张绍城
- 作品数：12 被引量：31H指数：3
- 供职机构：重庆医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金重庆市卫生局科研项目国家临床重点专科建设项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学电子电信更多>>
- 前列腺癌患者血清胱抑素C水平的实验室评价被引量：2
- 2016年
- 目的评价前列腺癌患者血清CysC水平。方法选择前列腺癌患者32例前列腺良性疾病患者62例,以及健康男性体检者50例作为对照研究对象,检测受试者胱抑素C（CysC）、前列腺特异性抗原（PSA）水平。结果前列腺癌组血清CysC水平明显高于前列腺良性疾病组及对照组,差异有统计学意义（t=4.322,P=0.000 1;t=5.098,P=0.000 1）;而前列腺良性疾病组与对照组血清CysC水平比较,差异无统计学意义（t=1.877,P=0.063 2）。不同年龄前列腺癌患者血清CysC水平间差异无统计学意义（P〉0.05）。前列腺癌患者血清CysC阳性率明显高于血清PSA阳性率,差异有统计学意义（χ^2=3.91,P〈0.05）。结论血清CysC在前列腺癌患者中的检出阳性率明显高于血清PSA检出阳性率,有望取代血清PSA作为临床灵敏度和特异度更高的前列腺癌早期筛查和诊治新标志物。
- 王晶王欢欢张绍城
- 关键词：前列腺癌前列腺特异性抗原胱抑素C
- 重组葡激酶-人HC蛋白融合蛋白的原核表达、纯化及鉴定被引量：2
- 2012年
- 目的:表达和纯化重组葡激酶-人HC蛋白融合蛋白,并初步鉴定其生物学活性。方法:利用重叠延伸PCR方法使基因重组获得目的基因片段,插入带有GST标签的原核高效可溶性表达载体pEGX-6P-1中,构建重组表达质粒pEGX-6P-1-SAK-HC,将重组表达质粒转化大肠杆菌B834,经IPTG诱导目的蛋白表达;对融合蛋白用谷胱甘肽琼脂糖凝胶柱(GST)亲和层析柱及DEAE离子交换柱纯化,用PreScission蛋白酶切除GST标签,SDS-PAGE分析该融合蛋白的表达量和纯度,应用纤维蛋白平板溶圈法测定评价其生物学活性。结果:构建的重组表达质粒经PCR、内切酶鉴定及基因序列测定证实,目的蛋白在大肠杆菌中获得表达,SDS-PAGE显示相对分子质量(Mr)为36 000;对表达产物进行了亲和层析纯化,从上清中获得了纯度较高的葡激酶-人HC蛋白融合蛋白,体外实验显示其纤溶活性为9.4×104IU/mg。结论:获得了可溶性的葡激酶-人HC蛋白融合蛋白,且其纤溶活性与尿激酶标准品相当。为下一步进行融合蛋白免疫原性鉴定奠定了基础。
- 陈检杨可郭珍张阳丽张绍城杨伟赵沙沙何泉汪德强周建中
- 关键词：重组葡激酶融合蛋白表达纯化体外活性
- 金黄色葡萄球菌表面蛋白SdrE的表达、纯化及晶体生长
- 2014年
