
- 赵惠萍谭孟群卢光秀王绮如
- 关键词:小鼠胚胎干细胞体外诱导
- 骨髓内皮细胞条件培养液促进小鼠胚胎干细胞生成造血集落形成细胞被引量:1
- 2008年
- 目的:为观察骨髓内皮细胞条件培养液(mouse bone marrow stromal cell-conditional medium,mBMEC-CM)对鼠胚胎干细胞生成造血集落形成细胞的影响。方法:将鼠胚胎干细胞系D3细胞(embry-onic stem cell line-D3,ES-D3)形成4d拟胚体(day-4 embryoid bodies,ddEBs),再用mBMEC-CM诱导4dEBs生成高增殖潜能集落形成细胞(high proliferation potential-colony-formation cell,HPP-CFC)和红系爆式集落形成单位(burst forming unit-erythroid,BFU-E)。以形成造血集落的数量为检测指标,观察mBMEC-CM诱导浓度、天数和诱导生成的细胞数与形成HPP-CFC和BFU-E数之间的关系。结果:形成的HPP-CFC和BFU-E集落数均与诱导生成的4dEBs细胞数呈正相关(HPP-CFC:r=0.916,P〈0.05;BFU-E:r=0.927,P〈0.05),且均随着种入的细胞数(在1×10^7~4×10^7/L范围内)增加而呈现相应的增加。当种入的细胞数增加到5×10^7/L时两种集落数均不再增加。mBMEC-CM诱导浓度(在0~20%范围内)与其诱导生成的HPP-CFC和BFU-E数呈剂量依赖性正相关(HPP-CFC:r=0.909,P〈0.05;BFU-E:r=0.927,P〈0.01)。20%浓度mBMEC-CM诱导4dEBs来源的细胞于3,6和9d形成的HPP-CFC和BFU-E数,以诱导3d者最高,6d次之,9d最低。结论:骨髓内皮细胞条件培养液能促进鼠胚胎干细胞分化为HPP-CFC和BFU-E。
- 赵惠萍卢光琇王绮如
- 关键词:胚胎干细胞拟胚体造血造血干细胞骨髓
- 小鼠骨髓内皮细胞系的长期传代培养和生物学特性鉴定被引量:6
- 2007年
- 小鼠骨髓内皮细胞系建立、保存和传代培养已10年之久。本研究的目的是对该内皮细胞系的生物学特性进行新的鉴定,以便利用该内皮细胞系进行进一步研究。取经传代培养的该内皮细胞系细胞,进行显微光镜和电子显微镜观察、分子标志检测、吞噬实验、生长动力学分析以及核型鉴定等。结果表明:细胞在亚汇合贴壁层中多为椭圆形、圆形或梭形,部分可呈条索状排列,在汇合层中一般为鹅卵石状。CD31、vWF抗体染色阳性细胞占94%以上,摄取DiI-Ac-LDL的细胞达98.5%。在常规培养条件下,快速增殖期的细胞群体倍增时间约为54.6小时,分裂指数最高达到38‰。集落产率介于4.33%-7.40%。核型主要为超二倍体。结论:该细胞系保持了内皮细胞的基本特征,生长动力学和一些生物学行为与建系之初稍有差异。
- 黄畅朱文彪朱海林汪保和王绮如
- 关键词:内皮细胞系传代培养生物学特性
- 降钙素基因相关肽对支气管上皮细胞表达基质金属蛋白酶-9的研究
- 支气管上皮细胞是炎症和物理刺激因子的靶细胞。气道疾病常伴有不同程度气道上皮结构完整性的破坏和功能受损,而疾病的缓解有赖于上皮完整性的修复与维持。气道上皮的修复包括细胞向损伤部位的迁移、增殖和铺展以及上皮下基膜的修复。降钙...
- 管茶香刘永平秦晓群张长青刘惠君王绮如
- 关键词:降钙素基因相关肽支气管上皮细胞基质金属蛋白酶气道上皮
- 骨髓内皮细胞产物对 CFU-F、CFU-GM和WEHI-3细胞生长的作用
- 2000年
- 为了研究骨髓内皮细胞的造血调控功能 ,采用串联超滤技术从小鼠骨髓内皮细胞无血清条件培养液 ( m BMEC- CM)中制备出不同相对分子质量 ( Mr)范围的超滤组分 ,进行细胞集落形成实验 ,检测了 m BMEC- CM及其超滤组分对骨髓成纤维祖细胞 ( CFU- F)、粒巨噬系造血祖细胞 ( CFU- GM)和小鼠粒单系白血病细胞系 WEHI- 3细胞生长的作用 .结果显示 :m BMEC- CM抑制 CFU- F的生长 ,对 CFU- GM和 WEHI- 3细胞的生长却未见明显影响 ;Mr>1 0 4 组分对 CFU- F的生长无明显作用 ,但促进 CFU- GM的生长和抑制 WEHI- 3细胞的生长 ;Mr<3× 1 0 3组分对这 3种细胞的集落形成均有抑制作用 .
- 汪保和王绮如
- 关键词:骨髓内皮细胞造血调控CFU-FCFU-GM
- bFGF对造血基质细胞造血调节作用的影响被引量:1
- 2003年
- 谭鹤长雷军蒋德昭王绮如
- 关键词:碱性成纤维细胞生长因子造血基质细胞
- 基质细胞条件培养液中TGF-β对体外扩增巨核系细胞的影响
- 骨髓基质细胞是造血微环境的重要组成部分,分泌多种正性和负性造血因子,对造血细胞的发生、发育、成熟、凋亡产生直接或间接调节作用。本实验从骨髓中分离、纯化两种骨髓基质细胞(bone marrow-derived stroma...
- 黄艳红谭孟群王绮如
- 关键词:体外扩增巨核细胞条件培养液巨核系细胞TGF基质细胞