李咏梅
- 作品数：23 被引量：69H指数：5
- 供职机构：天津医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金天津市自然科学基金天津市卫生局科技基金更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学生物学理学更多>>
- 血管紧张素转换酶基因多态性与2型糖尿病肾病的关系被引量：8
- 2005年
- 目的研究血管紧张素转换酶(ACE)基因多态性与2型糖尿病肾病(DN)的关系。方法采用以医院为基础的配对病例鄄对照研究方法,病例与对照的配比条件为年龄和性别。对101对研究对象进行了研究。应用聚合酶链反应(PCR)及琼脂糖凝胶电泳方法进行ACE基因多态性分析。结果ACE基因第16内含子的Alu序列插入/缺失(I/D)多态性与DN的发生之间有统计学关联,D等位基因的出现使DN发生的危险增加,与II基因型相比,基因型为ID、DD的2型糖尿病患者并发DN的OR值分别为2.419(95%可信区间1.180～4.959)和3.417(95%可信区间1.608～7.260)。结论ACE基因D等位基因的出现增加发生DN的危险性。
- 李咏梅齐秀英
- 关键词：血管紧张素转换酶基因多态性糖尿病肾病
- 柠檬提取物抗小鼠柯萨奇B_(3m)病毒性心肌炎的研究被引量：5
- 2008年
- 目的:观察柠檬提取物对实验性小鼠急性柯萨奇B3m病毒性心肌炎的影响。方法:选取4～6周龄雄性Balb/C鼠腹腔注射柯萨奇病毒B3m株(CVB3m)建立实验性小鼠急性病毒性心肌炎模型。小鼠随机分为正常对照组、模型对照组及3个实验组(实验Ⅰ～Ⅲ组),每组10只。模型对照组和各实验组小鼠腹腔注射病毒1h后灌胃给药,实验Ⅰ～Ⅲ组分别灌服20、60、180倍稀释的柠檬提取液,模型对照组灌服等体积生理盐水,连用7d,正常对照组自然喂养,于第14天处死小鼠。观察各组小鼠心脏质量与体质量比(HM/BM)及心肌HE染色切片病理变化,并测定血清心肌酶含量。结果:(1)各实验组HM/BM较模型对照组明显降低(P<0.05),实验Ⅰ组、Ⅱ组心肌病理积分较模型对照组明显降低(P<0.05)。(2)实验Ⅰ组、Ⅱ组血清心肌酶活性较模型对照组明显降低(P<0.05或P<0.01)。结论:柠檬提取物对实验性小鼠急性柯萨奇B3m病毒性心肌炎具有一定的治疗作用。
- 李咏梅李晓眠
- 关键词：柯萨奇病毒感染心肌炎小鼠
- 诺如病毒病毒样颗粒的表达及其与Caco-2细胞的结合活性研究被引量：2
- 2013年
- 目的在杆状病毒表达系统转染的昆虫SF-9细胞中表达诺如病毒（NorovirUSes，NoV）的衣壳蛋白VPl，并芎令证其与Caco-2细胞的结合活性。方法利用杆状病毒表达系统转染的昆虫SF-9细胞进行诺如病毒VPl蛋白表达，用蔗糖密度梯瞍超速离心方法纯化，采用Westernblot鉴定表达产物，采用流式细胞术检测NoV病毒样颗粒（Virus-likeparticles，VLPs）与Caco-2细胞的结合活性。结果重组质粒转染细胞表达产物经蔗糖密度梯度超速离心后进行SDS~PAGE，在分子质量单位55~70ku之间有3条蛋白带，与预期重组蛋白NoV—VI-Ps大小相符；Westernblot分析各蛋白组分均能被兔抗NoV多抗血清识别；流式细胞仪分析届示，加入重组蛋白NoV—VI—Ps后荧光信号较阴性对照组显著增强，表明表达的重组蛋自NoV—VI．Ps能够与Caco-2结合，且3个组分的结合能力不同（P〈i0·05），以组分5与Caco-2细胞结合的能力最强（P〈O．05）。结论NoVVI．Ps表达成功，并证明NoV-VI—Ps具有与Caco2细胞结合活性，为N。V疫苗的开发和防治药物的研制奠定了基础。
