张伟
- 作品数：8 被引量：25H指数：3
- 供职机构：上海交通大学医学院附属瑞金医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市科学技术委员会科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 核结合因子a1基因修饰的皮肤成纤维细胞修复骨缺损的实验研究被引量：6
- 2007年
- 目的探讨核结合因子 al(Cbfal)基因修饰的兔皮肤成纤维细胞与煅烧骨构建的移植材料对长骨大段骨缺损的修复作用。方法分离、纯化、培养兔皮肤成纤维细胞(RSF),应用pSG5-cbfal 及 pSG5质粒分别转染 RSF,获得 pSG5-Cbfal/RSF 及 pSG5/RSF,培养生长48 h 后,分别接种于长2 cm、直径4 mm 的圆柱状牛煅烧骨(TBC)上,制成 pSG5-Cbfal/RSF/TBC 及 pSG5/RSF/TBC复合物材料。制备兔桡骨中部长2 cm 的骨缺损模型,随机分组后,植入 pSG5-Cbfal/RSF/TBC 材料作为实验组(Ⅰ组),以 pSGS/RSF/TBC 材料植入组(Ⅱ组)、单纯 TBC 材料植入组(Ⅲ组)和无植入材料的自然修复组(Ⅳ组)作为对照,每组6只(12个桡骨)动物。分别于术后第4周及第12周摄 X 线片检查并最终获取骨折处标本,对植骨处进行三点抗折弯测试、脱钙骨组织切片的 HE 染色和 Masson染色及新生骨小梁图像计量分析。结果Ⅰ组标本骨质生长活跃,有大量新生骨小梁,生物力学性能良好,骨缺损处已完成早期愈合及修复;Ⅱ组、Ⅲ组及Ⅳ组无明显新生骨形成,未显示骨修复现象。结论 Cbfa1 基因修饰的兔皮肤成纤维细胞经与煅烧骨复合植入兔体内后,能完成对大段骨缺损的修复。
- 肖德常邓廉夫杨庆铭谭延斌吕学敏张伟冯伟何亚峰梁静朱雅萍齐进周琦王君
- 关键词：成纤维细胞骨缺损骨修复
- 晚期骨关节炎患者关节软骨细胞中HIF-1α和VEGF的表达被引量：6
- 2010年
- 目的研究低氧诱导因子1α(HIF-1α)和血管内皮生长因子(VEGF)在晚期骨关节炎(OA)患者关节软骨细胞中的表达,初步探讨HIF-1α在OA发病机制中的作用。方法选取18例晚期膝骨关节炎(KOA)接受全膝关节置换术患者的膝关节软骨组织标本,根据取材部位分为KOA负重区组(磨损较重的股骨内髁)和KOA相对非负重区组(磨损较轻的股骨外髁);另选取5例因股骨近端或股骨干肿瘤而截肢患者的正常膝关节软骨组织标本作为对照。HE和Safranin O染色下进行Mankin整体评分比较各组关节软骨组织退变程度;免疫组织化学染色检测关节软骨细胞HIF-1α和VEGF表达,比较各组HIF-1α和VEGF阳性细胞计数。结果 KOA负重区组Mankin整体评分为(12.36±0.84),显著高于KOA相对非负重区组的(7.23±0.32)和对照组的(0.88±0.15)(P<0.05)。免疫组织化学染色显示,KOA负重区组关节软骨细胞HIF-1α和VEGF阳性细胞计数分别为4.81±0.62和5.67±0.32,均显著高于KOA相对非负重区组和对照组(分别为2.37±0.68、4.87±0.33和0.78±0.14、2.02±0.45)(P<0.05)。结论晚期OA患者关节软骨细胞中HIF-1α和VEGF蛋白表达明显增加。提示上调靶基因VEGF表达是HIF-1α在OA发病中可能的调节机制。
- 李笑颜赵建曾文张伟齐进周琦邓廉夫
- 关键词：骨关节炎关节软骨低氧诱导因子1Α血管内皮生长因子
- 转染核结合因子a1/成骨细胞特异性转录因子2基因在兔皮肤成纤维细胞成骨表达中的作用被引量：5
- 2005年
- 目的探讨外源性小鼠核结合因子a1(Cbfa1) /成骨细胞特异性转录因子2(Osf2)基因在兔皮肤成纤维细胞中的瞬时表达对该细胞成骨表型表达的作用。方法在阳离子脂质体介导下,将含外源性小鼠Cbfa1 /Osf2基因的真核表达载体pSG5 Cbfa1 /Osf2导入新西兰兔皮肤成纤维细胞。用RT PCR方法检测Cbfa1、骨钙素、碱性磷酸酶及Ⅰ型胶原前肽基因表达,以Western Blot方法检测Cbfa1蛋白表达,以对硝基苯二磷酸底物法及放射免疫方法分别检测碱性磷酸酶活性及骨钙素分泌情况,并通过茜素红染色及扫描电子显微镜检测转染细胞形成骨性结节的能力。结果转染pSG5 Cbfa1 /Osf2真核表达质粒的兔皮肤成纤维细胞内可见Cbfa1mRNA及Cbfa1蛋白瞬时表达,骨钙素mRNA、碱性磷酸酶mRNA及Ⅰ型胶原前肽mRNA大量表达,碱性磷酸酶活性增强,骨钙素大量分泌,细胞表面形成骨性结节。结论转染pSG5 Cbfa1 /Osf2真核表达质粒的兔皮肤成纤维细胞能表达成骨相关基因及蛋白质,并在其表面形成骨性结节。
- 肖德常邓廉夫杨庆铭张伟吕学敏冯伟
- 关键词：CBFA1成骨细胞转染基因转录因子
- 慢性阻塞性肺病患者营养素摄入和营养状态的研究被引量：3
- 1995年
- 通过对34例慢性阻塞性肺部疾病(COPD)患者每日膳食中营养素摄入量的调查和营养状态评定表明,虽然患者的习惯饮食中热量摄入超过被推荐的标准供应量(RDA),但仍普遍存在营养不良.研究提示,给与COPD患者合理的营养支持能改善营养不良,增强治疗效果,对预后产生积极作用.