- 目的:对金黄色葡萄球菌表面蛋白质(serine-aspartate repeat,SdrE)进行克隆表达纯化及晶体培养,以期解析其三维结构,进而深入分析金黄色葡萄球菌感染的分子机制,为研发新的抗菌药物提供基础。方法:利用PCR技术扩增SdrE基因,构建重组质粒pW28-SdrE,并在大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)B834中表达,用Ni2+-NTA亲和层析柱和DEAE阴离子交换层析柱纯化SdrE蛋白质,再用Hiload Superdex 200凝胶层析柱分析其在溶液中的聚集状态,用Hampton试剂盒初筛晶体及棋盘法优化晶体。结果:(1)构建了重组质粒pW28-SdrE,并在E.coli B834中可溶性表达。(2)获得了纯度较高(85%)的SdrE蛋白质,该蛋白质在溶液中以单体形式存在。(3)培养出晶形较好、衍射能力较强的SdrE蛋白质单晶。结论:利用经典的蛋白质纯化技术和晶体培养技术,可以获得衍射能力较强的SdrE单晶,为其三维结构的解析和基于结构的新型特异性抗菌药物的研发提供了重要的基础。
- 张绍城郭珍张宏鹏苟冶然龙小滨汪德强
- 关键词：金黄色葡萄球菌抗菌药物
- RGD-重组葡激酶-人α微球蛋白融合蛋白原核表达、纯化及鉴定被引量：3
- 2015年
- 目的构建RGD-重组葡激酶-人α微球蛋白融合蛋白的原核表达质粒,在大肠杆菌中表达融合蛋白,纯化并初步鉴定其生物学活性。方法利用重叠延伸PCR获得目的融合基因片段RGD-r SAK-α1M,插入带有His-GST标签的原核高效可溶性表达载体PEGX-6P-1中。经酶切鉴定后,将重组表达质粒转化大肠杆菌BL21菌株,IPTG诱导目的蛋白表达,经Ni+亲和层析柱纯化后用3C蛋白酶切除重组蛋白的His-GST标签,再利用DEAE离子交换柱和分子筛纯化蛋白。最后应用纤维蛋白平板溶圈法和血小板聚集抑制试验分别测定评价重组融合蛋白的溶栓活性和抗血小板聚集作用。结果 1)成功构建了RGD-重组葡激酶-人α微球蛋白融合蛋白。2)实现了目的融合蛋白在大肠杆菌上清液中的高效表达,并纯化了融合蛋白。3)体外实验表明纯化后的融合蛋白纤溶活性同尿激酶标准品无明显差异。4)融合蛋白抗血小板聚集作用较单纯重组葡激酶明显提高。结论经文献检索确认为首次获得了纯化的RGD-重组葡激酶-人α微球蛋白融合蛋白,并验证了其纤溶活性和尿激酶标准品无明显差异,而抗血小板聚集作用较单纯重组葡激酶增强,为下一步进行融合蛋白免疫原性鉴定奠定了基础。
- 苟冶然龙小滨白磊何泉陈检张绍城汪德强周建中
- 关键词：重组葡激酶RGD融合蛋白抗血小板聚集
- E3泛素连接酶TRIM21在制备预防或治疗新型冠状病毒药物中的应用
- 本发明提供E3泛素连接酶TRIM21在制备预防或治疗新型冠状病毒（SARS‑CoV‑2）药物中的应用。研究发现，E3泛素连接酶TRIM21在体内外对SARS‑CoV‑2 N蛋白均有降解作用，有开发成为预防或治疗新型冠状病...
- 汪德强毛胜蓝张绍城王雯蔡雪飞黄爱龙张津马园艳沈仕梅
- 一种高保真重组酶聚合酶扩增试剂盒及应用
- 本发明提供一种高保真重组酶聚合酶扩增试剂盒及应用。发明人基于重组酶聚合酶扩增的反应原理，开发出合适的目标蛋白酶对RPA反应体系进行重新组合和优化，实现RPA的国产化，同时完善RPA和PCR技术的比较临床验证，为RPA应用...
