杨明夏
- 作品数：37 被引量：151H指数：6
- 供职机构：南京医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省自然科学基金国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学生物学更多>>
- K<sub>ATP</sub>通道开放剂Iptakalim抑制人肺动脉平滑肌细胞增殖的蛋白质组学研究
- 缺氧性肺动脉高压(hypoxic pulmonary hypertension, HPH)是慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease, COPD)的重要病理生理改变,其...
- 杨明夏
- 关键词：肺动脉平滑肌细胞KATP开放剂IPTAKALIM
- 不同引物及数据分析方法对定量PCR结果的影响被引量：17
- 2009年
- 目的:研究不同引物及数据分析方法对实时荧光定量PCR SYBR Green染料法检测基因表达差异结果分析的影响。方法:通过Primer Express 2.0软件对目的基因CCND1、C-JUN分别设计4对不同引物进行SYBR Green染料法定量PCR扩增,并分别使用2-△△CT法、Pfaffl法及相对标准曲线法计算肺癌紫杉醇敏感细胞株及耐药细胞株间目的基因的表达差异,分析不同引物和数据计算方法对实验结果的影响。结果:统计学分析表明,引物的扩增效率对定量PCR结果分析有显著影响,不同引物特异性扩增得到的样本间表达倍数有显著差异(P<0.05)。3种计算方法中,Pfaffl法与相对标准曲线法无统计学差异(P>0.05),而2-△△CT法与其他2种方法均有显著差异(P<0.05)。结论:引物的选择对于定量PCR结果有显著影响;Pfaffl法是更准确,更合理的相对定量计算方法。
- 刘正霞徐阳徐进梅杨明夏马磊朱昌亮
- 关键词：实时荧光定量PCR
- RNA干涉及其在寄生虫学研究中的应用被引量：1
- 2002年
- RNA干涉(RNA interference,RNAi)是一种内源性或外源双链RNA(double-stranded RNA,dsRNA)所引起的细胞内有效的、序列特异性的基因关闭或基因缄默(gene-silencing)现象[1].
- 杨明夏朱昌亮
- 关键词：寄生虫学研究RNA干涉RNAI
- 一种呼吸机加湿装置
- 本发明涉及呼吸设备技术领域，具体涉及一种呼吸机加湿装置，包括空氧混合器，空氧缓冲器和滴水器；空氧混合器对进入其内的空气与氧气进行混合并湿化，滴水器对空氧混合器补充水分，空氧缓冲器对空氧混合器中输出的气体缓冲降压并均匀混合...
- 景阳潘岁月俞小卫杨明夏
- 文献传递
- 核糖体蛋白与肿瘤被引量：3
- 2017年
- 核糖体由核糖体蛋白和核糖体RNA组成,是蛋白质生物合成的重要场所.核糖体蛋白参与蛋白质的翻译过程,核糖体蛋白和核糖体RNA的表达紊乱将激活核糖体蛋白的核糖体外功能,该功能在肿瘤的发生发展过程中发挥重要作用.核糖体蛋白有望作为生物标志物或治疗靶点用于肿瘤的早期诊断和治疗中.
