朱剑光 作品数:9 被引量:60 H指数:6 供职机构: 西北大学生命科学学院西部资源生物与生物技术教育部重点实验室 更多>> 发文基金: 陕西省自然科学基金 陕西省教育厅科研计划项目 更多>> 相关领域: 生物学 农业科学 医药卫生 更多>>
HBsAg基因转化番茄及其表达 本实验将整合有乙肝表面抗原主蛋白基因/(HBsAg/)的植物表达载体pCAMBIA1301通过根癌农杆菌介导转化番茄,诱导出丛生芽并筛选转基因植株,检测目的基因的转化情况和表达情况。实验主要取得了以下进展:
... 朱剑光关键词:乙肝表面抗原 番茄 转基因植物 口服疫苗 文献传递 葡萄白藜芦醇合成酶基因的克隆 被引量:12 2004年 为了构建白藜芦醇合成酶 RS 基因的克隆载体,用PCR技术从葡萄叶片总DNA中扩增出RS基因全长,然后将其重组到克隆载体中.通过酶切对重组质粒进行了鉴定和测序,结果表明,RS基因已经正确克隆至pUC19中,将重组质粒转入大肠杆菌里,使RS基因能够在大肠杆菌里保存并且大量扩增,为RS基因构建表达载体表达白藜芦醇合成酶奠定了基础. 金晓丽 尉亚辉 魏彦飞 朱剑光 郭芝光关键词:白藜芦醇 基因克隆 花生慢生根瘤菌的分离与鉴定 被引量:17 2006年 目的:从野生花生的新鲜根瘤中分离纯化花生慢生根瘤菌。方法:将野生型花生的新鲜根瘤灭菌后捣碎制成悬浮液,通过稀释涂布、划线和贴片三种方法,在YMA结晶紫和YMA刚果红选择培养基上逐步分离纯化得到单菌落。结果:三种方法均分离得到表面性状一致的单菌落,其中用稀释5^3-5^4倍的悬浮液划线分离的效果最好。所得菌株经理化性质和回接试验鉴定为慢生根瘤菌,从而为接着的花生根瘤菌及其结瘤基因的研究提供了基础。 朱剑光 尉亚辉 吴艺舟关键词:慢生根瘤菌 花生 分离纯化 PCR鉴定 大规模葡萄细胞培养生产白藜芦醇 尉亚辉 栾龙 李小平 马保练 刘兴旺 郭斌 金晓丽 郭芝光 朱剑光 白藜芦醇具有抗菌、抗肿瘤、抗脂质过氧化、预防心血管疾病、抗血小板凝集、降血脂和抗诱变等作用,是一种新的抗肿瘤和预防心血管疾病的有效成分。葡萄细胞培养生产白藜芦醇技术是在我们长期研究的基础上,提出植物次生代谢产物形成分为可...关键词:关键词:白藜芦醇 细胞培养 葡萄 白藜芦醇合酶基因的克隆及对毕赤酵母的转化 被引量:6 2006年 目的建立白藜芦醇合酶基因的毕赤酵母表达系统。方法通过PCR、限制性内切酶消化、连接、电激等方法,构建表达载体,转化毕赤酵母GS115。结果从葡萄基因组DNA中扩增得到了 1 200 bp目的基因,并克隆至pBS-T栽体;成功构建了表达载体pPIC3.5K/RS;目的基因成功整合进毕赤酵母GS115基因组中。测序及PCR鉴定证明,白藜芦醇合酶基因的毕赤酵母表达系统建立成功。结论所得方法无需高质量的RNA,从而降低了试验条件,达到了快速简便的目的。 郭芝光 尉亚辉 刘蕾 张儒 朱剑光关键词:白藜芦醇 白藜芦醇合酶 基因克隆 毕赤酵母表达系统 转基因番茄表达口服乙肝疫苗 被引量:13 2007年 将构建好的植物表达载体pCAMBIA1301/HB转化到根癌农杆菌LBA4404中,并通过农杆菌介导转化番茄。所得再生植株经PCR和Southern杂交鉴定确认成功整合了HBsAg(hepatitis B surface antigen)基因,SDS-PAGE显示蛋白表达与非转化植株相比有明显差异,ELISA检测和Western blotting证实HBsAg已在转化植株中表达,分子量约为24kD。 郝浩永 尉亚辉 朱剑光 孙杰 王娅宁 荆二勇 张变玲 薛柯关键词:口服疫苗 乙型肝炎表面抗原 番茄 转基因植物 花生白藜芦醇合酶基因cDNA的克隆及植物表达载体的构建 被引量:6 2005年 为得到含有白藜芦醇合酶cDNA(RS cDNA)并能表达白藜芦醇(Res)的转基因植物,以花生为材料,从其根部提取基因组DNA,并以其为模板,利用引物悬挂延伸PCR法扩增得到大小约1200bp的片段,将这个片段连接到克隆载体PBS-T上进行测序,测序结果证明,此片段就是花生的RS cDNA。将此片段再正向插入到植物表达载体PBI121的CaMV35s启动子和NOS终止子之间,对重组子进行筛选与鉴定,证明花生的RS cDNA已经正确插入PBI121中,成功的构建了植物表达载体PBI121L。 刘蕾 尉亚辉 张儒 荆西刚 郭芝光 朱剑光关键词:白藜芦醇合酶 重组子 植物表达载体 猪干扰素-α基因的克隆及其植物表达载体的构建 被引量:1 2006年 目的:克隆与分析猪干扰素-α(INF-α)基因,构建猪干扰素基因的高效植物表达载体。方法:根据NCBI中DQ248997序列设计引物,以猪的总DNA为模板,PCR扩增出猪的INF-α基因,克隆至pBS-T载体后进行序列分析,构建猪干扰素基因的植物表达载体。结果:实验所克隆序列经Blastn比对,98%的核酸序列相同,98%的蛋白质序列相同,3个非功能性氨基酸与基因库中序列不一致,推测为猪INF-α的一个亚型。构建的2个植物表达载体经BamHⅠ/SacⅠ限制性内切酶消化,均可得到570bp的目的基因。结论:成功克隆了猪的INF-α基因,并构建出含猪INF-α基因的高效植物表达载体pBI121/INF和pCAMBIA1301/INF。 孙杰 尉亚辉 郭芝光 朱剑光关键词:分子克隆 KOZAK序列 植物表达载体 乙型肝炎表面抗原基因转化花生及其表达 被引量:6 2006年 构建了乙肝表面抗原主蛋白基因(SHBs)的植物表达载体,通过农杆菌介导转化花生(Arachishypogaea)并利用潮霉素筛选出抗性苗,经PCR和Southern杂交鉴定转基因植株;取植株的蛋白粗提液进行ELISA检测,结果表明,SHBs能在花生中表达,且具有免疫原性,其在新鲜叶片中的表达量约为2.41μg.g-1鲜重,占总可溶性蛋白的0.033%。 朱剑光 尉亚辉 郭芝光 吴艺舟 郝浩永 孙杰关键词:乙肝表面抗原 花生 转基因植物 口服疫苗