刘智广
- 作品数：60 被引量：188H指数：7
- 供职机构：第四军医大学口腔医学系更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金陕西省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学理学化学工程更多>>
- Tris-SDS-PAGE测定多肽的相对分子质量被引量：3
- 2001年
- 张晓楠张延凤曹云新刘智广
- 关键词：多肽相对分子质量SDS-PAGE
- 幽门螺杆菌细胞毒素相关抗原A的表达纯化及其临床研究被引量：8
- 2002年
- 目的:cagA^+Hp的感染与胃癌的相关性在亚洲有不同报道,本研究应用重组幽门螺杆菌毒素相关抗原A(CagA)建立检测血清中抗CagA抗体的方法,以探讨本地区cagA^+ Hp的感染与胃癌的相关性。 方法:构建表达幽门螺杆菌CagA抗原的表达载体,工程菌经IPTG诱导,表达的CagA包含体经Ni柱纯化,变性、复性、透析并经活性鉴定后,抗原被点在硝酸纤维素膜上或用以包被ELISA板,建立检测正常人及胃癌患者血清抗CagA抗体的DIGFA(斑点金免疫渗滤试验,简称滴金法)和ELISA法。 结果:重组克隆pRSETcagA的工程菌可表达M_r36000的目的蛋白,表达形式为包含体;CagA包含体经纯化后SDS-PAGE显示纯度达98％以上,活性经ELISA证实;正常人64例及胃癌患者血清50例中,cagA^+ Hp的感染率分别为29.7％和62％,胃癌患者cagA^+ Hp的感染率明显高于正常人(P<0.01)。 结论:我们建立的检测血清抗CagA抗体的DIGFA和ELISA均具有良好的可重复性;胃癌患者cagA^+ Hp的感染比例明显高于正常人,CagA阳性幽门螺杆菌的感染与胃癌有关,CagA可作为制备防治cagA^+ Hp感染的疫苗的后备抗原。CagA可作为幽门螺杆菌疫苗制备的候选抗原,检测患者血清幽门螺杆菌CagA抗体,有可能为胃癌的发生提供预警作用。
- 李姁君阎小君刘智广苏成芝
- 关键词：纯化
- 咽鼓管表面活性物质中相关蛋白的初步探讨被引量：2
- 1998年
- 目的初步探讨具有活性的咽鼓管表面活性物质相关蛋白，为人工合成咽鼓管表面活性物质，提供理论依据。方法杂色豚鼠３５只活杀断头，生理盐水冲洗咽鼓管，收集冲洗液。应用氯仿／甲醇萃取分离为磷脂和蛋白部分，蛋白部分应用高效液相色谱（ＨＰＬＣ）进行分离、纯化，所得各组分采用可控闭泡式表面张力测定仪进行体外表面活性测定。并将活性组分进行ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）初步分析。结果亲水性蛋白质经ＨＰＬＣ分离，得到Ａ、Ｂ两个组分，测表面活性，Ａ、Ｂ组分γｍａｘ、γｍｉｎ明显小于生理盐水，Ｓ明显大于生理盐水；而将Ａ、Ｂ组分分别与磷脂组合，则其γｍａｘ、γｍｉｎ、Ｓ均与原液无明显差异。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ凝胶电泳分析：Ａ组分仅一种蛋白，分子量为６１．８ｋＤ，而Ｂ组分蛋白分别由１７．５ｋＤ、５５．５ｋＤ、６７ｋＤ组成。结论在咽鼓管表面活性物质中有一种分子量为６１．８ｋＤ的亲水蛋白质发挥着重要的降低表面张力的活性作用，同时对咽鼓管表面活性物质单分子膜的稳定性起着不可缺少的作用。
