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早孕绒毛外细胞滋养细胞的体外培养方法: 2010年; 目的:探讨改良人早孕绒毛外细胞滋养细胞原代分离培养方法。方法:建立改良的复合酶消化梯度离心法,分离培养绒毛外细胞滋养细胞,通过免疫细胞化学、Giemsa染色和细胞侵袭实验检测细胞纯度、数量及生物学活性(侵袭性),并与低浓度胰蛋白酶消化方法进行比较。结果:低浓度胰蛋白酶消化方法和改良的复合酶消化梯度离心法所得贴壁细胞量分别为(11.69±1.26)×104和(17.21±0.51)×104,两者比较有统计学差异(P<0.05);绒毛外细胞滋养细胞纯度分别为(63.20±7.12)%和(92.10±5.11)%,两者比较有统计学差异(P<0.05),穿膜细胞数分别为(36.10±3.28)和(66.20±5.17),两者比较有统计学差异(P<0.05),提示该实验室改良的复合酶消化梯度离心法所得细胞总量、绒毛外细胞滋养细胞纯度及数量均显著高于低浓度胰蛋白酶消化方法。结论:该实验室改良的复合酶消化梯度离心法获得绒毛外细胞滋养细胞纯度和数量显著提高。; 刘涛陈娟娟张丹丹肖娟尹宗智王楠陈素华; 关键词：细胞培养

人胎盘滋养层细胞体外感染HCMV后的生物学特性变化被引量：2: 2010年; 目的探讨人胎盘滋养层细胞(以下简称滋养细胞)感染人巨细胞病毒(HCMV)后生物学特性改变及意义。方法采用复合酶消化法及Percoll密度梯度离心法分离纯化、培养人滋养细胞;采用HCMV AD169病毒感染滋养细胞,检测不同时间点病毒复制情况和细胞凋亡率。结果HCMV感染滋养细胞后快速复制,24～72 h复制速度减慢;感染HCMV的滋养细胞凋亡率(34.68%±3.14%)明显高于未感染HCMV者(15.32%±2.34%),P<0.05。结论HCMV感染滋养细胞具有早期快速复制的特点,可导致滋养层细胞在感染早期加速凋亡。; 肖娟陈素华陈娟娟张丹丹尹宗智刘涛艾继辉; 关键词：人巨细胞病毒滋养层细胞生物学特性

连翘及其主要有效成分槲皮素体外抗人巨细胞病毒的实验研究被引量：31: 2010年; 目的:研究连翘及其主要有效成分槲皮素体外抗人巨细胞病毒作用和细胞毒性。方法:用细胞病变法和MTT法,检测连翘、槲皮素抗人巨细胞病毒的最大无毒浓度、最小有效浓度和治疗指数,并与更昔洛韦进行比较。结果:更昔洛韦、连翘及槲皮素的最大无毒浓度分别为10,30,30 mg.L-1,最小有效浓度分别为10,30,0.3 mg.L-1,治疗指数分别为1,1,100。结论:槲皮素抗HCMV效果大大高于更昔洛韦和连翘,细胞毒性与连翘相同、比更昔洛韦低。连翘尤其是槲皮素具有良好的体外抗人巨细胞病毒(HCMV)效果,有望成为临床抗HCMV的药物,值得进一步深入研究。; 张丹丹方建国陈娟娟万进张亚伟尹宗智王楠陈素华; 关键词：连翘槲皮素人巨细胞病毒

穿心莲抗人巨细胞病毒的体外实验研究被引量：16: 2010年; 目的研究穿心莲体外抗人巨细胞病毒(HCMV)的效果和安全性。方法用细胞病变法和噻唑蓝(MTT)法检测穿心莲抗HCMV的最大无毒浓度、最小有效浓度和治疗指数,并与更昔洛韦、金银花、鱼腥草、大青叶进行比较。结果更昔洛韦、金银花、鱼腥草、大青叶及穿心莲的最大无毒浓度分别为10,3000,30000,30000,3000μg·mL-1,最小有效浓度分别为10,3000,3000,3000,300μg·mL-1,治疗指数分别为1,1,10,10,10。结论穿心莲具有体外抗HCMV效果,其抗病毒作用高于金银花、鱼腥草、大青叶;细胞毒性与金银花相同,略高于鱼腥草、大青叶。其治疗指数高于金银花,与鱼腥草、大青叶相同,具有潜在的临床应用前景,值得进一步深入研究。; 张丹丹陈娟娟方建国万进王楠陈素华; 关键词：穿心莲抗病毒巨细胞病毒

1～7日龄小鼠仔鼠海马神经元突触超微结构研究: 2010年; 目的观察1～7日龄小鼠仔鼠海马神经元突触结构超微变化。方法选择性成熟期BALB/C小鼠,雌雄同笼受孕,于自然分娩后1～7 d每日处死7只仔鼠,无菌剥离海马组织,电镜观察海马神经元突触超微结构变化。结果随日龄增加,海马神经元数目无明显变化,但海马神经元细胞器(线粒体、内质网等)数量逐渐增多、体积逐渐增大;突触界面曲率及突触后膜致密物厚度逐日迅速增加(P<0.05);突触间隙逐日增大,其中3～7日龄增大非常迅速(P<0.05)。结论海马神经元细胞器以及突触超微结构的变化,可能是出生早期仔鼠学习记忆能力快速发展的基础。; 贾丽棉陈素华王玲张丹丹肖娟凌霞珍; 关键词：仔鼠海马突触超微结构

人巨细胞病毒影响绒毛外细胞滋养细胞增殖功能的体外研究被引量：2: 2011年; 目的:探讨人巨细胞病毒(HCMV)对绒毛外细胞滋养细胞增殖功能的影响。方法:选择绒毛外细胞滋养细胞株HPT-8进行研究,体外培养时加入HCMV,免疫荧光法检测HCMV PP65,MTT法检测不同浓度HCMV、不同作用时间对HPT-8增殖的影响。结果:病毒感染组HPT-8细胞内可见大量红色HCMV PP65抗原信号;与正常对照组比较,10～100μl病毒液作用12 h HPT-8增殖均无异常(P>0.05),70μl和100μl病毒液作用24 h HPT-8增殖明显抑制(P<0.05),20、30、40、50μl病毒液作用48 h HPT-8增殖均明显抑制(P<0.05),10μl病毒液作用72 h HPT-8增殖明显抑制(P<0.05);其中,48 h和72 h时间点,20μl、30μl、40μl病毒液导致的细胞增殖异常差异无统计学意义(P>0.05)。结论:HCMV可感染HPT-8并在细胞内复制,抑制细胞增殖。; 刘涛陈娟娟尹宗智赵晶晶赵建华肖娟张丹丹陈素华; 关键词：人巨细胞病毒增殖

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张丹丹