成敏
- 作品数：15 被引量：112H指数：6
- 供职机构：四川大学华西医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金美国中华医学基金会项目国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 低剪应力作用下内皮细胞的基因差异表达被引量：4
- 2004年
- 用含 4 0 96点的 c DNA芯片高通量、大范围、高效率地研究人脐静脉内皮细胞受剪应力 (4.2 0 dyne/cm2 ,2 h)作用后基因的表达情况 ,以期了解低剪应力短时间作用对脐静脉内皮细胞基因表达的影响。结果显示 :低剪应力作用内皮细胞后与未行剪应力处理的对照组比较 ,共有 10 8条基因 (5 3条基因表达增加 ,5 5条基因表达下降 )出现差异表达 ,约占芯片上基因总数的 0 .0 2 6 %。其中抑癌基因、与脂质代谢的有关基因明显上调 ,而与应激反应、细胞代谢的有关基因的表达则明显降低。本实验为寻找内皮细胞剪应力诱导表达的新基因提供了新的思路。
- 成敏张文胜陈槐卿吴文超黄华
- 关键词：内皮细胞基因差异基因表达基因芯片
- 动脉粥样硬化进程中血脂、血流动力学指标和血管内膜的动态变化被引量：31
- 2005年
- 为了建立兔高脂血症及动脉粥样硬化 (AS)斑块模型 ,观察 AS斑块形成的动态变化 ,采用高胆固醇饲料喂养法与免疫反应损伤法结合制备兔高脂血症及 AS斑块模型。将 4 5只新西兰兔分成对照组和高脂血症模型组 ,按照建模时间 4、8、12周 ,又将对照组和模型组分别分为 3组。分别于 4、8、12周 ,处死对照组和高脂血症模型组 ,测定了血脂、血流动力学指标 ,观察了血管内膜的变化。结果表明 :(1)高脂饲养 4、8、12周后模型组兔血清中的TC含量显著升高 ,TG含量在高脂饲养 8周开始有明显升高 ,HDL- C的含量比对照组 HDL- C含量要高 ,但是随造模时间有下降的趋势 ,L DL- C的含量随造模时间显著升高 ;(2 )血液黏度在高脂模型 12周时 0 .5 12 S- 1和 5 .96 S- 1下 ,与对照组比较增高显著 ,颈总动脉血流量和收缩压 (BSP)在造模时间 8、12周时比对照组有显著增加 ,而血浆黏度和血管外径随造模时间变化不明显 ;(3)石蜡切片 HE染色 ,光学显微镜下观察 ,正常对照组血管内膜光滑 ,4周模型组内膜有轻微增厚 ,有少量含脂质的泡沫细胞 ,8、12周模型组内膜均有明显增厚 ,并有多层含脂质的泡沫细胞。透射电镜观察 ,内皮下有沉积形成的脂质空泡。(4)采用免疫组化的方法鉴定了 AS斑块处平滑肌细胞源性的泡沫细胞。结果显示 :血脂不?
- 聂永梅成敏陈槐卿唐艳娟吴巧凤张怡刘小菁
- 关键词：动脉粥样硬化血脂血流动力学血管内膜血液黏度
- 低切应力作用下内皮细胞的基因差异表达及雌激素的干预作用
- ＜正＞女性绝经后冠心病发病率明显升高,采用雌激素替代疗法可减少冠心病发病率约50%,提示雌激素对心血管有保护作用。现代“损伤反应学说”认为,血管内皮细胞损伤是发生动脉粥样硬化（Atherosclerosis,AS）的始动...
