李俊宏
- 作品数:10 被引量:10H指数:2
- 供职机构:南通大学附属医院更多>>
- 发文基金:江苏省“六大人才高峰”高层次人才项目国家自然科学基金江苏省医学重点人才培养基金更多>>
- 相关领域:医药卫生文化科学生物学更多>>
- 脐血CD34^+细胞分离方法比较被引量:1
- 2008年
- 目的:比较不同方法分离脐血单个核细胞(MNC)及纯化CD34+细胞效果。方法:采集脐血48份,在室温下保存12、24、48小时,分别用密度离心法和羟乙基淀粉(HES)沉淀法分离脐血MNC,再用免疫磁珠法纯化CD34+细胞,以台盼蓝拒染法检测细胞存活率。结果:脐血在室温下保存48小时分离MNC和CD34+细胞数最多,其次为12小时,在24小时分离所得最低(P<0.05);HES沉淀法较密度离心法分离所得MNC和CD34+细胞数明显增多(P<0.05);6组细胞存活率差异无统计学意义(P>0.05);免疫磁珠法纯化CD34+细胞可达(88±5)%的纯度。结论:HES沉淀法优于密度离心法,且48小时分离为优,免疫磁珠法纯化CD34+细胞可提高纯度;各种方法对细胞存活率无明显影响。
- 李俊宏刘红林赠华姜胜华朱云鸿
- 关键词:胎血CD34^+造血干细胞细胞分离
- 恶性血液病患者RNPC1 mRNA的表达及意义
- 2014年
- 目的:研究RNPC1基因在白血病、淋巴瘤等恶性血液病患者中的表达水平及其在恶性血液病发生、发展中的意义。方法:采用逆转录聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)法检测32例难治的白血病、淋巴瘤患者和10例健康者骨髓单个核细胞中RNPC1 mRNA水平的表达。采用χ2检验、四格表的确切概率法进行统计分析,比较各组RNPC1基因阳性率的差异。结果:RNPC1基因在恶性血液病患者中有较高水平的表达,明显高于对照组(P<0.05)。白血病组与淋巴瘤组之间的差异无统计学意义(P>0.05)。结论:RNPC1基因过度表达在恶性血液病的发病机制中起重要的作用。
- 唐青青刘红丁润生孙峰尹红陆伟李俊宏刘海燕陈秀芳
- 关键词:恶性血液病逆转录聚合酶链反应
- 再生障碍性贫血患者血清对脐血CD34^+细胞凋亡的影响
- 2009年
- 多项研究证实,再生障碍性贫血(AA)患者骨髓造血干细胞的数量减少与其过度凋亡有关,我们在过去的研究中曾证实,AA患者血清可诱导CD34^+细胞凋亡。Akt,又称蛋白激酶B(PKB),与多种细胞活动、物质代谢调节,尤其是与抑制细胞凋亡、促进细胞生存有密切关系,而Akt磷酸化后被激活是其发挥各种生物效应的重要前提。我们将进一步观察AA患者血清对脐血CD34^+细胞凋亡及Akt磷酸化(pAkt)的影响,探索pAkt在AA发病机制中的可能作用。
- 李俊宏刘红林赠华姜胜华丁润生陆伟蔡奕峰宋国齐
- 关键词:再生障碍性贫血患者CD34^+细胞凋亡脐血骨髓造血干细胞
- 医学人文关怀在内科操作实践教学中的应用被引量:2
- 2015年
- 目的 :尝试结合人文关怀的教学方法,提高内科操作教学的效果。方法 :通过采集病史,医患沟通等方式加强医患的感情;带教老师进行规范操作演示,讲解重点和难点;对学生进行分层次学习,以好带差,提高大家学习积极性。结果:在内科操作考核中,参加研究的49例学生中,有46例(93.9%)考核成绩达到80分以上,39例(79.6%)考核成绩达到90分以上。结论:贯穿医疗活动中的医学人文关怀为内科操作教学提供了良好的工作氛围,明显调动了学生的主观能动性,提高了教学效果,更重要的是培养了学生的现代医学人文精神。
- 杨力王信峰黄红铭李俊宏徐瑞容刘红蔡奕峰
- 关键词:医学人文关怀内科学教学
- 非重型再生障碍性贫血患者血清对32D细胞凋亡及Stat3蛋白磷酸化的影响被引量:2
- 2011年
- 目的探讨非重型再生障碍性贫血(NSAA)患者血清对32D细胞凋亡及细胞内信号转导子和转录激活子(Stat3)蛋白磷酸化的影响。方法采集12例NSAA患者(NSAA组)和12例正常健康体检者(对照组)血清,分别孵育小鼠32D细胞后进行细胞计数并检测细胞存活率、凋亡率及细胞内Stat3蛋白的磷酸化水平。结果血清孵育12、24、36、48 h后,NSAA组32D细胞内的Stat3蛋白磷酸化水平均高于对照组,以孵育24 h后差异最大(P<0.05)。孵育24 h后,NSAA组较对照组细胞计数显著减少(P<0.05),细胞存活率低于对照组但无统计学意义,而细胞凋亡率显著高于对照组(P<0.05)。结论 NSAA患者的血清在体外作用24 h后可诱导32D细胞凋亡并上调Stat3蛋白磷酸化水平,Stat3蛋白的磷酸化增多可能参与NSAA患者血清诱导32D细胞凋亡的信号传导过程。