- 杨柏财黑凯文邱依然李咏梅
- 关键词：诺如病毒杆状病毒表达系统病毒样颗粒CACO-2细胞
- 加亚嘉西科逆转录病毒研究进展
- 2009年
- 从加亚嘉西科逆转录病毒（JSRV）的基因组、JSRV的致瘤信号传导途径、JSRV与宿主共进化方面综述了JSRV的研究进展。JSRV引起的羊肺腺瘤（SPA）与人的细支气管肺泡癌（BAc）极相似，通过对SPA的研究，不仅为BAC早期诊断及预防该病提出新方法，而且为揭示BAC的分子发病机制及探索其基因治疗提供新思路。
- 杜文才朱泽张晶李咏梅李伟霞
- 关键词：绵羊肺腺瘤病进化
- VEGF-C诱导宫颈癌Hela细胞Bcl-2、cyclinD1的表达被引量：8
- 2014年
- 目的研究VEGF-C对体外培养的宫颈癌Hela细胞增殖和凋亡的分子机制。方法应用重组人VEGF-C蛋白体外刺激宫颈癌Hela细胞,MTT法检测细胞增殖、流式细胞仪检测细胞周期和凋亡、Western Blotting检测增殖凋亡相关基因Bcl-2、cyclin D1蛋白水平的变化。结果 10、20、50 ng/μl VEGF-C处理后,细胞增殖指数分别为(1.00±0.03)、(1.25±0.05)、(1.55±0.08)、(2.13±0.08),呈剂量依赖性升高(P<0.05)。细胞周期S期比率呈剂量依赖性升高(P<0.05),分别为(30.91±0.09)%、(37.95±0.27)%、(45.05±0.40)%、(64.26±0.20)%;细胞凋亡率呈剂量依赖性降低(P<0.05),分别为(12.4±0.3)、(11.4±0.2)、(9.6±0.15)、(5.5±0.25)。Bcl-2、cyclin D1蛋白表达呈剂量依赖性升高。结论外源性VEGF-C通过细胞内信号的传递,诱导cyclin D1的表达,使肿瘤细胞S期加快,促进细胞周期的进程,来促进Hela细胞增殖;诱导Bcl-2的表达,抑制凋亡。
- 魏璇杜雪李咏梅赵曼茵马雪梅杜秀英张一兵
- 关键词：VEGF-CBCL-2CYCLIN
- 血管紧张素转换酶（ACE）基因多态性及其它因素与2型糖尿病肾病关系的配对病例对照研究
- 目的：探讨ACE基因第16内含子的Alu序列插入／缺失/(I／D/)多态性及其它因素与2型糖尿病肾病/(DN/)的关系。
方法：采用以医院为基础的配对病例对照研究方法，对101对研究对象进行了...
- 李咏梅
- 文献传递
- 长非编码RNA相互作用蛋白质组的质谱检测
- 人类基因组中约有75%的基因可以转录成RNA,其中大部分转录本都是以非编码RNA的形式存在的。长非编码RNA（lncRNA）一般长度大于200个核苷酸,这类RNA不翻译成蛋白质,而是以RNA的形式在多种层面上发挥生理功能...
- 陈瑞冰王春晴闫帅刘赟庄昊李咏梅
- 关键词：定量蛋白质组学
- 文献传递
- 长非编码RNA与蛋白质相互作用的质谱分析
- 长非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)一般长度大于200个核苷酸,这类RNA不翻译成蛋白质,而是以RNA的形式在多种层面上发挥生理功能[1-2]。近十年,lncRNA逐步成为生物研究中最为...
