刘梦蕾
- 作品数：12 被引量：9H指数：2
- 供职机构：第二军医大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 稳定表达可诱导共刺激分子CHO细胞株的筛选及其生物学活性鉴定被引量：2
- 2008年
- 目的:构建携带人可诱导共刺激分子(inducible costimulator molecule,ICOS)基因的重组逆转录病毒载体,筛选稳定表达ICOS蛋白的CHO细胞株,并对其生物学活性进行鉴定。方法:RT-PCR法从人PBMC中获取ICOScDNA,定向克隆到逆转录病毒载体上,制备逆转录病毒重组体pMSCV-ICOS;经病毒包装细胞包装后抗性筛选出产高滴度病毒的细胞株,用高滴度病毒上清感染CHO细胞,抗性筛选出稳定表达细胞株。将CHO-ICOS细胞和PBMC以不同比例(1:1、1:2、1:5、1:10)共培养,加入亚刺激剂量(200ng/ml)的抗人CD3抗体,采用3H-TdR掺入法检测PBMC的增殖,流式细胞仪检测T细胞表面活化分子CD25表达情况,并以CHO-pMSCV细胞和PBMC以1:1比例共培养作为阴性对照以及未处理的PBMC作为空白对照。结果:成功构建逆转录病毒重组体pMSCV-ICOS,筛选出稳定表达ICOS蛋白的CHO细胞株。3H-TdR掺入法和流式细胞仪检测结果表明,与阴性对照及空白对照相比,CHO-ICOS细胞与PBMC共培养能抑制CD3抗体诱导的PBMC增殖及活化(P<0.05或P<0.01),细胞比例为1:1时抑制率最大,分别为(68±5.9)%、(44.08±3.26)%。结论:成功建立具有生物学活性的膜稳定表达人ICOS蛋白的CHO细胞株,为今后研究奠定了基础。
- 丁庆莉刘梦蕾龙宪连沈茜
- 关键词：可诱导共刺激分子重组逆转录病毒载体转染
- 一种用于制备抗白内障产品的组合物
- 本发明涉及一种能够用于制备抗白内障产品的组合物。发明人根据晶体蛋白的时相改变，发现了表达特殊及分布特殊的晶体蛋白βB<Sub>2</Sub>随机体老化进程的变化规律，确定其为抗白内障的更为合适的靶蛋白，并发现二硫苏糖醇是...
- 李闻捷刘梦蕾张军
- 文献传递
- 一种用于抗白内障的靶蛋白
- 本发明涉及一种能够用于抗白内障的靶蛋白及其用途。发明人根据晶体蛋白的时相改变，发现了表达特殊及分布特殊的晶体蛋白βB<Sub>2</Sub>随机体老化进程的变化规律，确定其为抗白内障的更为合适的靶蛋白，并发现二硫苏糖醇是...
- 李闻捷张军刘梦蕾
- 文献传递
- 可调控性鼠PLP-Ig嵌合体重组腺病毒载体的构建和表达被引量：1
- 2004年
- 目的 :构建和表达可调控鼠蛋白脂质蛋白 (PLP) 免疫球蛋白重组腺病毒载体。方法 :采用常规分子生物学方法 ,从WT 1杂交瘤细胞中抽提总RNA ,克隆小鼠Ig重链Fc基因。将编码PLP13 9-151的DNA与信号肽设计在引物上 ,经两次克隆可形成可分泌型PLP Ig。经穿梭载体与可调控性腺病毒载体骨架连接 ,鉴定后在HEK2 93细胞中包装。获得高滴度病毒后 ,用Westernblot鉴定目的基因的表达。结果 :PLP Ig重组腺病毒经测序、限制性内切酶酶切分析及PCR等鉴定 ,同预期结果相一致。Westernblot检测病毒感染的细胞 ,发现目的基因得到特异性表达且可被四环素调节。结论 :构建了可调控的小鼠PLP Ig重组腺病毒载体并得到正确表达 ,为进一步基因治疗实验性变态反应性脑脊髓炎 (EAE)
- 张燕刘梦蕾沈茜
- 关键词：腺病毒载体小鼠
- LTβR-Ig通过LIGHT向未成熟树突状细胞传递刺激信号影响其生物学功能的研究
- 肿瘤坏死因子超家族/(TNFSF/)成员具有促进细胞生长、分化或死亡的功能,在淋巴器官的形成,免疫细胞的激活及维持机体的稳态方面发挥重要的生物学作用。近年来,发现了很多具有重要功能的TNF超家族成员,LIGHT/(lym...
