李德岩 作品数:7 被引量:23 H指数:3 供职机构: 第二军医大学长征医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 化学工程 更多>>
1、人纤维粘连蛋白受体的纯化与鉴定 2、α<,5>β<,1>在正常及炎症性肝组织内的分布方式 李德岩基因工程制备重组人降钙素类似物 被引量:3 2000年 构建融合表达人降钙素类似物的工程菌 ,然后纯化 GST- h CTa- Leu融合蛋白 ,凝血酶酶切后 ,再经离子交换层析、脱盐 ,获得纯度大于 90 %的 h CTa前体 .对 h CTa前体的 C末端进行修饰 ,得线形 h CTa- NH2 ,再通过复性 ,获得了具有与天然人降钙素活性相当的 h CTa. 窦鸿 毛积芳 李德岩 王官将 蔡在龙 邹鲁峰 李杰 彭兴盛关键词:基因工程 酰胺化反应 Zf9对TGFβ_1的转录激活研究 被引量:1 2000年 目的 :探讨新发现的转录因子 Zf9对肝纤维化中重要的细胞因子 TGFβ1 启动子的转录激活作用。 方法 :以培养的NIH/3T3细胞、人成纤维细胞及人 Hep G2细胞为靶细胞 ,共转染 Zf9表达质粒 p CIneo Zf9与含 TGFβ1 启动子报告基因 CAT的重组体 ,测定报告基因 CAT的表达活性。结果 :在 3种细胞中的 Zf9对 TGFβ1 启动子都有反式激活作用。Zf9对 TGFβ1 的反式激活有明显剂量依赖性。结论 :转录因子 Zf9对 TGFβ1 基因有明显反式激活作用 ,这可能是包括肝纤维化在内的各种组织对损伤反应时 TGFβ1 增加的原因之一。 李德岩 高春芳 万伟东 伍严安关键词:转录因子 转化生长因子Β 共转染 肝纤维化 TGFβ1的转录调控及其对I型胶原启动子活性的影响 第一部分Zf9对TGFβ1启动的转录激活作用.在三种细胞Zf9对TGFβ1启动的转录激活作用,而且激活方式有明显剂量依赖性. 该实验证明转录因子Zf9对TGFβ1启动子确有反式激活作用,这种激活作用很可能是肝纤维化时TG... 李德岩关键词:启动子 反式激活 细胞转染 文献传递 肝星状细胞在肝损伤时激活的分子机制 被引量:4 1999年 概述肝损伤时肝星状细胞激活的分子机制,着重点为转录因子及细胞因子对激活的调控。 李德岩关键词:肝损伤 肝星状细胞激活 病理 改良EMSA法分析人α1(Ⅰ)胶原基因序列特异性DNA结合蛋白 被引量:6 2000年 目的 :分析人α1( )胶原基因 5′侧翼区具有较高启动调控活性序列的 DNA结合蛋白。方法 :以原代培养人瘢痕皮肤成纤维细胞为胶原产生细胞 ,采用限制性内切酶消化、DNA混合片段末端标记和增强化学发光的改良电泳迁移率改变实验(EMSA)分析人 α1( )胶原基因 5′侧翼区 - 2 6 8~ + 42 bp序列 DNA结合蛋白。结果 :在胶原产生细胞——人瘢痕成纤维细胞中存在 α1( )胶原基因 - 2 6 8~ + 42 bp序列的 DNA结合蛋白 ,其结合活性具有特异性 ,并能被 Sp- 1,NF- 1,NF- κB识别序列所竞争。结论 :改良 EMSA法可用于分析较长序列的 DNA结合蛋白 ,人 α1( )胶原基因 - 2 6 8~ + 42 bp序列中存在转录因子Sp- 1,NF- 1,NF- κB结合序列 ,这些转录因子结合位点可能与人 α1( )胶原基因 - 2 6 8~ + 42 bp序列的高启动活性有关。 高春芳 李德岩 万伟东 伍严安 王皓 孔宪涛关键词:DNA结合蛋白 TNF-α拮抗胰岛素样生长因子-1对人α1(Ⅰ)胶原启动子的激活 被引量:9 2000年 目的 :探讨 TNF-α对胰岛素样生长因子 - 1(IGF- 1)激活人α1( )胶原启动子的作用。 方法 :构建含不同长短α1( )胶原启动子序列与氯霉素乙酰基转移酶 (CAT)报告基因的重组体 p COL H1 0 .2 7,p COL H1 2 .5 ;用脂质体法瞬时转染至NIH3T3细胞和人皮肤成纤维细胞中 ,加入 IGF- 1或 (和 ) TNF-α,测定 CAT活性。 结果 :10 0 ng/ m l IGF- 1可使转染至NIH3T3细胞的 p COL H1 0 .2 7和 p COL H1 2 .5表达的 CAT活性分别增高至对照的 (5 .4± 0 .2 5 )倍与 (5 .8± 0 .3)倍 ,使转染至人皮肤成纤维细胞的这两个重组体表达的活性分别增高至对照的 (4 .5± 0 .2 2 )倍与 (4 .9± 0 .2 )倍。而 TNF-α能抑制 IGF- 1诱导的 p COL H1 2 .5活性。 结论 :TNF- α在转录启动水平抑制 IGF- 1对人 α1( )胶原基因表达的促进作用。 伍严安 李德岩 高春芳 万伟东 仲人前 孔宪涛关键词:器官纤维化 TNF-Α IGF-1