- 成敏张文胜陈槐卿吴文超黄华
- 文献传递
- 低剪应力作用下内皮细胞的基因差异表达及雌激素的干预作用
- 2005年
- 用含4096点的cDNA芯片研究单纯低剪应力(4.20dync/cm2,2h)作用下或生理浓度17β雌二醇孵育48h后再经相同条件的低剪应力作用后内皮细胞基因的差异表达。结果发现:与未行剪应力处理的对照组相比,单纯低剪应力组共有108条基因(53条基因表达增加,55条基因表达下降)出现差异表达,约占芯片上基因总数的2.6%。其中抑癌基因、与脂质代谢的有关基因明显上调,而与应激反应、细胞的代谢的有关基因的表达则明显降低。先用雌激素孵育再行低剪应力处理的内皮细胞与未经任何处理的对照组比较,共有384条基因(226条基因表达增加,158条基因表达下降)出现差异表达,约占芯片基因总数的9.4%。在表达上调的基因中其转录产物涉及PGI2合成、单核巨噬细胞的吞噬作用等;在表达下调的基因中其转录产物涉及纤维蛋白原的降解、原癌基因产物的生成等。
- 成敏张文胜陈槐卿吴文超黄华
- 关键词：基因芯片内皮细胞剪应力雌激素
- 骨髓基质干细胞BMP-2和bFGF基因的联合修饰被引量：9
- 2006年
- 目的:建立能够稳定表达BMP-2及bFGF的骨髓基质干细胞,优化骨组织工程种子细胞。方法:通过RT-PCR方法获取全长BMP-2及bFGF基因,克隆入真核表达载体pcDNA3.0,鉴定正确后,经脂质体介导导入分离培养的大鼠骨髓基质干细胞,G418筛选稳定表达株。利用RT-PCR、Westernblot、ELISA、免疫组织化学染色方法分析转染细胞外源基因表达情况。结果:成功构建了全长BMP-2及bFGF的真核表达载体,转染大鼠骨髓基质干细胞后经G418筛选获得稳定表达株。RT-PCR结果显示稳定转染细胞中具有大量目的基因mRNA转录,ELISA检测培养上清中目的蛋白表达阳性,Westernblot、免疫组化结果显示胞质中有目的蛋白的表达。结论:获得了可以稳定表达BMP-2及bFGF的骨髓基质干细胞,有利于组织工程骨缺损修复中的应用。
- 李毅陈槐卿成敏唐艳娟
- 关键词：骨髓基质干细胞BMP-2BFGF基因转染
- 雌激素对低切应力作用下内皮细胞基因表达谱的影响
- 2004年
- 目的 研究雌激素对低切应力作用下人脐静脉内皮细胞基因表达谱的影响 ,探讨雌激素对内皮细胞保护作用的机制。方法 用含 4 0 96点的 c DNA芯片高通量、大范围、高效率地检测经 17β-雌二醇 (10 - 7mol/L)孵育 4 8h后再行低切应力 (4 .2 0 dyne/cm2 ,2 h)作用后的人脐静脉内皮细胞的基因表达谱情况。结果 先用雌激素孵育再行低切应力处理的内皮细胞与未经任何处理的对照组比较 ,共有 384条基因出现差异表达 ,约占芯片基因总数的 0 .0 94 %。其中 2 2 6条基因表达增加 ,15 8条基因表达下降。在表达上调的基因中其转录产物涉及 PGI2 合成、单核 /巨噬细胞的吞噬作用等 ;在表达下调的基因中其转录产物涉及纤维蛋白原的降解、原癌基因产物的生成等。结论 生理浓度的雌激素对损伤内皮细胞有保护作用 ,其机制涉及到多种基因的调节。
- 张文胜成敏陈槐卿吴文超黄华
- 关键词：基因芯片切应力内皮细胞17Β-雌二醇
- 流体切应力作用时间对内皮细胞IL-8生成的影响被引量：4
- 2004年
- 内皮细胞对力学刺激反应敏感 ,流体切应力可以直接调节内皮细胞生物活性物质的产生。为阐明内皮细胞白细胞介素 - 8(IL- 8)蛋白质的生成受力学因素的影响 ,本文用流体切应力 (2 .0 9、4 .6 1、6 .19dyne/cm2 )处理培养的人脐静脉内皮细胞 ,然后采用双抗体夹心 ABC- EL ISA技术检测内皮细胞 IL- 8蛋白质的生成。结果显示 :未用切应力处理的内皮细胞只有极少量的 IL- 8蛋白质生成 ;切应力处理内皮细胞 1h,IL- 8蛋白质生成增加 ,处理 5 hIL- 8蛋白质生成量至最高值 ,处理 8h IL- 8蛋白质生成量下降 ,10 h后 IL- 8蛋白质维持在一个较高的水平 ;各实验组 (2 .0 9、4 .6 1、6 .19dyne/cm2 )均表现出相同的 IL- 8蛋白质随力学刺激时间的变化规律。提示流体切应力确实可以诱导内皮细胞生成 IL- 8,并且 IL- 8的生成量与切应力的作用时间有关 ,呈双相性变化。流体切应力诱导内皮细胞生成 IL- 8,可能在急性炎症或动脉粥样硬化的发生。
- 唐戎周江成敏聂永梅吴江陈槐卿
- 关键词：流体切应力内皮细胞IL-8炎症介质
