王保莉
- 作品数:81 被引量:687H指数:16
- 供职机构:西北农林科技大学生命科学学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金黄土高原土壤侵蚀与旱地农业国家重点实验室开放基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:农业科学生物学环境科学与工程文化科学更多>>
- 淹水时间对水稻土中地杆菌科群落结构及丰度的影响被引量:7
- 2011年
- 【目的】通过模拟水稻土淹水过程,探讨地杆菌科(Geobacteraceae)群落结构和相对丰度随淹水时间的动态变化特征,揭示其群落结构和相对丰度变化与微生物Fe(Ⅲ)还原的内在联系。【方法】提取水稻土淹水培养1 h、1 d、5 d、10 d、20 d和30 d后的微生物总DNA,构建地杆菌科16S rDNA克隆文库,采用PCR-RFLP方法分析地杆菌科的群落结构和多样性变化特征,通过Real-time PCR技术测定地杆菌科相对丰度的动态变化。采用厌氧泥浆培养方法,测定水稻土中Fe(Ⅱ)产生量变化。【结果】供试水稻土中,微生物Fe(Ⅲ)还原过程在淹水培养初期变化明显,培养20 d后达到稳定期,最大铁还原潜势为10.16 mg/g,最大反应速率为1.064 mg/(g.d),最大反应速率对应的时间为4.84 d。α多样性指数显示,水稻土中地杆菌科的多样性随淹水时间延长呈现波动性变化,淹水5 d和20 d处理出现2个峰值,而淹水10 d和30 d处理的多样性明显减小。β多样性指数表明淹水过程中群落结构存在明显差异。不同淹水时间共产生了10种地杆菌科优势类型,分别属于Clade 1和Clade 2。Real-time PCR结果表明,地杆菌科与总细菌16S rDNA丰度的比值在淹水培养1 d时最小(1.20%),而20 d时达到最大值(4.54%)。【结论】淹水培养的水稻土中,地杆菌科微生物的多样性和相对丰度的动态变化与微生物Fe(Ⅲ)还原过程密切相关。
- 由焦化夏淑红王保莉曲东
- 关键词:水稻土群落结构丰度RFLP
- 长期施用氮肥和磷肥对渭北旱塬土壤中氨氧化古菌多样性的影响被引量:8
- 2012年
- 采用基于氨单加氧酶基因的PCR-RFLP和DNA测序技术,以黄土高原旱地黑垆土为材料,研究长期施用氮肥和磷肥对土壤氨氧化古菌多样性的影响。结果显示,不同施肥处理土壤样品得到的氨氧化古菌的OTU数分别为25(种植不施肥,CK)、21(不施肥不种植,LD)、18(单施氮肥,N)、25(单施磷肥,P)和13(氮、磷共施,NP)。氨氧化古菌的多样性指数H′和优势度指数Ds变化趋势基本相同,分别为P>CK>LD>NP>N和P>CK>NP>LD>N;种群丰富度和均匀度指数在不同处理间变化较大,分别为CK>P>LD>N>NP和P>NP>LD>N>CK。各处理优势氨氧化古菌绝大部分属于Cluster S,少数属于Cluster M,获得的序列全部属于难培养泉古菌门。不同施肥方式的长期定位试验土壤中氨氧化古菌多样性变化较大,而优势氨氧化古菌系统进化定位没有显著变化。
- 武传东闫倩辛亮王保莉曲东
- 关键词:氨氧化古菌长期施肥群落结构
- 铁还原菌株P4的碳源利用特征及其系统发育学分析被引量:16
- 2008年
- 【目的】从水稻土中分离铁还原微生物,研究不同碳源对其铁还原特征的影响,对分离的铁还原微生物进行系统发育学分析。【方法】对采自四川的水稻土进行厌氧恢复培养,通过PTYG选择性夹层培养基分离纯化及LB液体培养基扩繁后,接种到Fe(OH)3培养基中进行铁还原能力鉴定,筛选出具有铁还原功能的铁还原菌株。通过对6种碳源利用的纯培养比较,确定分离菌株利用不同碳源时的铁还原特征。采用通用引物进行PCR扩增,对PCR产物进行16S rDNA序列分析,建立系统发育进化树。【结果】分离得到1株具有铁还原功能的革兰氏阳性杆状厌氧菌株P4,其在培养的10-30 h达到对数生长期。菌株P4利用不同碳源时,铁还原的最大反应速率(Vmax)大小顺序为:葡萄糖〉丙酮酸盐〉乳酸盐〉琥珀酸盐〉丙酸盐〉乙酸盐。菌株P4利用葡萄糖和丙酮酸盐的Fe(Ⅲ)还原率分别为63.79%和22.19%,而其他几种碳源的铁还原率均在10%以下。采用PCR技术获得了1 325 bp的铁还原菌株P4的部分16S rDNA序列。菌株P4与多种不可培养的厌氧菌株及丁酸梭状芽孢杆菌具有98%的同源性。【结论】从四川水稻土中分离得到了G^+、杆状、圆末端的铁还原菌P4,其在培养10-30 h能够达到对数生长期。葡萄糖和丙酮酸盐可作为菌株P4的优势碳源。菌株P4可归属为厌氧丁酸梭状芽胞杆菌。
- 关舒元朱超王保莉曲东王伟民孙丽蓉
- 关键词:铁还原菌碳源利用系统发育分析