- 杨柏财肖明明黑凯文高华君李咏梅陈瑞冰
- 关键词：SILAC液质联用
- HSV-1的microRNA-LAT基因修饰人骨髓间充质干细胞的体外研究被引量：1
- 2008年
- 人骨髓间充质干细胞(HMSCs)具有强大的多向分化潜能,能为组织移植和体外基因传递载体.单纯疱疹病毒1型(HSV-1)不仅具有嗜神经元性,而且对HMSCs也具有很强亲嗜性,可作为HMSCs的基因修饰载体,主要通过其自身携带的microRNA-LAT发挥抑制凋亡作用.本研究构建针对microRNA-LAT的特异性茎环结构的逆转录引物,并用特殊探针的real-time RT-PCR方法检测HMSCs细胞质中成熟microRNA-LAT的相对定量水平.采用顺铂诱导对照法观察HSV-1对HMSCs的作用.通过观察HMSCs细胞形态和流式细胞仪检测细胞凋亡率,评测HSV-1引起的HMSCs抗凋亡功能;同时采用RNAi方法,化学合成TGF-β信号传导通路中SMAD3及TGF-β1靶点的siRNA和microRNA-LAT siRNA.从基因mRNA,microRNA和蛋白质水平,分别采用RT-PCR,real-time RT-PCR和Western blotting方法,检测HMSCs中microRNA-LAT和SMAD3及TGF-β1表达水平及其相互关系.结果表明,与单纯顺铂诱导对照组相比,HSV-1组和microRNA-LAT组HMSCs凋亡细胞数减少,细胞凋亡率降低(P<0.05),具有抗凋亡作用;在TGF-β信号传导通路中,HSV-1组和microRNA-LAT组TGF-β1与SMAD3靶点基因在mRNA水平及蛋白水平的表达量均观察到一定程度降低,且降低水平与采用RNAi法的SMAD3组和TGF-β1组相类似.Real-time RT-PCR结果显示,与空白对照组相比,顺铂组HMSCs细胞质中成熟microRNA-LAT mRNA水平有所降低(P<0.05).据此,HSV-1及其microRNA-LAT可敲除SMAD3和TGF-β1基因,下调TGF-β信号传导通路表达而对顺铂诱导的HMSCs凋亡有拮抗作用.本研究结果证明,HSV-1自身携带的microRNA-LAT对HMSCs细胞TGF-β信号传导通路中的SMAD3和TGF-β1具有精细调节和基因修饰作用,使HMSCs具有抗凋亡功能,并且HSV-1可作为针对HMSCs的特殊基因修饰候选载体.
- 张晶李咏梅杜文才李光明李伟霞朱泽
- 关键词：人骨髓间充质干细胞单纯疱疹病毒基因调节抗凋亡
- Pim-3慢病毒质粒构建及其表达鉴定
- 2014年
- 目的构建Pim-3慢病毒质粒,鉴定其在卵巢癌SKOV3细胞中基因及蛋白水平的表达。方法 RT-PCR法提取Pim-3 cDNA,经T-A克隆及双酶切将其与慢病毒表达载体pCDH-EF1-MCS-T2A-copGFP重组;酶切鉴定及基因测序后,将阳性重组质粒导入病毒包装细胞293T中;收集病毒上清液转染SKOV3细胞,荧光显微镜下观察转染情况,应用RT-PCR及Western blot法分别检测Pim-3 mRNA及其蛋白。结果 RT-PCR法获得Pim-3基因,重组质粒酶切后片段大小及基因测序结果显示pCDH/Pim-3重组质粒构建成功。将感染重组质粒及空载体的293T细胞生产的病毒上清分别感染SKOV3细胞,感染重组质粒的SKOV3细胞中Pim-3 mRNA及蛋白表达水平均高于空载体细胞。结论成功构建了pCDH/Pim-3重组慢病毒质粒,建立了Pim-3高表达SKOV3瞬转细胞模型,为探讨Pim-3在卵巢癌发生、发展中的作用及机制奠定实验基础。
- 赵曼茵李咏梅岳天孚杜雪黑凯文邱依然杨柏财
- 关键词：卵巢癌PIM-3苏氨酸激酶慢病毒载体
