梁重阳
- 作品数：47 被引量：69H指数：5
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- 重组灵芝免疫调节蛋白(rLZ-8)单克隆抗体的制备及鉴定
- 2012年
- 目的:制备重组灵芝免疫调节蛋白(rLZ-8)单克隆抗体,为rLZ-8的药效学及药代动力学研究奠定基础。方法:以纯度99%的rLZ-8免疫BALB/c小鼠;应用常规的细胞融合技术建立一种能够稳定分泌抗rLZ-8单克隆抗体的杂交瘤细胞株;采用小鼠腹腔接种法制备腹水;Protein A Sepharose亲和层析柱在AKTA纯化仪上对抗体进行纯化;间接ELISA方法测定单克隆抗体的效价;Western blot胶片曝光方法对rLZ-8单克隆抗体特异性进行分析。结果:筛选出2株可特异性分泌抗rLZ-8单克隆抗体的杂交瘤细胞株。分别命名为clone13-2-3和clone11-4-4。其抗体亚型分别为IgG1亚型和IgG2a亚型。腹水抗体效价分别为1∶12 000和1∶7 500,细胞培养上清效价分别为1∶3 000和1∶2 800。Western blot检测证明这两株杂交瘤细胞所分泌的单克隆抗体均具有良好的特异性。结论:成功制备出较高效价和较高特异性的鼠抗rLZ-8的单克隆抗体。
- 张淑芹梁重阳刘志屹戴璐张福明孙非
- 关键词：细胞融合单克隆抗体效价
- 融合蛋白表达过程中N末端蛋白对下游蛋白正确折叠的影响被引量：2
- 2014年
- 将灵芝免疫调节蛋白(LZ-8)与免疫球蛋白G的Fc片段(IgG Fc)进行融合表达,通过Protein A亲和层析结合Superdex 75分子筛层析获得了高纯度LZ8-Fc.凝血活性实验结果表明,LZ-8与Fc融合表达在一定程度上影响了其免疫活性;利用分子动力学和圆二色光谱等技术研究了LZ8-Fc的蛋白折叠及组装方式,发现LZ8-Fc的组装方式与LZ-8相同,但是N末端的LZ-8可能影响下游IgG Fc片段的正确折叠,表明在融合蛋白制备过程中,位于N末端的蛋白对下游蛋白的正确折叠起到重要作用,这为融合蛋白制备技术的优化及应用过程中的稳定提供了重要的理论依据.
- 侯玥孙非金倞刘志屹郑清川梁重阳
- 关键词：分子动力学二聚体
- 3D-SIM结构照明超分辨率显微镜实现蛋白质在植物亚细胞器内的定位被引量：3
- 2015年
- 基因表达产物蛋白质的亚细胞定位是解析基因生物学功能的重要证据之一。近年来出现的超分辨率光学成像技术已成功应用于人类和动物细胞中,预示着显微成像技术继激光共聚焦技术后的又一重要进步。由于植物细胞的特殊性和成像技术的研发取向,超分辨率光学成像技术在植物细胞蛋白质亚细胞定位的应用尚未见报道。该研究利用Delta Vision OMX显微镜技术,克服了叶绿体基粒中叶绿素自发荧光与融合蛋白荧光不易区分的缺陷,解决了受分辨率局限无法将植物细胞中蛋白质在亚细胞器内可视化精确定位的技术难题,成功地将植物蔗糖合成酶Zm SUS-SH1定位在烟草表皮细胞叶绿体基粒周围。该研究同时建立了一套基于撕片制片法的简便OMX显微镜制片方法,并针对OMX显微成像技术在植物细胞中蛋白质亚细胞定位的应用进行了讨论。
- 刘玥尹悦佳梁重阳黄殿帅王阳刘艳芝窦瑶冯树丹郝东云
- 关键词：荧光蛋白
- 一种用于组织样本的高分辨率空间组学检测方法
- 本发明适用于一种组织样本的高分辨率空间组学检测装置、系统和方法，提供了一种用于组织样本的高分辨率空间组学检测的装置、系统和方法，分别包含：一种带有可容纳微载体的微井反应室阵列的玻片，一种修饰核酸分子标识符的方法和一种在捕...
