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汤必奎: 作品数：24 被引量：60H指数：5; 供职机构：蚌埠医学院生物科学系更多>>; 发文基金：安徽省高校省级自然科学研究项目安徽省高等学校优秀青年人才基金安徽省自然科学基金更多>>; 相关领域：医药卫生文化科学生物学更多>>

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5-氮杂-2’-脱氧胞苷对肝癌DNA甲基转移酶1及上皮钙黏附素表达的影响: 2010年; 目的：研究5-氮杂-2＇脱氧胞苷（5～Aza—CdR）对肝癌细胞中DNA甲基转移酶1（DNMT1）及上皮钙黏附素（E-cadherin）表达的影响。方法：免疫组织化学检测上皮钙黏附素在肝癌（26例）及癌旁组织（20例）中的表达。用终浓度10μmol／L的5-Aza-CdR处理培养的肝癌细胞株GQY-7703作为实验组，未处理细胞为对照组；DNMT1基因和上皮钙黏附素基因（CDH1）的转录产物及表达蛋白分别使用半定量RT-PCR和免疫印迹法检测；CDH1的甲基化状态使用甲基化特异性PCR（MSP）检测。结果：相比较癌旁组织，肝癌组织中上皮钙黏附素表达显著下调。5-Aza-CdR降低了GQY-7703细胞中DNMT1在转录水平和翻译水平的表达；CDH1CpG岛的甲基化水平降低；上皮钙黏附素mRNA和蛋白表达量明显增高，对电泳条带的半定量分析显示实验组和对照组之间的差异具有统计学意义。结论：5-Aza-CdR通过抑制DNMT1的表达，改变了CDH1基因的异常甲基化状态，进而恢复上皮钙黏附素的表达。; 吴守伟汤必奎黄银久胡明洁赵莉; 关键词：肝癌细胞 DNA甲基转移酶1 上皮钙黏附素

组蛋白乙酰化修饰调控流感病毒复制中间体dsRNA引起的IL-6激活表达被引量：1: 2013年; 目的研究组蛋白乙酰化修饰在流感病毒复制中间体dsRNA引起IL-6表达中的调控作用。方法以病毒复制中间体dsRNA为诱导物,利用组蛋白去乙酰化酶(HDAC)抑制剂、DNA甲基转移酶(DNMT)抑制剂或HDAC siRNA分别处理A549细胞,双荧光素酶报告系统分析IL-6启动子活性、RT-PCR检测mRNA转录水平以及ELISA检测蛋白表达。结果 dsRNA可激活IL-6启动子活性、增强mRNA转录水平和蛋白的分泌表达,用HDAC抑制剂TSA处理或HADC siRNA干扰均可显著增强IL-6启动子活性和mRNA转录,同时,HDAC抑制剂TSA和DNA甲基转移酶抑制剂DAC在调控IL-6表达过程中无协同作用。结论在流感病毒复制中间体dsRNA引起IL-6表达上调过程中受到组蛋白乙酰化修饰调控。; 汤必奎吴守伟胡明洁刘小粉; 关键词：组蛋白乙酰化白细胞介素-6 DSRNA

人iNOS基因启动子克隆鉴定及功能分析: 2013年; 目的克隆鉴定人iNOS基因启动子序列,并进行功能分析。方法利用生物信息学方法寻找iNOS潜在启动子区域,PCR克隆至报告载体pGL3-basic,双荧光素酶法检测启动子活性。结果克隆得到人iNOS基因转录起始点上游1000bp区域,经检测具有启动子活性,可开启报告基因表达。结论克隆构建人iNOS基因启动子成功,可用于后继研究。; 汤必奎翟素莲程禹胡明洁吴守伟; 关键词：INOS 启动子克隆功能分析

基于互联网思维的医学遗传学教学改革探索被引量：7: 2016年; 结合日益发展的互联网思维和大数据特征,从用户思维、简约思维、社会化思维、平台思维、跨界思维等多个方面探索在医学遗传学教学中的可行性和实践效果,并对存在的困难进行了分析探讨,以期达到适应时代发展、提升学生学习兴趣、提高专业教育质量的目的。; 汤必奎胡明洁张静黄银久王媛媛吴守伟陈昌杰; 关键词：医学遗传学教学改革