- 汪德强沈仕梅伍晓莉王雯毛胜蓝马园艳张绍城魏杰
- 稀有密码子对人源Id2基因表达的影响被引量：4
- 2013年
- 目的:通过对人Id2基因的稀有密码子进行突变并构建原核表达重组质粒,在大肠杆菌(escherichia coli,E.coli)中表达Id2蛋白,分析稀有密码子对Id2基因表达的影响。方法:PCR扩增突变Id2基因序列,然后转入E.coli BL21中进行表达,利用镍离子亲和层析、离子交换层析及分子筛纯化。结果:正确构建了Id2基因的基因突变表达质粒,基因突变表达的Id2蛋白在E.coli BL21中为可溶性上清表达,成功纯化了目的蛋白,且分子筛结果显示其在溶液中呈现二聚体状态。结论:稀有密码子对Id2蛋白在E.coli BL21中大量可溶性上清表达有重要影响。
- 杨伟周华赵沙沙金丽郭珍张绍城陈检汪德强
- 关键词：ID2突变纯化
- 金黄色葡萄球菌表面蛋白质SdrE的研究现状
- 2015年
- 金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,S.aureus)是常见致病菌,其表面蛋白质在感染宿主过程中发挥重要作用,其中Sdr E蛋白质为其表面蛋白质之一,研究发现Sdr E蛋白质的表达几乎不受环境因素(包括温度、金属离子)的影响,并且可能与S.aureus对甲氧西林的抵抗力有关,近年来发现Sdr E蛋白质的磷酸化直接影响了S.aureus的毒性,同时,Sdr E蛋白质能够通过黏附补体调节因子H来逃避宿主免疫反应,并且还能够独立诱导血小板发生聚集,已经发现Sdr E蛋白质能够在骨骼感染、关节感染以及骨髓炎中发挥重要作用。本文主要分析了Sdr E蛋白质的生物学功能,为基于Sdr E蛋白质的新的特异性抗菌药物的开发指明方向和提供理论基础。
- 张绍城汪德强罗淼
- 关键词：金黄色葡萄球菌生物学功能抗菌药物
- E3泛素连接酶TRIM21在制备预防或治疗新型冠状病毒药物中的应用
- 本发明提供E3泛素连接酶TRIM21在制备预防或治疗新型冠状病毒（SARS‑CoV‑2）药物中的应用。研究发现，E3泛素连接酶TRIM21在体内外对SARS‑CoV‑2 N蛋白均有降解作用，有开发成为预防或治疗新型冠状病...
- 汪德强毛胜蓝张绍城王雯蔡雪飞黄爱龙张津马园艳沈仕梅
- 四川省绵阳地区健康儿童维生素A,D和E营养水平的分析研究被引量：20
- 2018年
- 目的了解四川省绵阳地区1~16岁健康儿童维生素A,25-羟基维生素D[(25-(OH)D)]和维生素E水平。方法以2017年1~12月在绵阳市中心医院儿保门诊接受健康体检的750例健康儿童作为研究对象,按年龄分为3组:婴幼儿1~3岁481例,学龄前(3~6岁)儿童132例,青少年(6~16岁)137例,采用液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)法检测血清维生素A,25-(OH)D和维生素E水平。结果血清维生素A,25-(OH)D和维生素E平均水平分别为0.45±0.25mg/L,27.27±11.38ng/mL及9.18±5.75mg/L。血清维生素A水平无年龄差异(χ~2=1.002,P=0.606),血清25-(OH)D水平(χ~2=6.843,P=0.033)与维生素E水平(χ~2=14.922,P=0.001)在不同年龄组差异有统计学意义。维生素A构成比在年龄上差异有统计学意义(χ~2=35.471,P<0.01),在各年龄组中均存在过量情况,且随着年龄增长呈增加趋势;血清25-(OH)D构成比在年龄上差异有统计学意义(χ~2=20.900,P<0.01),其缺乏率和不足率随着儿童年龄增长呈增加趋势;维生素E构成比无年龄差异(χ~2=7.054,P=0.133),其在各年龄组缺乏率与不足率均较明显,其中学龄前组总体缺乏最为严重,达74.2%。结论四川省绵阳地区1~16岁健康儿童维生素A,25-(OH)D和维生素E的营养状况不容乐观,应提高对脂溶性维生素的监测、预防意识,增加富含维生素A,25-(OH)D和维生素E的食物摄入,必要时在医生指导下及时补充维生素制剂。
- 王晶王欢欢张绍城
- 关键词：儿童维生素A维生素E
