李微
- 作品数:4 被引量:12H指数:2
- 供职机构:湖南农业大学动物医学院更多>>
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- 猪圆环病毒2型ORF2基因的改造及在大肠杆菌中的高效可溶性表达
- PCV2-ORF2为702或705bp,编码病毒的衣壳蛋白(Cap),与PCV2的复制以及抗原性密切相关,是进行PCV2疫苗研究以及免疫活性研究的首选。最初衣壳蛋白在杆状病毒表达系统中成功表达并用于检测PCV2特异性抗体...
- 葛猛余兴龙李润成罗维李微李晶王亚向卫军
- 关键词:ORF2基因大肠杆菌可溶性表达基因改造
- 文献传递
- 猪圆环病毒2型Cap蛋白部分基因序列与大肠杆菌LTB成熟肽基因的融合表达及免疫原性研究被引量:6
- 2007年
- 为了获得猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV-2)衣壳蛋白(Cap)基因3’端396 bp的片段与大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位(LTB)成熟肽编码区融合基因的高效表达,并检验重组蛋白的免疫保护效果。以含PCV-2全基因组的pMDT PCV-2质粒为模板,用PCR的方法扩增PCV-2 Cap基因,并将其克隆到pET28a(+)中,构建得到pET-Cap质粒,利用EcoRⅠ和HindⅢ双酶切切下Cap基因3’末端396 bp的片段,插入到pET-LTB原核表达质粒LTB基因的3’末端,从而构建pET-LTB△Cap原核表达质粒,将其转化大肠杆菌BL21(DE3)pLysS后,用IPTG诱导重组菌,用SDS-PAGE电泳和Western blot检测诱导物。表达产物经初步纯化后用昆明系小白鼠做免疫保护实验。结果表明:pET-LTB△Cap重组融合表达质粒在大肠杆菌中实现了高效表达,融合蛋白分子量约为29Ku,表达量约占菌体蛋白的36.67%,融合蛋白能被PCV-2阳性血清识别。攻毒后,所有小鼠临床表现正常。用PCR检测有1/8的免疫小鼠感染了PCV-2,而对照组8只小鼠都感染了PCV-21。PCV-2 Cap基因3’端396 bp的片段与LTB基因融合能实现高效表达,表达产物免疫的小白鼠可抵抗PCV-2的攻击此研究为PCV-2基因工程疫苗的研究奠定了基础。
- 侯强红余兴龙李微李润成罗维刘浩尹恒刘忠华
- 关键词:猪圆环病毒2型免疫原性
- 猪圆环病毒2型ORF2基因的改造及在大肠杆菌中的高效可溶性表达
- PCV2-ORF2为702或705bp,编码病毒的衣壳蛋白(Cap),与PCV2的复制以及抗原性密切相关,是进行PCV2疫苗研究以及免疫活性研究的首选。最初衣壳蛋白在杆状病毒表达系统中成功表达并用于检测PCV2特异性抗体...
- 葛猛余兴龙李润成罗维李微李晶王亚向卫军
- 文献传递
- 猪圆环病毒2抗体水平的监测及意义被引量:6
- 2009年
- 猪圆环病毒2(Porcinecircovims2,PCV2)与猪群中发生的许多疾病密切相关,诸如断奶仔猪多系统衰竭综合症(Postweaningmultisystemwastingsyndrome,PMWS)、猪皮炎肾炎综合症(Porcinedermatitisandnephropathysyndrome,PDNS)、母猪繁殖障碍、增生性肠炎、仔猪先天性震颤、猪呼吸道病复合症等,其中以PMWS最为常见,PMWS主要引起猪渐进性消瘦、腹泻、呼吸道症状、皮肤苍白或出现黄疸、生产性能降低。
- 葛猛杨阳蒋重合李微李润成罗维黎满香余兴龙
- 关键词:猪圆环病毒抗体水平多系统衰竭综合症母猪繁殖障碍PMWS增生性肠炎