公共文化服务平台

毛春生: 作品数：34 被引量：77H指数：5; 供职机构：军事医学科学院微生物流行病研究所更多>>; 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金国家杰出青年科学基金更多>>; 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>

合作作者

丙型肝炎病毒准种在NS2区的变异状况初探被引量：1: 2001年; 探讨HCV准种在NS2区的基因结构特征及变异状况。利用逆转录巢式PCR从 1份HCV慢性携带者的阳性血清及 1份丙肝患者的血清中获得HCVNS2全长cDNA ,将其克隆于T载体 ,各随机挑取 5个阳性克隆进行序列测定。结果显示克隆到HCVNS2全长基因 ,所测克隆在核苷酸水平和氨基酸水平互不相同。该慢性携带者HCVNS2区序列以完整读码框架 (ORF)为主 ,一个于HCV多聚蛋白第 835位氨基酸的位置出现终止信号 ,而该丙型肝炎患者以NS2N端发现终止信号的序列为主 ,其中三个于第 835位氨基酸的位置出现终止信号 ,一个于第 887位氨基酸的位置出现终止信号 ,仅一个克隆的序列为完整ORF。对ORF完整的序列进行比较 ,发现丙型肝炎患者氨基酸变异主要集中于N端 ,蛋白二级结构模拟显示丙肝患者NS2与慢性携带者的优势二级结构类似。研究表明从我们选择的两例感染者的HCVNS2序列看 ,不同临床类型的HCV病人体内的HCV准种在NS2区存在差异 ,这种差异可能与病毒存在于机体的状态有一定的一致性。; 冷彦陈秀珠杜勇毛春生杜桂鑫王海涛; 关键词：丙型肝炎病毒准种

人源抗HAV噬菌体抗体的筛选及基因序列分析被引量：3: 1999年; 目的获得人源性甲型肝炎病毒（ＨＡＶ）抗体。方法应用抗体捕获的ＨＡＶ，从本实验室构建的噬菌体抗体组合文库中筛选与ＨＡＶ病毒有结台活性的人源噬菌体抗体（Ｆａｂ段），用夹心ＥＬＩＳＡ和竞争抑制实验测定其活性及特异性。结果筛选出与ＨＡＶ病毒有结台活性和特异性的人源抗体。序列分析表明重链基因为ＩｇＧＩ亚类，可变区属ＶＨＩ亚群，是ＤＰ８８、Ｄ３—３和ＪＨＳ胚系基因片段的重排产物；轻链基因属ＶＸｌｌｌ亚群，是ＤＰＸ２２和Ｊｋ４胚系基因的重排产物。结论应用抗体捕获抗原的方法，能从该抗体库筛选出ＨＡＶ抗体，也说明该抗体库的构建是成功的。; 于长明杜桂鑫毛春生宋宏彬徐志凯王海涛; 关键词：甲型肝炎病毒抗体噬菌体 HAV

HIV-1结构蛋白在重组痘苗病毒中的高效表达研究: 1997年; HIV-1粒子中含有3类结构蛋白,即核心蛋白(Gag)、聚合酶(pol)和外膜蛋白(Env)。Gag蛋白既具有诱导体液免疫和细胞免疫的抗原决定簇。; 金宁一毛春生王秀清王秀清田梅郭志儒李钟洙王宏伟李体远; 关键词：重组痘苗病毒 HIV-1 结构蛋白 GAG基因抗原决定簇 GAG蛋白