- 兔动脉粥样硬化斑块处单核细胞趋化蛋白-1的表达被引量：6
- 2006年
- 目的了解单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemoattractant prote in-1,MCP-1)在动脉粥样硬化中的作用。方法采用免疫组化、双抗夹心ELISA和原位杂交的方法,检测MCP-1蛋白在免动脉粥样硬化斑块处的表达及定位MCP-1mRNA的表达。结果8、12周模型组内膜显著增厚并有明显阳性染色,半定量分析动脉粥样硬化模型组阳性染色的面积分别是对照组的2.04、3.32倍,平均积分光密度(IOD)值分别是对照组的2.33、3.43倍。8、12周动脉粥样硬化模型组MCP-1蛋白含量与总蛋白比值和对照组比较均有显著性差异,分别是对照组的2.90、3.58倍。8周模型组血管内膜有强的阳性染色,MCP-1 mRNA的表达增加。结论MCP-1的蛋白和基因上调主要是在高脂血症兔动脉粥样硬化模型的脂纹期。MCP-1参与动脉粥样硬化斑块的形成,主要在动脉粥样硬化的早期。
- 聂永梅陈槐卿成敏邓伊伶
- 关键词：单核细胞趋化蛋白-1动脉粥样硬化免疫组化ELISA原位杂交
- 流体切应力作用强度对内皮细胞IL-8生成的影响被引量：6
- 2004年
- 血管内皮细胞衬于血管腔的表面 ,是血流机械应力的主要感受者。切应力可以直接调节内皮细胞生物活性物质的合成和分泌 ,其中包括诱导内皮细胞生成 IL- 8,而且 IL- 8的生成量与切应力作用时间有关。为阐明内皮细胞 IL- 8的生成除了与切应力的作用时间有关外还与切应力的强度有关 ,我们用不同强度的流体切应力 (2 .0 9、4 .6 1、6 .19、8.5 1、10 .5 0、12 .5 9、14 .4 1、17.2 2、18.32 dyne/ cm2 )处理培养的人脐静脉内皮细胞 ,然后采用双抗体夹心 ABC- EL ISA技术检测内皮细胞 IL - 8蛋白质的生成。结果显示 :未用切应力处理的内皮细胞只有极少量的 IL - 8蛋白质生成 ;切应力处理内皮细胞后 ,低切应力 (2 .0 9dyne/ cm2 )时 IL - 8蛋白质生成量明显增加 ,约为高切应力(18.32 dyne/ cm2 )时 IL - 8蛋白质生成量的 6 (作用 5 h)或 7倍 (作用 6 h)。 IL - 8蛋白质生成量与内皮细胞所施加的切应力强度呈反变关系 ;直线回归方程 :5 h时为 y=76 0 .12 - 36 .0 6 x,相关系数 γ=- 0 .978;6 h时为 y=781.87-36 .6 6 x,相关系数 γ=- 0 .980。式中 :y为切应力作用下内皮细胞 IL- 8的生成量 ;x为施加于内皮细胞的切应力强度 (dyne/ cm2 )。不同的切应力作用时间 (5 h、6 h)均表现出相同的 IL- 8蛋白质生成量随切?
- 唐戎成敏聂永梅陈槐卿
- 关键词：白细胞介素-8流体切应力内皮细胞力学环境动脉粥样硬化作用
- ERK1/2信号转导途径在低切应力上调人脐静脉内皮细胞IL-8基因表达中的作用被引量：1
- 2005年
- 血管内皮细胞位于血流和血管壁之间,除受化学因素的调节外还受力学因素的影响。切应力可通过刺激相应的力学感受系统来调节内皮细胞某些基因的表达,其中包括诱导内皮细胞表达IL- 8。为了阐明MAPK信号途径中的ERK1/ 2信号通路是否参与调控低切应力上调人脐静脉内皮细胞IL- 8基因表达,采用Western blot分析了低切应力(4.2 0 dyne/ cm2 )处理不同时间内皮细胞ERK1/ 2的磷酸化水平及TPK抑制剂Genistein,MEK抑制剂PD980 5 9对其磷酸化的影响;采用定量RT- PCR检测内皮细胞经低切应力刺激或给予阻断剂后再行切应力刺激等处理后IL- 8基因的表达。结果显示:(1)低切应力处理可引起内皮细胞ERK1/ 2蛋白磷酸化水平上调,其磷酸化水平与切应力作用时间有关,具有快速、双向性的特点(在刺激10 min时达到高峰,2 h左右降至未刺激水平) ,阻断剂Genistein和PD980 5 9处理后,ERK1/ 2磷酸化水平与低切应力刺激10 min比较明显降低;(2 )阻断剂Genistein,PD980 5 9可显著抑制低切应力所致的内皮细胞IL- 8m RNA上调。结果表明低切应力可通过ERK1/ 2信号途径上调人脐静脉内皮细胞IL- 8基因的表达。
- 成敏李毅陈槐卿聂永梅张怡刘小菁
- 关键词：流体切应力内皮细胞人脐静脉内皮细胞IL-8MRNA低切应力基因表达信号转导途径
