李春秀 作品数:18 被引量:104 H指数:5 供职机构: 中国林业科学研究院 更多>> 发文基金: 国家高技术研究发展计划 国家科技支撑计划 引进国际先进农业科技计划 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 水利工程 经济管理 更多>>
毛白杨纤维素合成酶基因的克隆及功能鉴定 本研究以毛白杨次生木质部为材料,通过RT-PCR克隆了纤维素合成酶PtoCesA1全长基因和PtoCesA2,PtoCesA3的基因片段,利用转基因手段,获得了各基因的转基因植株,根据转基因植株的表型,分析了各基因的功能... 李春秀关键词:毛白杨 基因克隆 转基因植株 丽格海棠组织培养外植体再生体系建立关键技术的研究 被引量:29 2002年 以丽格海棠的叶、茎、花茎、叶柄等营养器官作为外植体进行组织培养,着重研究丽格海棠的最佳外植体,最佳培养基配方及接种模式的关键技术。研究表明初代培养基本培养基为MS,激素配比为6-BA0 5mg/L+NAA0 1mg/L,培养30d可获得较多的不定芽。外植体分化能力的研究表明丽格海棠的不同类型外植体能力大小为:叶>茎>花茎>叶柄;从叶片的不同部位来看,叶中>叶侧>叶边缘;从不同叶龄来看,中等成熟叶>幼叶>完全成熟叶>芽叶。叶片的接种模式:反放比正放好。 李春秀 石大兴 王米力关键词:丽格海棠 外植体 接种模式 激素配比 中间锦鸡儿种子特异性fad2基因克隆及fad2-1A基因酵母表达载体的构建 被引量:3 2008年 Δ12脂肪酸脱氢酶(Δ12 fatty acid desaturase,Δ12 FAD,也称为fad2)催化油酸生成亚油酸,是植物体内生成多不饱和脂肪酸的关键酶,种子中特异表达的fad2基因负责种子贮脂中多不饱和脂肪酸亚油酸的生成,决定种子油脂的成分和营养价值。采用RT-PCR和RACE技术从中间锦鸡儿未成熟种子中克隆了种子特异表达的fad2-1A、fad2-1B基因,fad2-1A编码的前283个氨基酸与fad2-1B的同源性高达98.9%,前者比后者多编码97个氨基酸,全部氨基酸残基的同源性为70.71%。将fad2-1A克隆到真核表达载体pYES2中,构建了重组质粒pYES2-fad2-1A,经PCR检测、质粒酶切、测序等检测,目的基因确实插入重组质粒,且方向正确,为进一步研究fad2基因的功能和表达调控机理奠定了基础。 林萍 李春秀 齐力旺 张守攻关键词:中间锦鸡儿 FAD2基因 克隆 真核表达载体 柠条fad2基因片段的克隆,反义表达载体的构建和转化 柠条是锦鸡儿属植物主要栽培品种的总称,是在我国华北和西北广泛分布的一种生物质能源灌木。据不完全统计,中间锦鸡儿在我国的分布面积达到5000万亩,并且每年新造林几十万亩。其种子平均含油量12.5%,不饱和脂肪酸含量平均87... 汪阳东 张守攻 史胜青 李春秀 齐力旺关键词:中间锦鸡儿 反义表达载体 基因片段 文献传递 丽格海棠离体繁殖技术研究 本研究以丽格海棠的叶、茎、花茎、叶柄等营养器官作外植体进行组织培养,着重研究丽格海棠的最佳外植体、最佳培养基配方及培养程序,以及生根炼苗等的关键技术。研究表明初代培养的基本培养基为MS,激素配比为6-BA0.5mg/L+... 李春秀关键词:丽格海棠 外植体 接种模式 文献传递 中间锦鸡儿fad2基因片段的克隆和反义表达载体的构建及遗传转化初步研究 本文以我国重要的生物能源灌木--中间锦鸡儿枝叶和种子为材料,根据Genbank中已经发表fad2基因的同源序列,利用PCR技术克隆得到两个基因片段.