目的探讨利用转染多药耐药基因(MDR1)方法建立表肝癌耐药细胞系,为深入研究肝癌多药耐药现象提供理想的细胞模型。方法将前期构建表达mdr1cDNA转染质粒PCI/mdr1转染人肝癌细胞株HepG2细胞,采用G418和阿霉素短暂诱导,筛选出稳定的耐药细胞株HepG2/mdr1;利用RT-PCR、FCM及体内外的耐药性试验对其进行功能检测。结果与其亲代细胞株HepG2比较,HepG2/mdr1细胞中mdr1mRNA及P-gp表达明显增加,分别为(58.80%±11.80%vs 24.00%±5.80%)和(10.28±2.09 vs 3.70±1.06),对阿霉素和丝裂霉素的耐药性分别增加了35倍和125倍,体内耐药性也明显增加。结论利用转基因方法能够成功建立肝癌多药耐药细胞系。
