徐伟文
- 作品数:98 被引量:305H指数:9
- 供职机构:南方医科大学检验与生物技术学院更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划国家自然科学基金广州市重大科技攻关项目更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学文化科学轻工技术与工程更多>>
- 肠道病毒71型实时荧光RT-PCR检测方法的建立及临床评价被引量:3
- 2010年
- 目的利用实时荧光RT-PCR技术,并通过系统的分析性能和临床性能评价,建立一种早期快速检测肠道病毒71型(EV71)的方法。方法根据EV71基因组中编码衣壳蛋白VP1基因保守区序列设计一对引物和一条荧光探针,利用实时荧光RT-PCR技术建立了检测EV71的方法,并对扩增产物进行分析,同时进行灵敏度、特异性、精密度评价,在此基础上利用不同标本类型共1104例临床样本对本方法和RT-PCR方法进行对比分析。结果本方法可以特异性的检测EV71,而对种属相近的或引起症状相似的其他病毒均无交叉反应。本方法检测灵敏度达到9.22×102PFU/ml,不同浓度样本的Ct值的变异系数在1.4%~2.9%之间。1104例临床样本的研究显示本方法与RT-PCR方法检测结果的总符合率达到96.74%,阳性样本的检出率要高于RT-PCR方法。结论本方法检测EV71具有灵敏度高、特异性强、精密度高、快速简便的特点,并与RT-PCR方法具有很好的符合率,在手足口病的早期快速诊断和疫情监测方面具有很好的应用前景。
- 朱坤高秀杰邓中平徐伟文高旭年李明
- 关键词:肠道病毒71型实时荧光RT-PCR性能评价
- 人酪氨酸激酶6原核表达载体的构建、表达、纯化与鉴定
- 2011年
- 目的构建人络氨酸激酶6(PTK6)与His融合蛋白重组表达载体,在大肠杆菌中诱导表达,并对重组蛋白进行纯化。方法通过PCR在编码PTK6的cDNA序列两端添加EcoR I和BamH I酶切位点,双酶切后将编码PTK6的cDNA序列亚克隆至原核表达载体PHUE构建重组蛋白表达载体PHUE/PTK。重组载体经鉴定后转化大肠杆菌表达菌株BL21(DE3)感受态细胞。IPTG诱导重组蛋白表达。收集菌体裂解后,用尿素洗涤和溶解包涵体。溶解上清经Ni-NTA亲和层析柱纯化,并用SDS-PAGE和Western blotting检测纯化产物。结果成功构建人PTK6重组蛋白原核表达载体,重组蛋白以包涵体形式表达,其相对分子质量为55 000,与预期一致。亲和层析纯化产物的SDS-PAGE和Western blotting鉴定表明获得纯度大于80%的目的重组蛋白。结论人PTK6 His融合蛋白的纯化为多克隆及单克隆抗体的制备以及结构和功能的研究奠定了基础。
- 杨学习谢美娟李欣李粉霞徐伟文李明
- 关键词:表达载体构建纯化
- ICU呼吸机相关性肺部感染分析被引量:1
- 2003年
- 徐伟文徐福英袁小妹谢珊珊
- 关键词:ICU抗生素医院感染
- GP73与肝癌关系的研究进展被引量:7
- 2013年
- 肝癌是常见的恶性肿瘤之一,恶性程度高、死亡率高,其早期诊断对于病人的治疗极为重要。目前临床广为使用的甲胎蛋白检测与影像学相结合的方式,在早期肝癌的敏感性和特异性诊断方面尚存在一些缺陷,寻找更有效的新肿瘤标志物是临床期盼的需求。高尔基体糖蛋白73(Golgi protein-73,GP73)是存在于高尔基体的一种II型跨膜糖蛋白,在早期肝癌患者血清内表达上调,近年来有很多研究认为GP73是最有潜力的肝癌血清标志物之一。本文就近年来GP73与肝癌关系的研究进展做综述。
- 吴婧徐伟文
- 关键词:肝癌GP73
- 我国疟疾现状及其防治被引量:10
- 1999年
- 徐伟文
- 关键词:疟疾流行病学
- 细胞间黏附因子-1与恶性疟原虫感染红细胞结合位点的鉴定
- 恶性疟原虫感染红细胞(PRBCs)黏附于脑毛细血管内皮细胞引起脑血管堵塞是脑型疟形成的关键因素。参与这一黏附反应的内皮细胞受体中,细胞间黏附因子1(ICAM-1)作用最为特异而肯定。ICAM-1与PRBCs的结合点位于d...