- 阮杏雅杨明夏
- 关键词：肿瘤
- 胃管留置致吸气性呼吸困难一例临床分析被引量：2
- 2013年
- 呼吸困难是临床常见病多发病,病因种类繁多,如何在短时间内发现病因并给予及时治疗与临床,特别是急诊病例有重要关系[1]。呼吸困难为一种呼吸不适的主观感受,是呼吸功能不全的重要表现,患者主观上感到空气不足、客观上表现为呼吸费力[2];临床上分为吸气性呼吸困难、呼气性呼吸困难以及混合性呼吸困难。危急重患者抢救需要长时间呼吸机支持呼吸的患者,气管切开是通常采用的气道管理方法,但气管切开易引起气管内疤痕增生,
- 黄洁媛杨明夏
- 关键词：胃管留置气管切开
- 抗药性相关糜蛋白酶基因真核表达载体的构建和鉴定被引量：2
- 2003年
- 目的:构建抗药性相关基因真核表达载体。方法:采用PCR方法,以淡色库蚊抗药性品系cDNA文库为模板,扩增出抗药性品系中高表达糜蛋白酶(chymotrypsin)基因,经T/A克隆测序鉴定后,扩增、纯化质粒,经双酶切后纯化目的片段,克隆到真核荧光表达载体pEGFP-C3中。结果:PCR和酶切鉴定表明,构建成功真核荧光表达载体pEGFP-C3/chymotrypsin。结论:PCR加双酶切鉴定的方法构建表达质粒,迅速省时,结果可靠。
- 杨明夏胡莺沈波马磊李秀兰秦黎朱昌亮
- 关键词：抗药性糜蛋白酶基因表达载体CDNA文库
- 抗牛胰蛋白酶(TRY)抗体的制备和对杀虫剂抗性的初步检测被引量：1
- 2007年
- 目的制备抗牛胰蛋白酶(TRY)多克隆抗体检测杀虫剂抗性,为建立蚊媒菊酯类杀虫剂抗性的现场检测方法奠定基础。方法用牛TRY配成200mg/mL的储备液,与弗氏完全佐剂等体积混合均匀后,按照每只BALB/c小鼠20μg的量背部皮下多点注射,每隔15d加强免疫1次。25d后尾部采血,用ELISA方法测定抗体滴度。45d后眼球采血分离血清,标记分装冷藏备用。用此抗体Western blot研究抗性和敏感品系淡色库蚊成蚊粗提蛋白,观察显色结果。结果所得多克隆抗体小鼠抗牛TRY抗血清滴度达到1:10000,ELISA重复性稳定。在抗TRY抗血清组抗性品系出现约28kD大小的显色带。结论成功制备小鼠抗TRY多克隆IgG抗血清,其检测蚊虫抗性是可行的,值得进一步研究。
- 马磊杨明夏孙艳李秀兰朱昌亮
- 关键词：多克隆抗体胰蛋白酶ELISA
- 人源性RPL22基因的原核表达与纯化及功能分析
- 2024年
- 目的了解人类核糖体蛋白L22(RPL22)基因的生物信息学,原核表达与纯化人类RPL22重组蛋白,在体外合成人类RPL22(标记为试剂M),研究试剂M对NSCLC A549细胞增殖、周期、凋亡的影响,分析试剂M和顺铂(DDP)联合进行化疗的效果。方法分析RPL22生物信息学。PCR克隆RPL22基因,进行单链寡核苷酸的设计及合成,获得目的基因后连接pET-28α载体,构建pET-28α-RPL22重组质粒,转化大肠埃希菌感受态细胞DH 5α,采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、Western blot分析重组蛋白RPL22的表达情况。CCK-8检测试剂M和DDP在A549细胞中的半抑制率(IC_(50))以及试剂M对A549细胞增殖的影响;流式细胞术检测试剂M对A549细胞凋亡、周期的影响;qPCR、Western blot检测试剂M和DDP分别对磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)、腺苷5′-单磷酸激活蛋白激酶/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(AMPK/mTOR)信号通路的影响。结果RPL22蛋白为不稳定亲水性蛋白质。诱导表达的重组蛋白经溶解纯化后获得了高浓度重组蛋白。在A549细胞中,试剂M的IC_(50)为400μg/L,DDP的IC_(50)为10μmol/L,试剂M抑制细胞增殖,其浓度与细胞活性成反比;试剂M(200μg/L)与DDP(2.5μmol/L)联合运用时,效果与单独使用10μmol/L DDP抑制增殖比相似;试剂M能诱导G 2细胞周期停止、促进细胞凋亡,且可能参与PI3K/AKT、AMPK/mTOR通路的调节。结论该研究首次克隆得到人类RPL22重组蛋白,使其成功纯化表达。
- 田甜张星娟杨明夏
- 关键词：非小细胞肺癌生物信息学分析功能分析
- 淡色库蚊胰蛋白酶基因
- 本发明属于基因工程领域,所述淡色库蚊胰蛋白酶基因(Culex pipiens pallens trypsin)基因全长为909bp,其开放阅读框架为783bp,编码261个氨基酸。该基因在GENBANK中的编号为AY03...
- 马磊朱昌亮沈波田海生李秀兰胡莺杨明夏
- 文献传递