基于社会需求的医学院校生物技术专业人才培养方案的实践与体会——以蚌埠医学院为例被引量：3: 2019年; 生物技术专业是一门涉及到民众生活各个领域的专业,主要应用于医药、食品、生物能源与生物催化等领域,现已经成为本世纪初增长最快的高新技术产业之一.为拓宽办学途径,近年本系新开设了生物技术专业,旨在培养具有医学背景与生物学技术的'理医融合'交叉人才.至今,首届生物技术专业本科生即将毕业,在经历一轮实践之后,系部将要在原培养方案基础上进行适当修订.本文将对已有课程设置与人才培养模式、实践教学环节、教学科研平台建设、教学质量监控体系、本科生导师制、师资队伍建设等具体做法进行总结,并发现问题,且提出具有可行性的完善建议.; 付应霄刘长青汤必奎廖亚平黄银久梁猛吴守伟韩力陈昌杰

人IFN-γ基因启动子的克隆鉴定及功能分析: 2014年; 目的克隆鉴定人IFN-γ基因启动子序列,并进行功能分析。方法通过生物信息学方法预测启动子区域,PCR克隆至pGL3报告载体,双荧光素酶法检测启动子活性。结果克隆得到人IFN-γ基因翻译起始点上游700 bp启动子区域,经检测具有活性,可启动报告基因表达;同时,该区域DNA被甲基化修饰后启动活性下降达4倍。结论克隆构建人IFN-γ基因启动子成功。; 汤必奎程禹翟素莲刘小粉胡明洁吴守伟; 关键词：克隆甲基化

开设《探索性实验》课程探索医学院校生物科学专业创新型人才培养模式被引量：1: 2016年; 蚌埠医学院生物科学专业自设立以来教学改革成效显著,其改革的亮点之一是把《探索性实验》作为一门专业必修课程,让学生经历一次科研创新全过程的实践,从而培养学生创新精神和创新能力。本文就此课程的开设和具体实践汇报如下。; 吴华彰胡明洁汤必奎唐宝定吴守伟; 关键词：教学改革

转录因子AP-4基因真核表达载体构建及表达分析: 2019年; 本研究利用生物信息学分析AP-4与胃癌患者临床病理信息的相关性,根据GenBank中人AP-4基因cDNA序列设计并合成特异性引物,以胃癌细胞总RNA逆转录的cDNA为模板,利用高保真酶扩增AP-4基因CDS (Coding DNA sequence)序列并构建入pcDNA3.1+载体,并通过限制性内切酶酶切分析和测序法进行进一步验证;脂质体法将AP-4重组表达载体及对照pcDNA3.1+载体转染胃癌细胞,qRT-PCR(Quantitative real time polymerase chain reaction)和Western blotting检测分别检测AP-4在m RNA和蛋白水平的表达。生物信息学分析发现,AP-4的表达与胃癌分期及预后显著相关;酶切及测序分析表明,转录因子AP-4真核表达载体构建成功,并能够在胃癌细胞中实现转录和蛋白水平的高效表达。此研究为深入研究转录因子AP-4在胃癌等肿瘤发生发展中的作用及分子机制奠定了基础。; 吴华彰公丕海吴涛赵云利汤必奎陈文静刘牧林樊红; 关键词：转录因子真核表达

精准医疗思维在医学遗传学教学中的实践探索被引量：7: 2017年; 精准医疗的到来对医学教育提出了更高的要求,如何提高学生精准医疗思维成为一个新的挑战。医学遗传学是与精准医疗理念联系最为密切的学科之一,本研究意图将精准医疗的思维应用于医学遗传学的教学实践中,从教学内容的更新、案例设计、科研实践等多方面进行改革,引导学生树立精准医疗的理念,旨在摸索出融入精准医疗理念的新的医学遗传学教学模式,培养更加适应新时期医学发展需求的新型精准医疗人才。; 汤必奎胡明洁黄银久张静吴华彰王媛媛吴守伟陈昌杰; 关键词：医学遗传学教学实践

“慕课”应用于医学细胞生物学教学改革探讨被引量：19: 2015年; "慕课"注重教育资源的交互性、开放性,显现出它的潜力和优势。将"慕课"应用于医学院校细胞生物学教学改革,与采用传统讲授法的班级进行对比性研究,探讨能提高学生的学习主动性、积极性,同时能促进教师提高教学技巧的教学方法。; 李中文吴涛汤必奎; 关键词：医学细胞生物学教学改革

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