刘晓
- 作品数：11 被引量：51H指数：4
- 供职机构：中国农业科学院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划中央级公益性科研院所基本科研业务费专项中国农业科学院院长基金更多>>
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- 城市污泥发酵产物对沙质潮土土壤质量的影响
- 以小麦-玉米轮作体系下的沙质潮土为研究对象，选用经无害化城市污泥发酵后的产物，通过2013-2015年田间定位试验，研究了不同城市污泥发酵产物施用量对土壤肥力、酶活性和微生物群落组成的影响，以期为城市污泥资源化利用提供理...
- 刘晓
- 关键词：城市污泥发酵产物土壤质量
- 文献传递
- 影响猪体细胞克隆胚胎生产效率因素的研究
- 猪的体细胞克隆在农业和医学领域具有巨大的应用前景，尤其体现在作为研究人类疾病的动物模型、人类异种器官移植方面。本研究利用屠宰场猪卵巢，对体细胞克隆胚胎生产中的一系列相关因素进行研究，为转基因克隆猪的生产奠定了基础。结果如...
- 刘晓
- 关键词：动物胚胎学细胞克隆生产效率发育影响
- 文献传递
- 实验用小型猪胎儿成纤维细胞和骨髓间充质细胞为核供体生产转基因克隆胚胎
- 2007年
- 目的比较不同类型体细胞对生产转基因克隆胚胎效率的影响。方法利用脂质体介导的方法将质粒pEGFP-N1转染到五指山小型猪胎儿成纤维细胞和骨髓间充质细胞,经过G418筛选后均获得了阳性细胞株。然后分别以两种类型转基因细胞以及未转基因细胞为核供体进行体细胞核移植,比较不同类型供体细胞克隆胚胎的囊胚发育率。结果胎儿成纤维细胞和骨髓间充质细胞克隆胚的囊胚发育率差异不显著(P>0.05,8.3%vs.7.1%);转基因胎儿成纤维细胞(9.6%)和转基因骨髓间充质细胞(9.9%)克隆胚胎的囊胚发育率差异不显著(P>0.05,9.6%vs.9.9%);每一种类型供体细胞转基因与否对克隆胚的囊胚发育率无影响(P>0.05)。结论通过体细胞核移植技术,小型猪骨髓间充质细胞与胎儿成纤维细胞均可有效地生产转基因囊胚。
- 潘登科潘求真牟玉莲万荣刘吉郑茂恩刘晓张莉冯书堂
- 关键词：小型猪骨髓间充质细胞体细胞核移植绿色荧光蛋白
- 曲古抑菌素(Trichostatin)A对猪卵母细胞体外成熟及孤雌胚胎发育能力的影响被引量：5
- 2008年
- 曲古抑菌素A(Trichostatin A,TSA)是一种组蛋白去乙酰化抑制剂,用TSA处理鼠核移植胚胎可显著提高胚胎的囊胚率。检验TSA对猪卵母细胞体外成熟以及孤雌胚胎发育的影响。在猪卵母细胞体外成熟液及胚胎培养液中添加TSA,比较不同浓度TSA对卵母细胞成熟的影响,不同浓度TSA对孤雌胚胎发育能力的影响以及TSA处理不同时间对孤雌胚胎发育能力的影响。结果发现:(1)5 nmol/L TSA处理对卵母细胞体外核成熟无显著影响,却显著提高了卵母细胞孤雌胚胎的卵裂率和囊胚率(P<0.05);(2)50 nmol/L TSA处理显著提高了孤雌胚胎的卵裂率及囊胚率(P<0.05);(3)50 nmol/L TSA处理24 h能显著提高胚胎的卵裂率及囊胚率(P<0.05,82.1%±2.6%和37.4%±3.1%)。结果表明TSA对猪卵母细胞的体外成熟及孤雌胚胎发育具有显著的促进作用。5 nmol/L的添加量对卵母细胞的体外胞质成熟具有促进作用;胚胎培养基中添加50 nmol/L TSA处理24 h能提高孤雌胚胎的发育能力。