- 玉米硫素营养状况及应用研究进展被引量:10
- 2008年
- 随着全球气候的变暖和土壤缺硫现象的加剧,进一步加强玉米硫素营养的研究十分必要。综述了玉米硫素营养状况以及硫对玉米产量及品质的影响、硫素在玉米生理代谢中的作用、硫与玉米的抗逆性等方面的研究进展,提出了下一步的研究重点和方向。
- 李惠民王保莉
- 关键词:玉米硫素生理代谢抗逆性
- 环境因素对小麦苗期SOD、MDA及可溶性蛋白的影响被引量:51
- 2000年
- 采用盆栽试验 ,模拟干旱胁迫、铜污染 (三级农田 )及不同施肥状况 ,测定了小麦苗期的生物量及叶片中的 SOD活性、MDA和可溶性蛋白含量。结果表明 ,水分、铜污染和施肥三因素对小麦苗期的生物量都有显著影响 ,表现为水分 >施肥 >铜污染 ;水分对 MDA含量的影响大于铜污染和施肥 ,表现为干旱可显著增大叶片 MDA含量 ,并使 MDA/SOD值增大 ;对 SOD和可溶性蛋白 ,水分和铜污染的影响大于施肥的影响 ,表现为干旱胁迫下 ,SOD活性升高 ,可溶性蛋白含量降低 ,而铜污染处理使可溶性蛋白含量升高 ;
- 王保莉杨春曲东
- 关键词:水分胁迫铜污染生理生化指标苗期
- 气相色谱法测定土壤单糖组成被引量:1
- 1993年
- 利用气相色谱法测定了陕西省4种土壤中中性糖的组成。单糖测定采用糖醇乙酸酯衍生化方法,色谱固定相选用3%OV-225/Chromosorb。对100μg/mL的糖标准混合液分析的标准差(SD)在±1.748~±4.200之间。土样经过溴仿-乙醇重液(d=2.00)处理,去除了未分解和半分解状态的植物残体。通过H_2SO_4水解,分别测定了鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、半乳糖和葡萄糖的含量。土壤水解液中添加葡萄糖标准液后的回收率在98.6%~104%之间。对硼酸盐和铁的干扰也作了讨论。
- 曲东王保莉尉庆丰邓妙
- 关键词:气相色谱法单糖组成土壤
- 人基质金属蛋白酶2(MMP-2)类血红素结构域克隆及原核表达被引量:2
- 2007年
- 提取人神经胶质瘤U87细胞总RNA,通过RT-PCR克隆到人基质金属蛋白酶2(MMP-2)类血红素结构域pex的cDNA序列-PEX,连接pMD18-T载体和PEX,测序分析,构建原核表达载体PET42a-PEX,转化大肠杆菌BL21(DE3),异丙基--βD-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导后显示目的蛋白有37%的表达量,为进一步研究其抗肿瘤血管生成鉴定基础。
- 李彦杰杨俊年王保莉郭蔼光
- 关键词:基质金属蛋白酶PEX抗血管生成
- 钾钠电极互参电位法同时测定土壤浸提液中钾和钠
- 1992年
- 以钾钠电极互为参比,采用一次标准加入法可以分别求出钾钠离子的浓度。电极的测定斜率为:钾53.9mV,钠52.7mV。标准混合物的测定误差分别为:钾-0.23%~+2.4%,钠-1.5%~+4.7%。实验中采用0.5mol/L BaCl_2溶液作为浸提剂及离子强度调节剂,电位法同时测定了5种不同盐化程度的(土娄)土、潮土及水稻土中钾钠的含量。回收率为:钾98.7%~102%,钠98.6%~102%.以火焰光度法作为对照,其结果与电极法完全一致。
- 王保莉曲东田华
- 关键词:钾钠土壤浸提液电极法
- β-琼脂糖酶ⅠDagA大肠杆菌表达系统的筛选被引量:1
- 2008年
- 通过PCR技术扩增出了873 bp的dagA及813bp的去除信号肽的dagA(▽)编码序列,dagA与NCBI公布的Pseudoalteromonas atlanticaβ-琼脂糖酶ⅠdagA序列一致性达到99.8%,dagA(▽)一致性达到100%。构建pET21a-dagA和pET21a-dagA(▽)表达载体,分别转化BL21(DE3)、Origami B(DE3)、ER2566宿主菌,共表达分子伴侣DsbC和FkpA。采用SDS-PAGE分析了构建的多个大肠杆菌表达系统中β-琼脂糖酶ⅠDagA的表达量及表达方式,获得了重组DagA高分泌性表达菌株ER2566-pET21a-dagA(▽)-FkpA。
- 周雁胜王保莉曲东
- 关键词:信号肽分子伴侣分泌表达
- 基因工程综合型实验教学体系的建立被引量:1
- 2017年
- 针对传统实验教学方法的弊端,对基因工程实验课程进行了系统改革,通过设计综合型大实验体系,引入多媒体、讨论式和总结式教学方法,充分调动了学生主动学习的积极性,提高了学生的综合实验技能,同时将科研实践融入实验教学中,通过几年的教学实践,受到各届学生和国内同行的一致好评。
- 刘华伟郭泽坤王保莉刘香利张大鹏
- 关键词:基因工程多媒体辅助传统实验教学