- 郝文波徐伟文李明陈白虹李中齐
- 关键词:恶性疟原虫感染细胞间黏附因子结合位点红细胞
- 时间分辨荧光免疫法定量检测CA125试剂盒临床应用研究
- 2008年
- 目的对自制CA125定量测定试剂盒(时间分辨荧光免疫法)进行临床应用研究,为该试剂盒的临床应用提供科学依据。方法按照自制试剂盒操作说明书对收集的410份血清进行测定,以电化学发光CA125定量测定试剂盒(Roche公司)为对照试剂,微粒子酶联免疫定量测定药盒(ABBOTT公司)为复核试剂,对测定的结果进行统计学分析。结果以电化学发光法为对照试验,其阳性符合率为98.35,阴性符合率为98.81,检验差异无统计学意义(P>0.05);相关系数为0.937,相关性良好;ROC曲线下面积为0.998。结论本试剂盒检测性能能满足临床应用的需要。
- 梁志伟董志宁徐伟文李明吴英松
- 人促卵泡激素时间分辨荧光免疫分析检测试剂的研制被引量:6
- 2006年
- 目的利用时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)技术建立人血清促卵泡激素(hFSH)的检测试剂。方法采用双抗体夹心法建立hFSH—TRFIA检测试剂,对试剂的各项指标进行评价。结果hFSH—TRFIA检测试剂的测量范围为1~256U/L,灵敏度为0.08U/L,分析内和分析间的精密度分别为2.6%~4.2%,6.1%~8.6%,与人黄体生成素(hLH)、人促甲状腺素(hTsH)和人绒毛膜促性腺激素(hCG)的交叉率分别为0.14%,0.08%和0.01%。30份异常血样用该试剂与进口的同类试剂同时检测,其相关系数为0.993。结论试剂各项指标均达到临床检测要求,可替代国外同类产品。
- 吴英松董志宁汤永平徐伟文李明
- UniArray(^(Tm))检测HBV拉米付定耐药的实验研究
- 2006年
- 目的研制可准确判断HBV感染者拉米付定耐药状况的YMDD突变检测试剂盒。方法采用UniArray技术建立YMDD检测体系和试剂盒,对其检测的灵敏度、特异度和准确性进行分析,并与测序结果进行比较研究。结果实验设立了3个检测位点,内参照、YIDD和YVDD,并确立其反应体系和3个反应体系的相互关系,在大量临床实验基础上,以血清DNA测序结果为金标准,确立了以△Ct≤3为本法阳性判断标准。按此标准,临床检测HBV灵敏度为3.9×104copies/ml,人群检测灵敏度为96.4%,特异性为100%,准确性为97.6%,CV%为0.58%~4.16%,完全能达到测序的检测水平。结论建立了UniArray技术检测HBV拉米付定耐药方法,该方法灵敏、特异,与测序结果有非常高的符合率,且能反映比测序更多的信息。
- 徐伟文李文全曹卫
- 关键词:突变生物学鉴定法
- HE4在早期卵巢癌诊断中的价值被引量:12
- 2013年
- 卵巢癌在女性妇科肿瘤中致死率占首位,但其发病隐匿导致早期诊断困难。随着国内外研究的不断深入,人附睾分泌蛋白4(human epididymis secretory protein 4,HE4)在诊断早期卵巢癌方面的价值也越来越受到普遍关注。本文就此方面做一综述。
- 张琼余娟平徐伟文
- 关键词:卵巢癌HE4肿瘤标志物