- 林赠华刘红姜胜华陆伟宋国齐李俊宏
- 关键词:细胞凋亡
- 慢性淋巴细胞白血病患者的临床和分子遗传学研究被引量:2
- 2022年
- 目的:探讨荧光原位杂交技术(fluorescence in situ hybridization,FISH)在检测慢性淋巴细胞白血病(chronic lymphocytic leukemia,CLL)中的应用及与患者临床指标和特征的相关性,并分析其判断患者预后的价值。方法:收集2013年6月—2020年10月初诊于南通大学附属医院CLL患者74例,男43例,女31例。收集患者相关的临床特征、实验室检查、骨髓涂片、免疫分型及FISH结果等资料。分析FISH检测的分子遗传学异常与患者的性别、年龄、临床Binet分期、Rai分期及相关实验室检查[如外周血淋巴细胞绝对值计数、血红蛋白、血小板、β2-微球蛋白(β2-microglobulin,β2-MG)、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)水平]的相关性。结果:(1)CLL患者FISH检测至少具有1种分子遗传学异常者为56例,发生率为75.68%。(2)各种遗传学异常情况与患者性别、年龄无相关性(P>0.05),与外周血淋巴细胞绝对值计数、血红蛋白、血小板、β2-MG、LDH的表达水平无明显相关性(P>0.05)。(3)就Binet分期而言,12号染色体三体(+12)仅在B期和C期患者中检出,在Binet分期中的分布差异具有统计学意义(χ^(2)=4.696,P=0.041);C期的生存时间明显短于A和B期(χ^(2)=14.242,P=0.001)。就改良的Rai分期而言,ATM基因缺失仅在高危组检出,且此种分布差异具有统计学意义(χ^(2)=5.40,P<0.001);低中危组的生存时间明显优于高危组(χ^(2)=12.393,P<0.001);单纯del(13q)核型异常的CLL患者生存时间明显长于伴有其他核型异常及复杂核型的患者(χ^(2)=8.138,P=0.017)。结论:CLL为惰性疾病,但其疾病进展和临床预后具有高度异质性。FISH检测结果联合疾病临床分期可更好地预测患者预后。
- 孙峰温慧灵宋国齐曹鑫李俊宏陆伟杨力刘红姜胜华
- 关键词:慢性淋巴细胞白血病荧光原位杂交技术分子遗传学
- IFN-γ对AKT基因激活的32D细胞的影响及作用机制探讨被引量:2
- 2010年
- 目的 观察IFN-γ对AKT基因激活的小鼠髓系祖细胞系(32D细胞)的影响,探讨IFN-γ对造血细胞增殖和凋亡双向调节的可能机制.方法 用质粒转导技术使32D细胞高表达AKT基因,以IFN-γ作用32D细胞,用水溶性四氮唑(WST-1)细胞增殖检测法检测细胞增殖水平,流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blot法检测磷酸化胞外信号调节激酶(p-Erk)1/2、信号转导和转录活化蛋白(Stat)3、p-Stat3的表达.结果 ①低浓度(100 U/ml)IFN-γ能促进32D细胞增殖、抑制凋亡,高浓度(1000 U/ml)IFN-γ则相反(100 U/ml处理24 h细胞密度为0.238±0.010;而1000 U/ml处理后为0.106±0.010,未处理组为0.170±0.010).②低浓度IFN-γ可使32D细胞内Stat3磷酸化水平升高(1124±13),高浓度时减低(601±13).③转染激活型AKT质粒的32D细胞(激活型细胞)较其他组细胞的增殖率显著增高、凋亡率明显降低[分别为0.287±0.010、(9.57±0.17)%](P<0.05).④激活型32D细胞较其他组细胞p-Erk1/2蛋白表达明显减低(P<0.05).结论 ①IFN-γ对32D细胞有双重作用,即低浓度促进细胞增殖、抑制凋亡,高浓度抑制细胞增殖、促进凋亡.②IFN-γ对32D细胞的双重效应可能是通过Stat3的磷酸化水平的增减实现的.③激活型AKT能明显促进32D细胞增殖、抑制凋亡,IFN-γ可通过调控AKT来调节细胞增殖及凋亡.④AKT激活后可以抑制Erk信号通路,可能是通过抑制Rafl的修饰实现的.