- 徐卫国邓伟吾黄绍光张伟郑丽叶万欢英
- 关键词：阻塞性营养调查营养评价
- pSG5-Cbfa1转染兔皮肤成纤维细胞及其瞬时表达被引量：3
- 2004年
- 目的 探讨外源性小鼠Cbfa1基因在兔皮肤成纤维细胞中获得瞬时表达的可行性。方法 在阳离子脂质体介导下 ,将含外源性小鼠Cbfa1基因的 pSG5 Cbfa1真核表达质粒导入原代培养的第 2代兔皮肤成纤维细胞内。采用RT PCR及Western Blot法检测Cbfa1基因在兔皮肤成纤维细胞内的瞬时表达。同时采用RT PCR法检测细胞内骨钙素及碱性磷酸酶基因的表达情况。结果 转染pSG5 Cbfa1真核表达质粒的兔皮肤成纤维细胞内有大量小鼠Cbfa1mRNA转录及蛋白瞬时表达 ,同时诱导骨钙素mRNA及碱性磷酸酶mRNA大量表达。结论 在阳离子脂质体介导下 ,小鼠Cbfa1基因能够导入兔皮肤成纤维细胞内并获得瞬时表达 。
- 肖德常杨庆铭邓廉夫张伟
- 关键词：皮肤成纤维细胞WESTERN-BLOT法
- 抗caspase-12核酶对内质网应激介导小鼠肝细胞凋亡的阻抑作用
- 内质网(Endoplasmic Reticulum,ER)应激是最近报道的一条新的细胞凋亡信号传导途径,与多种肝脏疾病的发病机制有关。内质网应激可特异地介导Caspase-12蛋白酶活化,进一步活化其下游效应蛋白酶引起细...
- 姜山谢青周慧娟张伟刘海防
- 文献传递
- 低氧通路对骨髓间充质干细胞多向分化能力的影响被引量：2
- 2011年
- 目的探讨低氧通路中低氧诱导因子1α(H IF-1α)对骨髓间充质干细胞(MSCs)多向分化能力的影响。方法以腺病毒载体Ad-Cre对转基因鼠MSCs的VHL基因进行基因敲除(基因敲除组),设立对照组(感染腺病毒载体Ad-GPF的转基因鼠MSCs),采用Real-Tim e PCR技术检测H IF-1αmRNA表达。两组MSCs分别经成脂肪和成软骨诱导分化培养14 d,成骨诱导分化培养21 d;其中基因敲除组MSCs于5%O2条件下培养,对照组MSCs于20%O2条件下培养。采用Real-Tim e PCR技术检测软骨细胞标志物Ⅱ型胶原(ColⅡ)、脂肪细胞标志物过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)及成骨细胞标志物骨钙素(OC)和碱性磷酸酶(ALP)的mRNA表达;ColⅡ染色和ALP染色光学显微镜观察两组ColⅡ和ALP染色阳性细胞的分布情况。结果基因敲除组H IF-1αmRNA表达显著高于对照组(P<0.05)。5%O2条件下培养的基因敲除组ColⅡ、PPARγ、OC、ALP mRNA表达均显著高于20%O2条件下培养的对照组(P<0.05)。与对照组比较,基因敲除组ColⅡ染色和ALP染色阳性细胞数量较多且染色较深。结论在5%O2条件下,H IF-1α具有促进MSCs向软骨细胞、脂肪细胞和成骨细胞分化的作用。
- 曾文张伟张伟邓若晛王君魏立齐进周琦
- 关键词：低氧诱导因子1Α骨髓间充质干细胞基因敲除诱导分化
