刘永飞
- 作品数：19 被引量：3H指数：1
- 供职机构：中国科学院天津工业生物技术研究所更多>>
- 发文基金：天津市自然科学基金天津市科技支撑计划重点项目更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程化学工程农业科学更多>>
- 磷酸烯醇丙酮酸合成酶的突变体及其在产色氨酸方面的应用
- 本发明公开了大肠杆菌编码一种磷酸烯醇丙酮酸合成酶ppsA的突变体及其应用，其中在将原始磷酸烯醇丙酮酸合成酶第419位氨基酸突变为D或者P。通过构建包含所述编码磷酸烯醇丙酮酸合成酶突变体的工程菌生物安全，遗传背景清晰，可以...
- 张大伟刘永飞
- 文献传递
- 一种胞苷高产微生物菌株的高通量筛选方法
- 本发明公开了一种胞苷高产微生物菌株的高通量筛选方法。它是将单菌落接种于装有液体种子培养基的深孔板I中，摇床震荡培养，然后将深孔板I孔中的种子液对应接种到装有发酵培养基的深孔板II中，摇床震荡培养后，将深孔板离心，取上清液...
- 张大伟董会娜刘永飞李宁
- 文献传递
- 异柠檬酸裂合酶突变体及其在制备芳香族氨基酸中的应用
- 本发明公开了异柠檬酸裂合酶突变体及其在制备芳香族氨基酸中的应用，异柠檬酸裂合酶突变基因aceA序列用SEQ ID No.1所示。本发明构建的包含有大肠杆菌编码异柠檬酸裂合酶突变基因aceA的工程菌生物安全，遗传背景清晰，...
- 张大伟刘永飞
- 文献传递
- L-色氨酸重组高产菌株发酵工艺的优化被引量：1
- 2018年
- L-色氨酸(L-tryptophan,L-Trp)是一种限制性氨基酸,是人体和动物体生长发育等重要生理活动的必需氨基酸之一,也是合成许多活性物质的关键氨基酸之一,广泛应用于医药、饲料和食品等方面,具有十分重要的商业价值。微生物发酵生产的L-色氨酸近些年来一直备受关注,主要是因为其价格低廉、纯度高、易分离等特点,因此利用微生物生产L-色氨酸在大规模工业生产上具有十分可观的应用前景。利用色氨酸高产基因,经基因工程重组到大肠杆菌内,筛选出色氨酸高产菌株。通过控制溶氧、碳源、p H值及残糖含量来有效提高L-色氨酸的产量。利用原始菌株探究发酵过程中发酵罐内的残糖含量,发现残糖含量控制在1%时,菌体生长最为良好,生长周期最长。将不同比例的糖蜜与葡萄糖混合,作为发酵时的碳源,结果显示当比例为3∶1时L-色氨酸产量最大;在发酵过程中控制p H条件,将产量提高到18.9 g/L;将溶氧条件控制在35%、40%两个范围,结果显示溶氧40%时L-色氨酸的产量达到27 g/L;将补料碳源换为60%的葡萄糖及70%的小麦糖,结果显示葡萄糖作为唯一碳源时,L-色氨酸产量较高。
- 吕磊宋国田刘永飞刘燕霏杨建德张大伟
- 关键词：高产菌株
- 一种快速检测发酵液中苏氨酸含量的方法
- 本发明公开了一种快速检测发酵液中苏氨酸含量的方法，将样品溶液稀释后与含有NADH、PLP、乙醇脱氢酶和DTT的溶液混匀反应后，再与含有LTA的溶液反应，通过检测计算OD<Sub>340</Sub>降低速率，与标准曲线进行...
- 张大伟刘永飞李斐然姜文侠张笑然郑平
- 新型的L-苏氨酸-诱导型启动子及其应用
- 本发明提供了一类新型的L‑苏氨酸‑诱导型启动子及其应用，具体的，本发明提供了新型的L‑苏氨酸‑诱导型启动子以及包含该启动子的构建物、载体和宿主细胞，所述启动子能被苏氨酸所诱导。本发明新型的L‑苏氨酸诱导型启动子核酸分子能...
- 孙际宾李庆刚刘亚男郑平刘永飞张大伟马延和
- 文献传递
- 新型的L-苏氨酸-诱导型启动子及其应用
- 本发明提供了一类新型的L-苏氨酸-诱导型启动子及其应用，具体的，本发明提供了新型的L-苏氨酸-诱导型启动子以及包含该启动子的构建物、载体和宿主细胞，所述启动子能被苏氨酸所诱导。本发明新型的L-苏氨酸诱导型启动子核酸分子能...
- 孙际宾李庆刚刘亚男郑平刘永飞张大伟马延和
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- 一种快速检测发酵液中苏氨酸含量的方法
- 本发明公开了一种快速检测发酵液中苏氨酸含量的方法，将样品溶液稀释后与含有NADH、PLP、乙醇脱氢酶和DTT的溶液混匀反应后，再与含有LTA的溶液反应，通过检测计算OD<Sub>340</Sub>降低速率，与标准曲线进行...
- 张大伟刘永飞李斐然姜文侠张笑然郑平
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- 利用DNA重组技术生产L-苯丙氨酸的研究被引量：2
- 2020年
- L-苯丙氨酸(L-phenylalanine,L-Phe)是人体八大必须氨基酸之一,在人类的新陈代谢中起着重要的作用。而现在生产L-Phe的技术还远远满足不了市场的需求,本研究目的是利用DNA重组技术以及微生物发酵的方法提高L-Phe产量。研究方法包括利用易错PCR技术对rpoA基因进行点突变建立一个基因库,通过突变作用于rpoA的正常转录从而调控工程菌株产生L-Phe的量;利用质粒ptrc99a作为载体转化到感受态细胞中,并从中筛选出高产菌株;通过质粒的构建、筛选、验证、发酵等一系列试验,结果表明工程菌株构建成功,为L-Phe规模化生产提供科学依据。
- 张清华李莎廉政刘永飞杨建德刘燕霏张大伟
- 关键词：L-苯丙氨酸DNA重组发酵
- L-苯丙氨酸调控tyrP启动子强度的研究
- 2018年
- TyrR是大肠埃希氏菌(Escherichia coli简称E.coli)芳香族氨基酸生物合成和运输途径中的一种全局性调控蛋白,控制着包括tyrP在内的8个转录单元的转录。将tyrP基因启动子的两个RNAP(RNA聚合酶)结合位点进行定点突变来影响TyrR对tyrP的介导活化,并且TyrR与L-苯丙氨酸(L-Phe)结合极大地增强了RNAP对下游结合位点(tyrP启动子)的结合亲和力,因此可用L-Phe来调控启动子强度进而调控转录水平。本文以构建L-Phe高产菌株为最终目的,对tyrP启动子进行突变并用以构建L-Phe生物传感器,使tyrP启动子强度转变为可测量的荧光值,再使用L-Phe调控该传感器,影响tyrP启动子强度。最终发现突变后的tyrP启动子强度发生不同程度的改变,并且用L-Phe调控后,在一定浓度范围内,随着L-Phe浓度的升高tyrP启动子强度也在一定范围内增强。这将有利于筛选出受调控的优质启动子,并为改造E.coli代谢路径及高产L-Phe菌株构建有重要意义。
- 赵胜刘永飞廉政刘燕霏张大伟
- 关键词：生物传感器
