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人AITRL基因克隆和序列分析被引量：1: 2006年; 目的:克隆人AITRL基因cDNA,同时对其序列进行分析。方法:采用RT-PCR方法,从人脐静脉内皮细胞株中获得AITRL基因的cDNA,克隆至pMD18-T载体,选择阳性克隆进行酶切鉴定和序列测定。结果:扩增得到的AITRL基因cDNA为534 bp,编码177个氨基酸残基,与GenBank中公布的序列完全一致。结论:获得人AITRL基因的克隆,为进一步研究其生物学功能奠定了良好基础。; 毛朝明王胜军蒋茜马洁杨敏仝佳许小朋邱谷风唐莉邵启祥许化溪; 关键词：CDNA克隆 RT-PCR 人脐静脉内皮细胞

真核表达质粒pDisplay-hGITRaa_(1-165)构建及其在COS-7细胞中的表达被引量：1: 2008年; 目的:构建含有人GITR胞外段的真核表达质粒pDisplay-hGITRaa1-165,并检测其在真核细胞内的表达。方法:将带有信号肽的GITR基因片段克隆至真核表达载体pDisplay,经酶切鉴定及测序分析,脂质体介导法转染COS-7细胞,通过蛋白质印迹法检测其在COS-7细胞内的表达水平。结果:所构建的真核表达质粒pDisplay-hGI-TRaa1-165转染COS-7细胞后,在其培养上清中检测到目的蛋白的表达。结论:成功表达pDisplay-hGITRaa1-165蛋白,为GITR的生物学功能研究奠定了基础。; 陈君王胜军仝佳王海生马斌唐莉胡正军鲍俊峰史烨许化溪; 关键词：GITR COS-7细胞真核表达

hGITRL_(aa52-177)蛋白在杆状病毒系统中的表达被引量：1: 2009年; 目的利用杆状病毒系统表达hGITRLaa52-177蛋白。方法PCR扩增获得hGITRL胞外段(hGITRLaa52-177)基因,克隆入pFastBacHTa转移载体,在E.coliDH10Bac内通过转座子Tn7的介导,得到重组杆粒,转染Tn细胞表达目的蛋白。通过SDS-PAGE电泳及Westernblotting鉴定目的蛋白的表达。结果重组载体pFastBacHTa-hGITRLaa52-177以及重组杆粒Bacmid-hGITR-Laa52-177构建正确,在Tn细胞内成功表达6×His-hGITRLaa52-177重组蛋白,SDS-PAGE电泳及Westernblotting显示重组hGITRLaa52-177蛋白相对分子质量约为Mr18000。结论杆状病毒-昆虫表达系统获得hGITRLaa52-177蛋白,为进一步从蛋白质水平研究hGITR/hGITRL对机体免疫调节的影响奠定了基础。; 唐莉王胜军毛朝明陈君胡正军鲍俊峰仝佳邵启祥许化溪; 关键词：杆状病毒真核表达

人AITRL胞外区基因克隆表达及重组蛋白生物活性分析被引量：1: 2007年; 目的:获得重组人活化诱导的肿瘤坏死因子超家族配体胞外区蛋白(sAITRL),分析AITRL蛋白的生物学功能。方法:从全长质粒AITRL-pMD18-T中扩增sAITRL cDNA,亚克隆至表达载体pQE30;将重组质粒转化至E.coliM15,IPTG诱导蛋白表达;表达蛋白用Ni2+-IMAC柱纯化、复性并Western blot鉴定,流式细胞仪检测sAITRL重组蛋白的结合活性,增殖试验分析sAITRL的生物学活性。结果:成功构建了sAITRL-pQE30原核表达载体;表达相对分子质量约15kD的重组蛋白;sAITRL能与活化淋巴细胞上的天然受体AITR结合,低浓度的sAITRL能促进淋巴细胞的增殖,而在高浓度下则抑制了淋巴细胞的增殖。结论:成功表达了具有生物学活性的sAITRL重组蛋白,AITR-AITRL相互作用在调节淋巴细胞增殖过程中起重要作用。; 毛朝明王胜军仝佳马洁杨敏许小朋邱谷风唐莉邵启祥李龙许化溪; 关键词：基因克隆原核表达重组蛋白

hGITRL/_（aa52-177）蛋白的表达及BA-ELISA法检测hGITRL方法学的建立: 目的: 分别采用杆状病毒昆虫表达系统和pDisplay表达质粒体外表达hGITRL/_/(aa52-177/)蛋白;建立BA-ELISA法,检测hGITRL蛋白。方法: /(1/)PCR扩...; 唐莉; 关键词：真核表达 ELISA; 文献传递

GITRL的分子结构被引量：3: 2009年; 糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体配体(glucocorticoid-induced tumor necrosis factor receptor ligand,GITRL)是TNF家族新成员,与糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体(GITR)结合后,提供正向的刺激信号,参与T细胞反应。与其他TNF家族成员不同的是:hGITRL胞外功能区自身聚集形成疏松的三聚体结构,而mGITRL则表现出独特的二聚体结构。在溶液中,GITRL通过寡聚化作用形成多种形式的低聚体,通过寡聚化作用可以调节低聚体的数量,优化GITRL/GITR信号的发挥。此外,GITRL还可以通过传递反向信号发挥其独特的生物学功能。; 唐莉王胜军; 关键词：晶体结构

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唐莉