汪俊华
- 作品数：3 被引量：1H指数：1
- 供职机构：中国医学科学院中国协和医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家攀登计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 人GRY-RBP基因的表达及其RNA结合活性的初步鉴定
- 1999年
- ＲＲＭ ＲＮＡ 结合蛋白在基因的转录后调控中起着重要作用．人ＧＲＹ－ＲＢＰ 是我们实验室最近克隆的一个新的全长ｃＤＮＡ，编码一个ＲＲＭ ＲＮＡ 结合蛋白．ＧＲＹ－ＲＢＰ 的全编码区用ＰＣＲ扩增后，克隆到ｐＥＴ３０ａ＋ 表达载体中，在Ｅ．ｃｏｌｉ中获得了高效表达，表达的ＧＲＹ－ＲＢＰ重组蛋白占细菌总蛋白的２１％ ．利用融合在ＧＲＹ－ＲＢＰＮ 端的Ｈｉｓ．Ｔａｇ，采取亲和层析的方法纯化了表达的重组蛋白．为了检测ＧＲＹ－ＲＢＰ的ＲＮＡ 结合活性及其所结合的ＲＮＡ 性质，将表达的蛋白与ｐｏｌｙ（Ａ）－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ４Ｂ结合，发现ＧＲＹ－ＲＢＰ能与ｐｏｌｙＡ （Ａ）结合，结合活性能被可溶性的ｐｏｌｙ（Ａ）、ｐｏｌｙ（Ｃ）减弱．改变ＮａＣｌ浓度和加入不同浓度的酵母ｔＲＮＡ竞争物后，ｐｏｌｙ（Ａ）结合活性不变．
- 杜光伟陈建和周严汪俊华黄晓玮袁建刚强伯勤
- 关键词：RNA结合蛋白转录后调控
- MBLL cDNA的克隆及组织表达分析被引量：1
- 1999年
- 果蝇的mbl(muscleblind)基因编码一个核蛋白 ,含有 2个Cys3 His锌指基序 .mbl基因的突变将影响果蝇所有光感受器细胞的分化 .根据与mbl基因高度同源的人ESTAA0 86 1 39设计PCR引物 ,筛选胎儿脑cDNA点阵文库 ,得到一个人cDNA ,命名为MBLL(muscleblind_like) .MBLL长为 2 5 95bp ,含有一个完整的开放阅读框 ,编码 2 5 5个氨基酸 ,具有 4个Cys3 His锌指基序 ,氨基酸序列与果蝇mbl有很高的同源性 (GenBank接受号 :AF0 6 1 2 6 1 ) .利用Northern和RNA斑点杂交检测MBLL基因在 43种成人组织 ,7种胎儿组织中的表达 ,结果显示MBLL是一个广泛表达的基因 。
- 杜光伟周严陈建和汪俊华阴彬袁建刚强伯勤
- 关键词：CDNA克隆基因编码
- PHF2全长cDNA及剪接异构体的克隆鉴定
- 1999年
- PHD锌指结构蛋白作为HOX基因的上游调控因子 ,在生物体的发育过程中起着重要作用 .涉及该蛋白的异常还与人类的某些恶性疾病如白血病相关 .利用基因数据库同源性比较、PCR扩增、cDNA文库筛选cDNA及部分基因组DNA序列分析、多组织Northern印迹杂交等方法 ,克隆鉴定了一种新的人类编码PHD蛋白的全长cDNA(PHF2GenBankAcc :AF 0 5 2 2 0 5 )
- 汪俊华杜光伟周严阴彬胡松年袁建刚强伯勤
- 关键词：可变剪接异构体克隆CDNA