- 童来根刘红林赠华李俊宏姜胜华陈秀芳黄红铭陆伟周鹭
- 关键词:干扰素细胞增殖
- 重型再生障碍性贫血患者血清对小鼠造血干/祖细胞株32D细胞凋亡和Stat3、Stat5分子表达的影响被引量:3
- 2009年
- 我们以往的研究证实再生障碍性贫血(AA)特别是重型AA(SAA)患者血清中存在造血抑制物,其主要成分为IFN—γ,可通过Fas途径促进CD34+细胞凋亡,从而导致AA的发病。但其作用的分子生物学机制及信号通路目前仍不清楚。信号转导子和转录激活子(signaltransducerandactivatoroftranscription,Stat)家族是一类存在于细胞质内与酪氨酸磷酸化信号通道偶联的双功能蛋白,是细胞内信号转导过程中的关键分子,其中的Stat3和Stats(有Stat5a和Stat5b两种表型)在造血细胞增殖与分化、凋亡的过程中起到十分重要的作用。我们以正常小鼠骨髓多能造血干/祖细胞株32D细胞为靶细胞,探讨Stat3、Star5分子在SAA患者造血细胞过度凋亡中的作用,进一步阐明SAA发病的分子生物学机制。
- 林赠华刘红李俊宏姜胜华丁润生陆伟蔡奕峰宋国齐
- 关键词:STAT5BSTAT3细胞凋亡分子表达细胞株造血干
- 不同储存条件下二磷酸腺苷对血小板聚集率的影响
- 2013年
- 目的 :比较不同储存条件下二磷酸腺苷(adenosine diphosphate,ADP)对血小板聚集率的影响。方法 :随机采集50例健康志愿者外周血,将每例志愿者的富血小板血浆(platelet-rich plasma,PRP)分为4组,采用PRP透射比浊法,分别加入高浓度于-20℃保存0、6、12、18个月的ADP,观察血小板聚集率的变化;另再随机收集50例健康志愿者外周血,将每例志愿者的PRP分为四组,分别加入低浓度于4℃保存0、1、15、30 d的ADP,观察血小板聚集率的变化。结果:高浓度于-20℃保存0、6、12、18个月的ADP诱导的血小板聚集率之间差异无统计学意义(P>0.05);低浓度于4℃保存0、1、15、30 d的ADP诱导的血小板聚集率之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论:ADP可高浓度保存于-20℃18个月,低浓度保存于4℃30 d,而不影响血小板聚集率。
- 李俊宏刘红刘海燕钱娟
- 关键词:血小板血小板聚集二磷酸腺苷
- 再生障碍性贫血患者血清对脐血CD34+细胞凋亡及其pAkt表达的影响
- 目的:比较不同方法分离脐血CD34+细胞的效果,并观察再生障碍性贫血患者血清对脐血CD34+细胞凋亡及其pAkt表达的影响。方法:1.采集脐血48份,室温(RT)下保存12、24、48小时,分别用密度离心法和羟乙基淀粉(...
- 李俊宏
- 关键词:胎血再生障碍性贫血凋亡PKB/AKT
- 文献传递