- 张俊虎梁重阳于年祚金正洋杨柏
- 文献传递
- 灵芝免疫调节蛋白(Lz-8)在毕赤酵母中的表达及其免疫活性鉴定(英文)被引量：11
- 2009年
- 真菌免疫调节蛋白家族(Fungi immunoregulatory proteins,FIPs)各成员所具有的免疫调节和抗肿瘤活性已被广泛研究。本研究利用毕赤酵母表达系统对其成员Lz-8进行了重组表达。以毕赤酵母突变株GS115为表达宿主细胞,PCR和DNA测序结果均显示Lz-8的cDNA已被成功地整合入酵母基因组。聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、激光解析飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)和免疫学实验均被用于重组表达蛋白的检测。实验结果表明Lz-8在毕赤酵母表达系统中得到成功表达,在SDS-PAGE中可观察到分子量为14000D的单一条带,MALDI-TOF-MS的实验结果显示rLz-8的分子量为12722D。在相关的免疫学实验中,rLz-8可引起绵羊血红细胞凝集,但对人血4种血型的红细胞并没有凝集作用,rlz-8还可诱导巨噬细胞吞噬作用,均与其他报道中的实验结果吻合。以上结果表明,本实验已成功地利用毕赤酵母表达系统对Lz-8进行重组表达。
- 梁重阳张淑芹刘志屹孙非
- 关键词：灵芝毕赤酵母免疫蛋白
- 重组灵芝免疫调节蛋白的纯化及其性质被引量：6
- 2008年
- 采用超滤浓缩、强阴离子交换、疏水作用和凝胶色谱等方法,对毕赤酵母表达的rGlip进行分离和纯化,对离子交换色谱中rGlip与固相结合的最佳pH值进行了考察,并对纯化产物的活性进行了鉴定.rGlip在215nm处有强的紫外吸收,经激光解析电离时间飞行质谱鉴定其相对分子量为12722,经反相液相色谱鉴定纯度≥97%.设计rGlip的疏水作用色谱,有效地去除色素.凝血实验结果表明,rGlip可以凝集绵羊血红细胞,但对人血A,B,AB和O型等红细胞无凝集作用,有类似凝集素的生物学活性.
- 朱建强梁重阳冯凯盖晓东孙新孙非
- 关键词：灵芝阴离子交换色谱凝胶过滤色谱纯化
- 一种DNA编码化合物库药物分子垂钓方法
- 本发明将金属纳米粒子探针与靶蛋白或靶蛋白结合受体蛋白偶联，加入事先制备好的DNA编码化合物库中孵育进行分子垂钓，通过PCR扩增与DNA测序获得靶向药物信息。然后，分别制备金属纳米粒子探针和磁珠探针并与拉曼信号分子耦联，再...
- 梁重阳徐抒平戴璐
- 文献传递
- 三七总黄酮对病毒性心肌炎模型治疗作用的药效学研究被引量：27
- 2006年
- 目的评价三七总黄酮对柯萨奇B3病毒感染体外、体内模型的治疗作用。方法采用柯萨奇B3型病毒感染原代培养Wistar乳鼠心肌细胞方法,建立体外病毒感染模型;Balb/c小鼠腹腔注射柯萨奇B3型病毒感染建立病毒性心肌炎体内实验动物模型。结果三七总黄酮能明显抑制体外培养心肌细胞病变;治疗组小鼠生存率明显增加,心肌酶释放活性明显降低;小鼠干扰素水平上升,病毒滴度降低;炎性浸润作用明显减轻。结论三七总黄酮对柯萨奇B3病毒所致小鼠病毒性心肌炎具有一定治疗作用。
- 孙非衣同辉梁重阳张淑芹刘志屹
- 关键词：病毒性心肌炎柯萨奇B3病毒
- 一种重组灵芝免疫调节蛋白制备方法
- 本发明提供一种重组灵芝免疫调节蛋白的制备方法。该方法按以下步骤：构建工程菌，设计编码LZ－8蛋白基因，将其与酿酒酵母α－因子前导肽编码序列相连成为融合基因，将此基因转入毕赤酵母表达系统GS115进行重组表达，获得高效表达...
- 孙非刘立侠许守民梁重阳
- 文献传递
- 一种SERS检测装置
- 本实用新型提供一种SERS检测装置，包括：检测板本体，检测板本体具有若干个容纳槽，容纳槽用于容纳目标液体；以及盖板，盖板具有若干个凸起部，若干个凸起部与若干个容纳槽一一对应，通过若干个凸起部依次塞入至若干个容纳槽内，以使...
- 梁重阳徐抒平戴璐
- 文献传递