在GenBank中Blast(GenBank登录号AY957393和AY... 汪阳东 张守攻 李春秀 齐力旺关键词:中间锦鸡儿 FAD2基因 反义表达载体 基因克隆 文献传递 中间锦鸡儿fad2基因片段克隆、反义表达载体构建及遗传转化初步研究 被引量:5 2007年 以我国重要的生物能源灌木——中间锦鸡儿枝叶和种子为材料,根据GenBank中已经发表fad2基因的同源序列,利用PCR技术克隆得到基因片段。在GenBank中Blast(GenBank登录号AY957393)所得基因片段和同属豆科的Glycine max Gmfad2-2a同源性高达88%,位于fad2基因编码区中部。将所得片段经BamHI和SacI酶切后插入表达载体质粒pBI121,构建了反义表达载体pBI121fad2,并利用农杆菌介导法转入烟草叶片,获得了抗卡那霉素和氨苄青霉素的再生烟草植株。初步分析结果表明:与对照烟草相比,转基因烟草种子脂肪酸含量没有明显差异,而亚油酸则减少10.3%。 汪阳东 李春秀 齐力旺 张守攻关键词:中间锦鸡儿 生物柴油 FAD2基因 反义表达载体 脆弱生态地区水资源利用与旅游开发规划——以长流水流域为例 跟踪调查了长流水流域开发前后生态与环境的变迁及由此引发的社会冲突事件。在深入分析事件背后的社会与生态根源后,从旅游开发角度提出在恢复原有生态格局的前提下,实现政府、开发商以及长流水村在生态、社会、经济等多方面和谐、共赢的... 廖嵘 李春秀关键词:旅游规划 水资源利用 文献传递 植物纤维素合成酶基因和纤维素的生物合成 被引量:37 2005年 纤维素地球上最丰富的生物大分子和最重要的可再生资源,1996年克隆了第一个植物纤维素合成酶基因,植物纤维素的生物合成需要多个纤维素合成酶与其他相关酶如Korrigan纤维素酶,蔗糖合成酶等来共同完成。本文介绍了植物纤维素合成酶基因和纤维素的生物合成途径及其相关基因如蔗糖合成酶基因、KORRIG-AN基因等研究进展。 李春秀 齐力旺 王建华 汪阳东 史胜青 张守攻关键词:基因表达 纤维素 生物合成 蔗糖合成酶 运用cDNA-AFLP技术初步鉴定两种方法合成的cDNA的指纹图谱 被引量:4 2006年 在植物基因克隆以及构建cDNA文库时,都需要合成高质量的双链cDNA,并要达到一定的数量。然而研究者经常受到试验样品量的限制。特别是比较稀少的植物材料,例如植物的根尖、茎尖或花的雌、雄蕊等,难以获得足够的RNA,以致影响cDNA的合成量,无法开展下游的实验。以PCR为基础合成第二链cD-NA的Smart技术(LD-PCR),能够以50ng的总RNA为反转录模板合成高质量的双链cDNA。但研究者对第二链采用PCR方法是否有些基因信息丢失或丰度上发生很大的变化存有疑虑。针对以上存在的问题,通过置换合成和长距离PCR(LD-PCR)两种方法合成3个月的梭梭幼苗茎尖双链cDNA,EcoRI和MseI限制性内切酶双酶切后,用16对选择性扩增引物对两种cDNA进行cDNA-AFLP的指纹图谱分析。结果表明,置换合成和LD-PCR两种方法合成的cDNA指纹图谱中,分别有条带约495条和470条。其中,相同的条带共计433条,不同的条带分别有62条和37条,分别为各自合成方法总指纹数的12.5%和7.87%,相同的指纹信息达87%以上。这说明两种方法合成的cDNA存在着较大的差异,合成方法对cDNA合成质量的影响较大,为研究人员选用何种cDNA合成方法提供了借鉴。 史胜青 张守攻 李春秀 汪阳东 齐力旺关键词:CDNA-AFLP