杨敏
- 作品数：28 被引量：50H指数：4
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- CpG-ODN对婴幼儿喘息性支气管炎外周血单个核细胞T-bet表达的影响
- 目的:探讨CpG-ODN干预对婴幼儿喘息性支气管炎外周血单个核细胞(PBMC)T-bet表达和IFN-γ分泌的影响。方法:对28例喘息性支气管炎(喘支组)患儿于急性期和恢复期分别抽取抗凝静脉血并分离PBMC,以终浓度为1...
- 王锁英许化溪杨敏许小朋邱谷风李国民张贇健马洁眭建姜旭淦胡嘉波
- 关键词：婴幼儿喘息性支气管炎CPG-ODNT-BET外周血单个核细胞
- 文献传递
- 转录因子T-bet和GATA-3对婴幼儿喘息性支气管炎免疫调控作用的初步研究
- 目的:初步探讨转录因子T-bet和GATA-3对小儿喘息性支气管炎的免疫凋控作用。方法:对32 例小儿喘息性支气管炎(喘支组)和30例正常儿童(对照组)抽取抗凝静脉血5ml,Ficoll分离外周血淋巴细胞,以终浓度为10...
- 王锁英张赟健忻悦许小朋杨敏邱谷凤马洁眭建许化溪
- 关键词：婴幼儿喘息性支气管炎GATA-3T-BET免疫调控
- 文献传递
- 人T-bet基因转染U937探讨T-bet对白血病细胞的影响被引量：1
- 2007年
- 目的探讨人T-bet基因在白血病细胞株U937中的表达及其对IFN-γ分泌的影响,寻求通过免疫调节改善白血病患者机体免疫状态的可能性。方法采用电穿孔技术将重组人pIRES-eGFP-Tbet(pIRES-eGFP-hTbet)质粒转染U937细胞,RT-PCR检测转染前后U937细胞T-bet的mRNA水平;westen-blot检测表达的T-bet蛋白;ELISA检测其分泌IFN-γ的水平。试验中同时设立pIRES-eGFP质粒为对照。结果电穿孔转染U937细胞后,在荧光显微镜下观察到带荧光的细胞(转染细胞),其荧光细胞阳性率80%左右,提示转染成功;转染T-bet的U937细胞,分别经RT-PCR及westen-blot检测到T-bet的mRNA和表达的蛋白,而未经转染或转染对照质粒pIRES-eGFP的细胞,均未见目的基因的转录和蛋白表达;T-bet转染细胞的培养上清中含有较高水平的IFN-γ,而转染前及对照质粒转染的细胞IFN-γ的分泌水平极低。结论通过电穿孔方法成功将人T-bet基因转染到白血病细胞株U937中,并检测到大量IFN-γ的产生。T-bet是免疫应答调节的重要转录因子,对其研究将有助于进一步探讨T-bet基因或其表达产物作为Th1应答的调节剂用于临床血液病治疗的可能性。
- 许小朋王锁英杨敏邱谷风王胜军邵启祥许化溪
- 关键词：基因转染T-BET干扰素ΓU937
- 人T-bet基因克隆及其功能的初步研究
- 人类转录因子T-bet/(T-box expressed in T cells，T-bet/)基因，作为Th1细胞特异性的转录因子，在Th1细胞分化中诱导IFN-γ分泌，上调IL-12Rβ2的表达，同时抑制IL-4的表达...