- 冯立宁陈文弦姜斌刘智广
- 关键词：咽鼓管表面活性物质相关蛋白
- 牙龈卟啉菌膜泡中牙龈毒素的纯化和毒理学研究被引量：3
- 1996年
- 牙龈毒素是牙龈卟啉菌（ｐｏｒｐｈｙｒｏｍｏｎａｓｇｉｎｇｉｖａｌｉｓ，Ｐｇ）所独有的多功能蛋白毒性酶。本实验采用高效液相色谱法提取了ＰｇＷ５０膜泡中的牙龈毒素并用ＭＴＴ法观察了其对Ｌ９２９细胞的毒理学。结果显示，牙龈毒素属半胱氨酸类蛋白酶，天然状态下分子量为２７８００，有一个１０９００的亚基；二硫基苏糖醇（ＤＴＴ）、Ｃａ２＋对其有增强活性作用，含硫基团蛋白酶抑制剂（ＴＬＣＫ）、乙二胺四乙酸（ＥＤ－ＴＡ）对其有抑制作用，最适ｐＨ值在７．５。纯化的牙龈毒素在１０μｇ／ｍｌ时，对Ｌ９２９细胞即有明显的抑制作用。本研究提示，膜泡所携带的毒力成分对于增强和扩展细菌对宿主组织的破坏有非常重要的作用。
- 倪龙兴史俊南刘智广
- 关键词：牙龈细胞毒作用毒理学
- 流式细胞仪国产鞘液的研制被引量：6
- 2000年
- 曹云新程司堃刘智广张晓楠
- 关键词：流式细胞仪
- DNA测序中去除过量链终止剂的方法比较被引量：1
- 2000年
- 程司堃曹云新刘智广
- 关键词：DNA测序纯化
- 血浆游离氨基酸总量的快速测定方法被引量：3
- 1993年
- 血浆中游离氨基酸的水平与肝病、创伤、肿瘤及营养状况等密切相关,测定其含量可为这些疾病的临床诊断、治疗监测以及营养水平的评价提供依据。血浆游离氨基酸总量通常采用测定氨基氮间接 反映其含量,或用氨基酸分析仪测定。前者操作繁琐,测定时间长;后者需要专门的仪器很难普及应用。我们应用可见光分光光度计,建立了一种简单、快速、实用的血浆游离氨基酸总量测定方法,用一般比色计即可进行测定。
- 刘智广管文贤
- 关键词：血浆氨基酸
- 高效凝胶色谱一步法制备级纯化单克隆抗体被引量：4
- 1995年
- 作者采用ＰｈａｒｍａｃｉａＳｅｐｈａｃｒｙｌＳ—３００凝胶色谱柱，建立了ＩｇＧ类ＭｃＡｂ的一步法制各级纯化方法。该法是将ＭｃＡｂ腹水直接上样，用ｐＨ７．４１０ｍｍｏｌ／ＬＰＢＳ洗脱（流速０．５ｍｌ／ｍｉｎ），即得到纯化的ＭｃＡｂ。一次上样量４０～５０ｍｌ腹水，回收率为８５％－９０％．整个纯化周期４ｈ。纯化的ＭｃＡｂ经ＳＤＳ—ＰＡＧＥ测定，纯度＞９０％，免疫组化ＡＢＣ法测定活性为１：８００００（７．８×１０－１１ｍｏｌ／Ｌ）。该法操作简单、快速，只要有一台核酸／蛋白检测仪，便可进行制备级水平的纯化。
- 刘利刘智广刘成刚陈志南隋延仿徐力青
- 关键词：单克隆抗体纯化
- 抗肝癌抗巨噬细胞双功能抗体对荷人小鼠的抑瘤作用
- 1996年
- 抗肝癌抗巨噬细胞双功能抗体对荷人小鼠的抑瘤作用王茜王文亮陈志南刘智广刘成刚米力徐力青肝癌对化学药物治疗及放射治疗均不敏感。近年来，许多学者致力于肝癌导向治疗的研究。双功能抗体（ＢｓＡｂ）能同时识别两种抗原，将药物、毒素或细胞毒性细胞直接射向瘤细胞，因...
- 王茜王文亮陈志南刘智广刘成刚米力徐力青
- 关键词：肝肿瘤巨噬细胞抑瘤作用
- 用氨基酸分析仪快速测定血清中酪氨酸和苯丙氨酸的含量
- 1991年
- 测定血清中酪氨酸(Tyrosinc,Tyr)和苯丙氨酸(Phenylalanine,Phe)的含量,对先天性氨基酸代谢缺陷和肝性脑病等疾病的诊断、治疗及研究有一定临床意义。
- 刘智广陈镔鍑
- 关键词：酪氨酸苯丙氨酸血清
