杨敏
- 作品数：14 被引量：70H指数：4
- 供职机构：第四军医大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- TNF-α对类风湿关节炎滑膜细胞中MAPK的作用被引量：8
- 1999年
- 目的 观察 Ｔ Ｎ Ｆα作用于类风湿关节炎（ Ｒ Ａ） 滑膜细胞后滑膜细胞中 Ｍ Ａ Ｐ Ｋ 的激活。方法 ３ ～５ 代体外培养的 Ｒ Ａ 滑膜细胞加外源性 Ｔ Ｎ Ｆα刺激后，裂解细胞，收获蛋白，进行 Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ 分析。结果 Ｔ Ｎ Ｆα刺激后滑膜细胞中有多种蛋白发生酪氨酸磷酸化，其中以 Ｍ Ａ Ｐ Ｋ最明显， Ｍ Ａ Ｐ Ｋ 的激活呈时间和剂量相关。结论 Ｔ Ｎ Ｆα作用于 Ｒ Ａ 滑膜细胞伴有明显的 Ｍ Ａ Ｐ Ｋ 激活， Ｍ Ａ Ｐ Ｋ 可能是 Ｔ Ｎ Ｆα作用于 Ｒ Ａ 滑膜细胞后信号传导中的重要介质。
- 燕太强吕厚山药立波杨敏丁海明陈占昆蒋东芳
- 关键词：肿瘤坏死因子Α类风湿性关节炎MAPK
- NF-κB激活蛋白2(NAP2)诱导白细胞介素-12分泌的研究
- 2003年
- 目的 :研究新克隆的编码NF κB激活蛋白 2 (NAP2 )基因的功能及作用机制。方法 :采用NF κB和IL 12启动子荧光素酶报告质粒及胞质内IL 12染色法 ,观察NAP2基因产物在巨噬细胞中对NF κB、IL 12启动子的激活及对IL 12合成的调控。结果 :NAP2可激活NF κB和IL 12启动子 ,而IκBαDN则可抑制他们的活化。在巨噬细胞系J774中 ,NAP2也可诱导IL 12表达。结论 :NAP2基因产物可激活IL 12启动子并诱导IL 12的合成 ,提示NAP2可能是通过调控NF κB转录因子而调节IL
- 杨敏刘娜Adrian T TING
- 一种简便、快速检测淋巴细胞增殖的方法被引量：25
- 2000年
- 目的 :建立转移因子 (TF)等免疫增强制剂体外生物活性简便、快速的检测方法。方法 :利用溴化四唑蓝法测定TF等促进小鼠脾淋巴细胞的增殖活性。结果 :TF、胸腺因子、胎盘因子三者均能明显地促进淋巴细胞增殖 ,平均增殖率为 6 3 .5 1%、77.6 5 %、86 .6 1%。结论 :此法稳定可靠 ,易于掌握、普及。
- 陈志阳王国华杨敏刘新平药立波
- 关键词：淋巴细胞增殖胸腺因子
- Tec家族蛋白酪氨酸激酶ItkPH结构域的克隆鉴定及其在酵母双杂交系统中自激活作用的检测
- 2000年
- Tec家族蛋白酪氨酸激酶Itk特异地表达于T细胞 ,对T细胞的成熟与活化等具有很大影响 ,因而可能在T细胞的信号转导过程中处于重要位置。我们利用PCR的方法从含Itk基因全长cDNA的pME18S EMT质粒中扩增出其PH结构域基因片段 ,并将其克隆入酵母双杂交载体pLexA ,经测序鉴定正确 ,转化酵母细胞EGY48(p8op lacZ ) ,挑取阳性克隆 ,利用液相法和平板法检测 ,证实PH结构域无自激活作用 ,且对宿主菌无毒性作用 ,可用于T细胞cDNA文库的筛选 ,捕捉与之相互作用的蛋白。
- 韩月恒张晓光杨敏聂小燕刘新平白玉杰苏成芝药立波
- 关键词：ITKPH结构域酵母双杂交系统自激活作用PTK
- 乙型肝炎病毒PreS基因的克隆表达及亲和层析纯化被引量：10
- 2001年
- 目的 获取乙型肝炎病毒前 S区基因 (HBVpre S) ,序列测定正确后进行融合表达 ,为今后研究其机制及应用创造条件 .方法 利用乙型肝炎病毒基因组为模板体外扩增HBVPre S基因后进行基因克隆 .目的基因经测序正确后克隆入融合表达载体 p RSET- C中 ,转化大肠杆菌 JM10 9(DE3) .目的基因经 IPTG诱导 ,由 T7启动子调控表达了氨基端带 6个连续组氨酸残基的 HBV- Pre S蛋白 ,在变性条件下对目的蛋白进行纯化 .结果 成功地扩增到 pre S区全长基因 ,得到融合 6个 His的 HBV- Pre S蛋白纯度大于 90 % .结论 构建了乙型肝炎病毒前 S区基因的重组表达载体 ,获得了稳定表达的工程菌 .
