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高产氨基葡萄糖基因工程菌的研究进展被引量：6: 2014年; 氨基葡萄糖(GlcN)又称氨基葡糖或葡糖胺,是葡萄糖的一个羟基被氨基取代后的化合物,在医药和保健领域具有广泛应用。氨基葡萄糖的传统生产方法主要采取酸解几丁质法,受原料限制产量低,污染比较严重,构建高效产氨基葡萄糖的基因工程菌可以避免这些问题。介绍了氨基葡萄糖的代谢途径,以及最近几年国内外产氨基葡萄糖基因工程菌的构建和氨基葡萄糖的发酵培养,对氨基葡萄糖和乙酰氨基葡萄糖的发酵生产有重大的指导意义。; 刘佃磊李丕武李瑞瑞王升王瑞明; 关键词：氨基葡萄糖基因工程菌发酵

含环氧基固定化葡萄糖氧化酶共聚载体的催化性能研究: 2013年; 环氧基团可以在温和条件下与酶分子的氨基发生共价结合使其固定于载体表面。选用含有活性环氧基团的甲基丙烯酸缩水甘油酯(GMA)为单体,N,N′-亚甲基双丙烯酰胺(MBAA)为交联剂,聚乙烯吡咯烷酮(PVP)为稳定剂,2,2′-偶氮二异丁腈(AIBN)为引发剂,乙醇水溶液为分散介质,并加入Fe3O4磁流体,通过反相悬浮聚合成功合成了大孔Ferrofluid-GMA-MBAA共聚物载体(FGM)。通过调节磁流体和交联剂用量,可调节载体比表面积,孔径以及溶胀性能。将葡萄糖氧化酶(GOD)偶联于GMA含量20%,磁流体含量4%,交联剂含量40%的共聚物载体4FGM(40),制成固定化葡萄糖氧化酶,其表观酶活高达546.23±2.33 U/g。讨论了固定化葡萄糖氧化酶的酶学性质,在最适条件(55℃,pH 8.0)下,固定化酶的表观酶活回收率为90.45%;连续使用15次活性仍接近初始值的60%;固定化酶在4℃保存30 d,活性保持不变。; 李丕武李瑞瑞刘佃磊郝琼杨晴王升; 关键词：环氧基反相悬浮聚合固定化酶葡萄糖氧化酶

利用发酵法生产氨基葡萄糖的研究进展被引量：10: 2014年; 氨基葡萄糖(GlcN)是一种重要的氨基己糖。它由葡萄糖的一个羟基被氨基取代形成,能够有效作用于软骨组织治疗风湿性关节炎,并被视为天然无害的食品及保健品配料,市场应用前景广阔。目前,生产GlcN的方法主要有酸水解法、酶解法及微生物发酵法。由于酸水解法及酶解法生产GlcN会对环境造成不利影响及生产效率低等原因,微生物发酵法生产GlcN得到了越来越多研究者的关注。对微生物代谢产GlcN的合成途径、霉菌发酵产GlcN及工程菌发酵产GlcN等方面进行了概述,并对微生物发酵法生产GlcN的研究方向进行了展望。; 王升李丕武刘佃磊李以明林晶晶; 关键词：氨基葡萄糖微生物发酵

氨基葡萄糖合酶基因工程菌的构建及重组酶酶学性质的研究: 氨基葡萄糖（GlcN）是一些复合寡糖与多聚糖的结构单体。尤其在动物与人类的骨关节中大量存在GlcN，其能够修复受损伤的关节，从而维护骨关节的健康。氨基葡萄糖合酶在氨基己糖生物合成途径中具有关键作用。GlcN生物合成途径从...; 王升; 关键词：酿酒酵母酶学性质

用蒸馏水法保藏产葡萄糖氧化酶毕赤酵母的研究: 2015年; 以斜面保藏法为对照,考察了蒸馏水保藏法对产葡萄糖氧化酶毕赤酵母基因工程菌产酶和菌体存活率的影响。采用蒸馏水法和斜面法保藏菌种Pichia pastoris P51 180d后:菌体存活率分别为90%和45%,蒸馏水法保藏效果远高于斜面保藏法;摇瓶发酵实验最终产酶活力分别是(22.5±0.5)U/m L和(23±0.4)U/m L,蒸馏水法对毕赤酵母基因工程菌产酶没有影响。另外蒸馏水法保藏毕赤酵母可在室温下进行、操作简便,与斜面保藏法相比具有一定的优势。; 杨晴李丕武王升; 关键词：毕赤酵母

响应面法优化大肠杆菌产海藻糖合酶发酵培养基被引量：5: 2015年; 以海藻糖合酶基因工程菌E.coli BL21(p ET15b-Tre S)为研究对象,以海藻糖合酶的酶活为考察指标,对海藻糖合酶基因工程菌E.coli BL21(p ET15b-Tre S)的培养基进行优化。首先运用单因素实验对大肠杆菌(E.Coli)产海藻糖合酶进行了优化,利用Plackett-Burman进行两因素两水平设计对影响其产酶因素进行评估并筛选出具显著效应的3种因素:葡萄糖、酵母浸粉和K2HPO4。用最陡爬坡实验逼近以上三种因素的最大响应面区域后,采用Box-Behnken进行三因素三水平的设计以及响应面分析,获得最佳产海藻糖合酶的培养基。结果表明,发酵大肠杆菌的最佳培养基配方为:葡萄糖7.2g/L,酵母浸粉6.6g/L,蛋白胨10g/L,(NH4)2SO45g/L,K2HPO415.7g/L,KH2PO44g/L,Mg SO4·7H2O1.6g/L,微量元素混合液0.5m L/L。在此条件下进行产酶重复实验5次,海藻糖合酶酶活为65U/mg,比优化前提高了91.2%。; 刘红娟王腾飞汤丹丹王升戴琨王瑞明; 关键词：大肠杆菌海藻糖合酶 PLACKETT-BURMAN设计响应面法

微生物与酶技术在新型功能糖开发中的应用被引量：2: 2014年; 近十几年来,新型功能糖产业得到了快速发展,不仅生产规模有了大幅增加,而且越来越多具有特殊营养与保健功效的新型功能糖被开发出来。目前,微生物与酶技术的突破是开发新型功能糖的关键,尤其是分子生物学手段的使用,大大加快了新产品的开发速度,改善了功能糖产品的应用性能,引领行业技术发展的趋势。本文介绍微生物酶与技术在氨基葡萄糖、海藻糖、L-阿拉伯糖、低聚半乳糖及异麦芽酮糖等新型功能糖开发中的应用状况。; 李丕武王升梁荣荣吴祥坤; 关键词：L-阿拉伯糖低聚半乳糖异麦芽酮糖

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王升