王婧
- 作品数:3 被引量:4H指数:2
- 供职机构:第二军医大学药学院生化药学教研室更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 商陆皂苷甲作用于子宫内膜异位症大鼠腹腔巨噬细胞蛋白质组的差异分析被引量:2
- 2010年
- 目的研究商陆皂苷甲作用于子宫内膜异位症大鼠腹腔巨噬细胞蛋白质组的差异,鉴定差异表达的蛋白质。方法采用自体移植法建立子宫内膜异位症大鼠模型。造模成功后取腹腔巨噬细胞,商陆皂苷甲作用24 h后,采用双向凝胶电泳技术分离巨噬细胞总蛋白,并获得药物组、模型组和空白对照组蛋白质组图谱,PDQuest软件分析确认三组细胞的差异蛋白质,最后运用串联飞行时间质谱(MALDI-TOF-TOF MS)鉴定差异蛋白点。结果 M2型丙酮酸激酶、磷酸酰肌醇转移蛋白和热休克蛋白8在子宫内膜异位症大鼠腹腔巨噬细胞中高表达,而磷酸甘油醛脱氢酶表达减少。商陆皂苷甲能抑制造模引起的M2型丙酮酸激酶等四种蛋白的表达变化。结论利用蛋白质组学技术,研究商陆皂苷甲作用于子宫内膜异位症大鼠腹腔巨噬细胞后蛋白表达差异,为探索子宫内膜异位症的发病机制和商陆皂苷甲的作用机制提供新的线索和依据。
- 王婧肖振宇邱磊张俊平
- 关键词:商陆皂苷甲子宫内膜异位症巨噬细胞双向电泳
- 核糖体蛋白S3a RNA干扰重组慢病毒载体的构建及其对细胞凋亡的影响
- 2015年
- 目的 构建小鼠核糖体蛋白S3a(RPS3a)特异性RNA干扰重组慢病毒载体(Lenti-shmRPS3a),分析其对细胞凋亡的影响。方法 设计针对小鼠RPS3amRNA的4条干扰序列,合成相应的发夹序列,连接入慢病毒载体系统pLLU2GeGFP中构建重组质粒,将重组质粒与辅助包装质粒共转染293T细胞组装病毒,检测病毒滴度。病毒感染RAW264.7细胞后,RT-PCR和蛋白质印迹法检测干扰效果,流式细胞术分析其对凋亡的影响。结果 PCR和测序证明成功构建出LentishmRPS3a慢病毒载体,病毒滴度为(6~9)×107 TU/mL;RT-PCR表明Lenti-shmRPS3a的沉默效率高达72.64%,蛋白质印迹法证明RPS3a蛋白表达水平降低;流式细胞术证明感染了Lenti-shmRPS3a的细胞凋亡率较对照组升高(P〈0.05)。结论 表达小鼠RPS3ashRNA的慢病毒载体能有效沉默RPS3a基因表达,促进细胞凋亡。
- 李英华王婧邱磊厉建中胡振林张俊平
- 关键词:RNA干扰慢病毒属细胞凋亡
- 依托泊苷通过蛋白酶体通路诱导白血病细胞凋亡被引量:2
- 2010年
- 目的研究拓扑异构酶Ⅱ抑制剂依托泊苷诱导白血病细胞HL-60凋亡的分子机制。方法细胞增殖和凋亡采用四唑氮盐(MTT)法和流式细胞仪测定,基因芯片技术检测依托泊苷作用于HL-60细胞2 h后基因表达谱的变化。应用Gen-MAPP分析软件分析细胞内反应通路。结果依托泊苷半数抑制浓度(IC50)为(30.17±0.26)μmol/L。依托泊苷促进HL-60细胞凋亡,凋亡百分率由对照组4.38%增加到药物处理组的53.96%,能显著抑制细胞内蛋白酶体降解通路(Z≥3.8),抑制蛋白酶体通路中的PSMB5、PSMB7、PSMB8、PSMC3、PSMC5、RPN1和HLA-A表达。结论依托泊苷抑制DNA拓扑异构酶II可通过抑制细胞内蛋白酶体相关基因表达导致细胞凋亡。
- 叶齐王婧郭学青陈崇宏张俊平
- 关键词:依托泊苷白血病细胞蛋白酶体基因芯片