- 杨敏刘新平韩炯张晓光药立波苏成芝陈常庆
- 关键词：乙型肝炎病毒基因克隆基因表达亲和层析纯化
- bax基因转染对人喉癌细胞恶性表型和细胞周期的影响
- 2002年
- 张术杨敏黄维国
- 关键词：BAX基因HEP-2基因转导喉癌
- 胃癌特异性转移因子诱导淋巴细胞表面IL-2受体表达被引量：4
- 2000年
- 目的 观察胃癌特异性转移因子 (GSTF)对淋巴细胞进行诱导刺激后 ,淋巴细胞表面的 IL- 2受体 (IL- 2 R)表达的变化 .方法 应用流式细胞仪检测异硫氰基荧光素 (FITC)标记的淋巴细胞表面 IL - 2 R抗体的荧光强度 ,以观察其受刺激前后表面 IL- 2 R的表达 .结果 GSTF在与其特异性抗原共同存在下诱导刺激淋巴细胞 ,可使其表面的 IL- 2 R表达量增加 ,且 GSTF的这种作用具有抗原特异性 ,GSTF或胃癌抗原单独存在时此作用则不明显 .结论 为肿瘤特异性转移因子的活性检测建立了一种新型快速、客观科学的检测方法 ,也为今后肿瘤特异性转移因子的分离纯化及进一步研究转移因子的作用机制打下了基础 .
- 杨敏曹云新刘智广药立波刘新平苏成芝
- 关键词：胃癌特异性转移因子IL-2R流式细胞仪
- 胃癌高表达基因erk的PCR扩增、克隆和鉴定被引量：4
- 1997年
- 对在胃癌高表达的EPH家族基因erk胞外的配体结合区基因扩增及克隆．方法：从胃癌患者手术切除标本中提取RNA，反转录为cDNA，以计算机辅助分析设计并合成引物进行RT－PCR，并将扩增片段克隆入pUC19质粒，用酶切及PCR方法筛选鉴定阳性克隆．结果：RT－PCR扩增片段与设计相符，且特异性好，无非特异产物出现，表明所设计引物符合要求．酶切及巢式PCR、PCR－RFLP方法证明克隆片段正确插入pUC19的HindIII和BamHI位点，并将重组克隆命名为pGE42．结论；克隆的完成为进一步研究该基因在胃癌的发生中的作用，寻找其胞外配体及进行表达产物的细胞定位等工作打下基础．
- 张晓光王方阎小君苏成芝王国华杨敏
- 关键词：胃癌基因克隆多聚酶链反应
- B细胞成熟抗原BCMA在细胞内诱导NF-κB的活化被引量：2
- 2003年
- 目的 :研究细胞表面B细胞成熟抗原 (B cellmatu rationantigen ,BCMA)在B细胞激活因子刺激下 ,对转录因子NF κB是否具有激活作用 .方法 :采用电转移基因转染和卤化钙基因转染方法 ,将BCMA和C末端缺失 80个氨基酸残基的BCMA基因 (BCMAΔC80 )分别转染 3T8细胞及kbgfp细胞 ,观察与NF κB启动子下游的报告基因表达水平的变化 .结果 :BCMA在 3T8细胞中经BAFF激活后可上调报告质粒中CD14基因的表达 ,而C末端缺失 80个氨基酸残基的突变BCMA(BCMAΔC80 )则不具备此功能 .同时在另一报告细胞系kbgfp中亦观察到类似作用 .结论 :细胞表面的BCMA在被B细胞激活因子刺激后 ,可引起NF κB的活化 ,这一作用依赖于BCMA的C末端的 80个氨基酸残基 .
- 杨敏刘娜Adrian T.TING
- 关键词：B细胞成熟抗原NF-ΚB转录因子
- 抗人肝癌单链抗体的基因克隆和分泌型表达被引量：3
- 1998年
- 应用ＲＴＰＣＲ技术，从分泌抗人肝癌单克隆抗体（ｍＡｂ）的杂交瘤细胞ＨＡｂ１８中，扩增出抗体ＶＨ和ＶＬ基因，并测序。计算机分析表明，ＶＨ和ＶＬ均符合小鼠抗体可变区的特征，为功能性重排的抗体可变区基因。用（Ｇｌｙ４Ｓｅｒ）３连接肽基因，将ＶＨ和ＶＬ连接成ＳｃＦｖ基因，并进行序列测定，结果表明，ＶＨ，ＶＬ，ｌｉｎｋｅｒ拼接正确，基因全长为７２６ｂｐ。用噬菌粒表达载体ｐＣＡＮＴＡＢ５Ｅ在大肠杆菌中表达了可溶性的ＳｃＦｖ融合蛋白，经流式细胞仪分析表达产物可特异地与肝癌细胞结合。
- 牛利国陈志南苏成芝药立波刘新平王国华杨敏
- 关键词：单链抗体克隆肝肿瘤