狂犬病病毒糖蛋白基因在原核细胞中的表达被引量：5: 1996年; 将狂犬病病毒糖蛋白（ＲＶｇｐ）基因ＢｇｌⅡ片段（１６７５ｂｐ）分别正向插入到原核高效表达载体ｐＥＴ－１７ｂ和ｐＥＴ－１７ｂ２（用ＳａｃⅠ－ＮｄｅⅠ缺失掉ｐＥＴ－１７ｂ６０ｂｐ含起始密码子ＡＴＧ小片段）的ＢａｍＨⅠ切点，构建重组质粒ｐＥＴ－１７ｂＲＶｇｐ和ｐＥＴ－１７ｂ２ＲＶｇｐ。将其分别转化表达受体菌Ｅ．ｃｏｌｉＢＬ２１（ＤＥ３）和Ｅ，ｃｏｌｉＢＬ２１（ＤＥ３）ｐｌｙｓＳ．ＩＰＴＧ诱导表达，菌体经超声波裂解处理后ＳＤＳ－ｐＡＧＥ，染色，在分子量约６００００处可见重组质粒表达的较宽的蛋白带，以抗ＲＶｇｐＭｃＡｂ进行Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔ检测，表明该表达蛋白为ＲＶｇｐ。通过扫描显示，表达的ＲＶｇｐ占菌体总蛋白的１０％～１４％，其中ｐＥＴ－１７ｂ２ＲＶｇｐ在Ｅ。ｃｏｌｉＢＬ２１（ＤＥ３）中的表达量最高。; 秦翠丽金宁一佟明华刘楠郭志儒顾万钧毛春生李吉平殷震; 关键词：狂犬病病毒大肠杆菌

HIV-1 Gag蛋白的高效表达调控研究: 1997年; LTR位于HIV前病毒同DNA基因组的两末端,Gag基因位于5′端LTR的下游。LTR对转录的调控作用主要是由5′端LTR进行的。LTR具有启动子的作用,在结构上具有真核启动子的典型特征。另外,HIV-1 Gag蛋白还有能够自我装配成病毒样粒子(virus like particle,VLP)并从细胞中释放出来的重要特性。我们利用痘苗病毒表达系统。; 毛春生金宁一郭志儒郭志儒马奉龙王宏伟李萍殷震; 关键词：GAG蛋白重组痘苗病毒 HIV-1 启动子 GAG基因重组病毒

基因工程抗体的新种类—双链抗体被引量：4: 2000年; 双链抗体 (Diabody)是将两种抗体的重链可变区 (VH)和轻链可变区 (VL)基因交叉连接 ,形成“杂交”的单链抗体基因 ,表达后 ,两条单链抗体双链抗体自动互相折叠 ,形成双加或双特异性抗体片段。双链抗体在科学研究、免疫诊断和免疫治疗中都有广阔的应用前景。; 毛春生李季枝; 关键词：基因工程技术

人Ⅰ型免疫缺陷病毒gag-env嵌合基因在重组痘苗中的表达: 2000年; Gag和Env蛋白是人Ⅰ型免疫缺陷病毒 (Humanimmunodeficiencyvirustype 1,HIV 1)的结构蛋白 ,是HIV 1诱导机体产生体液免疫和细胞免疫的主要抗原。本实验通过多次亚克隆 ,将env基因以正确的三联密码读框插入 gag基因的下游 ,制备了HIV 1gag env嵌合基因 ,并将嵌合基因分别置于痘苗病毒 p7 5启动子和牛痘病毒A型包涵体 (ATI)启动子的下游 ,经过同源重组和红细胞吸附试验筛选 ,获得了 2株重组痘苗病毒。免疫荧光试验和酶免疫试验证明 ,两株重组痘苗病毒均能正确地表达HIV 1gag env嵌合基因。动物实验表明 ,gag env嵌合基因重组痘苗病毒可诱导小鼠产生抗HIV特异性抗体。这些结果为艾滋病颗粒化疫苗的研制提供了借鉴。; 毛春生金宁一佟明华郭志儒殷震; 关键词：HIV-1 重组痘苗病毒