- 杨敏
- 关键词：T-BET单克隆抗体基因克隆
- 文献传递
- 人GITR基因的克隆和序列分析被引量：4
- 2007年
- 目的:克隆人GITR基因全长编码区的cDNA,同时对其序列进行分析。方法:采用RT-PCR方法,从正常人外周血单个核细胞获得GITR基因的cDNA,克隆至pGEM-T载体,选择阳性克隆并进行序列测定。结果:扩增得到的人GITR基因编码区cDNA的全长726 bp,编码241个氨基酸残基,与GeneBank注册的序列完全一致。结论:获得人类GITR基因的克隆,为进一步研究其生物学功能奠定了基础。
- 仝佳王胜军毛朝明杨云良陈君杨敏
- 关键词：CDNA克隆RT-PCR调节性T细胞
- 小鼠FoxP3基因腺相关病毒的制备与鉴定被引量：2
- 2007年
- 目的:构建携带小鼠FoxP3基因的重组腺相关病毒,并检测其在NIH3T3细胞的表达情况。方法:将FoxP3通过内部核糖体进入位点(IRES)与报告基因增强型绿色荧光蛋白连接,构建同时含有目的基因和报告基因的重组腺相关病毒(rAAV)表达质粒,通过磷酸钙沉淀法共转染HEK293细胞,收获并通过肝素亲和层析法纯化病毒,并对病毒纯度和滴度进行鉴定。利用携带FoxP3基因的重组病毒体外感染小鼠NIH3T3细胞,体外观察感染效率和目的基因转录情况。结果:包装成功的rAAV/FoxP3经纯化后获得了高纯度的rAAV/FoxP3,实时定量PCR检测rAAV/FoxP3的病毒滴度达到5.0×1012vg/mL,体外感染NIH3T3细胞,流式细胞术测定感染效率可达92.88%,实时PCR测定细胞内存在高水平FoxP3mRNA。结论:获得携带FoxP3-IRES-EGFP的rAAV,并可有效感染NIH3T3细胞,为进一步研究FoxP3的生物学功能提供了有效工具。
- 王胜军马洁马斌毛朝明仝佳杨敏邵启祥许化溪
- 关键词：FOXP3腺相关病毒免疫调节
- 人AITRL胞外区基因克隆表达及重组蛋白生物活性分析被引量：1
- 2007年
- 目的:获得重组人活化诱导的肿瘤坏死因子超家族配体胞外区蛋白(sAITRL),分析AITRL蛋白的生物学功能。方法:从全长质粒AITRL-pMD18-T中扩增sAITRL cDNA,亚克隆至表达载体pQE30;将重组质粒转化至E.coliM15,IPTG诱导蛋白表达;表达蛋白用Ni2+-IMAC柱纯化、复性并Western blot鉴定,流式细胞仪检测sAITRL重组蛋白的结合活性,增殖试验分析sAITRL的生物学活性。结果:成功构建了sAITRL-pQE30原核表达载体;表达相对分子质量约15kD的重组蛋白;sAITRL能与活化淋巴细胞上的天然受体AITR结合,低浓度的sAITRL能促进淋巴细胞的增殖,而在高浓度下则抑制了淋巴细胞的增殖。结论:成功表达了具有生物学活性的sAITRL重组蛋白,AITR-AITRL相互作用在调节淋巴细胞增殖过程中起重要作用。
- 毛朝明王胜军仝佳马洁杨敏许小朋邱谷风唐莉邵启祥李龙许化溪
- 关键词：基因克隆原核表达重组蛋白
- 转录因子T-bet和GATA-3对婴幼儿喘息性支气管炎的免疫调控作用
- 目的:探讨转录因子T-bet和GATA-3对小儿喘息性支气管炎的免疫调控作用。方法:对32例小儿喘息性支气管炎(喘支组)和30例正常儿童(对照组)抽取抗凝静脉血5ml,Ficoll分
- 王锁英许化溪许小朋杨敏张贇健忻悦邱谷风马洁眭建姜旭淦胡嘉波
- 关键词：支气管炎喘息免疫调控
- 文献传递
- 未修饰纳米SiO_2和表面修饰型纳米SiO_2对大鼠肺泡巨噬细胞的毒性研究被引量：6
- 2007年
- 目的:比较未修饰纳米SiO2和表面修饰型纳米SiO2对大鼠肺泡巨噬细胞的毒性。方法:通过支气管肺泡灌洗分离雄性SD大鼠肺泡巨噬细胞。未修饰纳米SiO2(M-5型)及两种表面修饰型纳米SiO2(TS-610型,TS-720型)剂量分别为0,8,40,100,200μg/cm2,用MTT实验测定对细胞活性的影响,LDH实验测定对细胞膜的损伤,TBA法测定脂质过氧化作用的程度。结果:M-5型纳米SiO2在剂量大于100μg/cm2时,各指标与对照组相比有统计学意义(P<0.05),而两种表面修饰型纳米SiO2与对照组相比均无统计学意义。结论:未修饰纳米SiO2对大鼠肺泡巨噬细胞的毒性较强,颗粒表面被修饰后其毒性明显降低,表明颗粒表面反应性在毒性机制中发挥重要作用。
- 田晓雷陈敏杨敏王胜军姜旭淦李华明谢吉民
- 关键词：纳米SIO表面修饰肺泡巨噬细胞毒性
- 人T-bet基因的表达、纯化及其多克隆抗体的制备
- 目的:利用载体pQE30在大肠埃希菌(M15)原核表达人T-bet基因全长序列,并对表达产物进行纯化、免疫动物和制备多克隆抗体,为进一步研究T-bet的生物学功能奠定坚实的基础。方法:利用PCR技术从克隆载体pGEM-T...
- 杨敏王锁英许小朋马洁毛朝明仝佳邱谷风胡正军王胜军邵启祥许化溪
- 关键词：多克隆抗体T-BET
- 文献传递