- 刘梦蕾
- 文献传递
- SD大鼠βB_2-晶体蛋白的克隆、表达与纯化被引量：1
- 2005年
- 目的 得到大量纯的βB2 -晶体蛋白,为研究其生物学特性及潜在的生理功能打下基础.方法 从SD大鼠晶状体中抽提总RNA ,用RT -PCR法克隆βB2 -晶体蛋白的cDNA ,装入原核表达载体pGEX - 4T - 1后用萘啶酮酸(IPTG)诱导表达;用GST纯化系统纯化并用蛋白水解酶对融合蛋白进行酶切.结果 βB2 -pGEX重组质粒经测序及限制性内切酶分析等鉴定,与预期结果一致;IPTG诱导后,蛋白质在大肠杆菌BL2 1中得到高效表达.纯化酶切后,经Westenblot方法验证,得到了高纯度的βB2 -晶体蛋白.结论 成功构建了βB2 -pGEX原核表达载体,高效表达了βB2-GST融合蛋白,经纯化和酶切得到了高纯度的βB2 -晶体蛋白,为进一步研究其生物学特性及潜在的生理功能打下基础.
- 刘梦蕾李闻捷蔡刚张燕张军
- 关键词：克隆纯化大肠杆菌
- 晶体蛋白与白内障学研究进展被引量：5
- 2005年
- 白内障是严重影响人类健康的常见病、多发病.研究白内障的病因学及影响因素,是控制和防治该病的有力措施.白内障的发生是由晶体的透光性改变所引发的;晶体的透光性是由晶体的有序结构所决定的.本文综述近年来有关晶体蛋白的组成与结构、翻译后修饰特别是氧化损伤与白内障发病机制的关系.
- 刘梦蕾李闻捷
- 关键词：晶体蛋白翻译后修饰白内障
- 一种用于制备抗白内障产品的组合物
- 本发明涉及一种能够用于制备抗白内障产品的组合物。发明人根据晶体蛋白的时相改变，发现了表达特殊及分布特殊的晶体蛋白βB<Sub>2</Sub>随机体老化进程的变化规律，确定其为抗白内障的更为合适的靶蛋白，并发现二硫苏糖醇是...
- 李闻捷刘梦蕾张军
- 文献传递
- 一种用于动物的固定装置
- 本实用新型公开一种用于动物的固定装置，该装置是平面板式的操作平台，或由该操作平台与支撑物结合形成的立式操作台，操作平台包括固定板及其上的滑槽和滑槽上的固定器，滑槽是梯形或其他形状的凸起样或凹陷式的滑槽，固定器包括移动滑块...
- 李闻捷张军黄才国王锡智王飞许育张建荣刘梦蕾
- 文献传递
- 一种与半乳糖诱导白内障相关蛋白的分离纯化及鉴定
- 本课题在前期研究发现了x36-晶体蛋白的基础上，用半乳糖诱导的方法造大鼠白内障模型，用双向电泳的方法分离水溶性晶体蛋白，用肽质量指纹谱和串联质谱的方法鉴定蛋白质。初步鉴定结果为，x36属于βB1-晶体蛋白。并且用原核表达...
- 刘梦蕾
- 关键词：半乳糖白内障晶体蛋白肽质量指纹谱串联质谱
- 文献传递