在大肠杆菌中高效表达人Ⅰ型免疫缺陷病毒p24蛋白被引量：1: 1998年; 目的表达人Ⅰ型免疫缺陷病毒（HIV—1）衣壳蛋白p24，为制备抗p24单克隆抗体及其诊断杭原奠定基础。方法将编码HIV—1p24蛋白的P24(gag)基因片段，克隆到原核表达载体PET—17b的T7噬菌体启动子下游，构建重组表达质粒;转化大肠杆菌BL2（DE3），IPTG诱导表达，表达产物以SDS-PAGE、Westernblotting及点免疫印迹分析。结果构建成功重组表达质粒pET24，经IPG诱导，p24(gag)基因片段在大肠杆菌BL21（DE3）中高效表达，产物为30kDa的810—p24融合蛋白，表达量占菌体总蛋白的38.4％;重组p24蛋白均与抗p24单克隆抗体及HIV—1阳性血清发生特异性反应。结论重组P24蛋白具有较好的免疫活性，是制备抗P24单克隆抗体及诊断试剂的理想抗原。; 郭军庆金宁一毛春生郭志儒尹凤阁殷震; 关键词：艾滋病大肠杆菌 HIV-1

鸡痘病毒282F_4弱毒株基因组BamHⅠ片段的克隆与分析: 1995年; 采用鸟枪法克隆鸡痘病毒（Ｆｏｗｌｐｏｘｖｉｒｕｓ，ＦＰＶ）基因组ＢａｍＨⅠ部分片段，用Ｔｈｇｏｘｉｇｅｎｉｎ一ｄＵＴＰ标记的ＦＰＶ２８２Ｆ_４弱毒株ＢａｍＨⅠ片段探针，点杂交，证实２２个克隆插入了ＦＰＶ２８２Ｅ_４弱毒抹ＤＮＡ的ＢａｍＨⅠ片段，选取具有代表性的大小不同的６个质粒ｐＵＡ、ｎＵＢ、ｐＵＣ、ｐＵＤ、ｐＵＥ、ｐＵＦ。６个质粒插入的片段Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ分别为７．３，４．９．４．２，３．６，３．２，３．０ｋｂ，分别以ＣｌａⅠ、ＥｃｏＲⅠ、ＥｃｏＲＶ、ＨｉｎｄⅡ、ＰｓｔⅠ、ＳａｃⅠ、ＳａｃⅠ、ＳｍａⅠ、ＸｈｏⅠ进行单酶切，又经适当组合酶切。实验结果表明，在各片段在在的单酶切位点为Ａ：ＥｃｏＲⅠ、ＳａｃⅠ、ＸｈⅠ位点；Ｂ：ＥｃｏＲⅠ、ＸｈⅠ、ＨｉｎｄⅡ位点；Ｃ：ＣｌａⅠ、ＳａｃⅠ、ＳａｌⅠ位点；Ｄ：ＳａｌⅠ、ＰｓｔⅠ位点；Ｅ：ＥｃｏＲＶ位点；Ｆ：ＥｃｏＲＶ位点。逃出７．３ｋｂ片段，选取片段中单一酶切位点ＢｇｌⅡ，插入痘苗病毒（ｖａｃｃｉｎｉａｖｉｒｕｓ，ｖｖ）Ｐ_７，５启动于和Ｐ_１１启动子控制下的报告基因ＬａｃＺ，构建成时时表达载体质粒，通过与ＦＰＶ２８２Ｅ_４株转染鸡胚成纤维细胞，一生的重组病毒。; 金宁一顾万钧周复春毛春生刘楠秦翠丽殷震; 关键词：鸡痘病毒克隆酶切图谱质粒

抗HBsAg二硫键稳定性Fv抗体(dsFv)突变基因的构建与序列分析: 1998年; ｄｓＦｖ是近年发展起来的一种新型基因工程抗体，具有分子小，稳定性好，生物学活性高等特点。我们采用ＰＣＲ定点突变方法，成功地构建了抗ＨＢｓＡｇｄｓＦｖ抗体的轻、重链突变基因，并进行了序列分析，证明在重链第４４位氨基酸和轻链第１００位氨基酸，已突变形成半胱氨酸（Ｃｙｓ），为进一步表达有活性的抗ＨＢｓＡｇｄｓＦｖ抗体奠定了基础。; 宋宏彬毛春生陈薇陈薇徐德忠; 关键词：抗体 HBSAG 定点突变

毛春生

合作作者

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户反馈

毛春生

合作作者

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户登录

用户反馈