- 刘晓潘登科陈扣扣冯冲张卫红郑茂恩龙川冯书堂杨博辉
- 关键词：TSA卵母细胞体外成熟孤雌胚胎
- 体细胞核移植生产转基因牛胚胎的研究被引量：1
- 2008年
- 为了优化利用体细胞核移植生产转基因牛早期胚胎的体系,以携带绿色荧光蛋白-新霉抗性双标记基因的pMSCV质粒转染的胎牛耳成纤维细胞为供体,以体外成熟的牛卵母细胞为受体构建克隆胚,研究供体细胞的传代次数对转基因胚的影响和重构胚在不同电场条件下(电场强度、直流电脉冲次数)融合效率及其在不同体外培养系统中的发育效果。结果表明:传代5次的细胞做核供体较有利于转基因胚的发育;在电场条件为电场强度1.6 kV/cm、直流脉冲1次的融合率最高;负压单层细胞共培养体系中的转基因囊胚发育率较好,与未转基因体细胞核移植胚的发育相比无显著差异(P>0.05)。
- 邓守龙刘晓曹文广王安江
- 关键词：体细胞核移植转基因体外培养
- 一种复合蛋白饲料及其制备方法
- 本发明涉及一种复合蛋白饲料及其制备方法，该复合蛋白饲料以豆渣，葡萄渣，苹果渣为发酵原料，接种酿酒酵母菌，乳酸杆菌和纤维素酶，通过发酵获得。发酵所得的复合蛋白饲料，其粗蛋白，粗脂肪含量明显增高，灰分纤维素含量明显降低，动物...
- 王晓力王永刚朱新强王春梅张茜路远汪晓斌刘晓
- 电融合仪BLS在猪卵母细胞孤雌激活中的应用被引量：1
- 2007年
- 目的建立并优化BLS细胞融合仪在猪孤雌胚体外生产中的使用条件,同时为克隆胚的生产提供数据参考。方法以体外成熟的猪卵母细胞为研究对象,研究了不同的电场强度、脉冲时程和脉冲次数对猪卵母细胞电激活效果及其对孤雌胚发育率的影响。结果电激参数(1.2 kV/cm、100μs、2次脉冲)能够得到较高的卵裂率和囊胚率(70%、30%左右);BLS细胞融合仪是一种经济高效的胚胎激活仪。
- 刘晓张庆桥潘登科陈扣扣张卫红冯冲冯书堂
- 关键词：孤雌激活
- 体细胞核移植生产转ω-3脂肪酸去饱和酶基因sFat-1克隆猪被引量：26
- 2009年
- 转ω-3脂肪酸去饱和酶基因猪在优质猪培育及研究ω-3不饱和脂肪酸预防心血管和癌症疾病中的作用方面有着重大的应用．本研究首次通过体细胞核移植制备了转线虫ω-3脂肪酸去饱和酶基因sFat-1猪．将sFat—1基因转染到大白猪胎儿成纤维细胞，获得转基因阳性细胞克隆，然后以转基因细胞为核供体、体外成熟的猪卵母细胞为核受体构建克隆胚胎，胚胎体外培养或进行移植．先后移植了1889枚1-4细胞期克隆胚胎到10头受体母猪的输卵管内，28天B超检测9头受体母猪妊娠（90％），7头妊娠足月（70％）分娩产下21头仔猪，体细胞克隆猪的效率为1．1％（出生仔猪／移植胚胎）．体细胞克隆猪效率的提高，主要是对克隆胚胎的移植环节进行了改进，比较了受体母猪排卵状况对胚胎移植效率的影响．当受体母猪卵泡发育处于即将排卵或正在排卵阶段，能够获得较高的妊娠率和妊娠足月率（100％），而排卵后移植妊娠足月率为0％．对健康存活15头克隆猪进行了PCR和Southern检测，证实13头为转基因猪，转基因阳性率为87％．RT—PCR检测13头转基因猪，12头表达sFat—1基因．以上结果表明，利用优化的体细胞转基因结合核移植技术，可以成功地批量生产转sFat-1基因的克隆猪．
- 潘登科张莉周艳荣冯冲龙川刘晓董恩球王树臣万荣张健陈红星
- 关键词：体细胞核移植转基因猪
- 体细胞核移植生产转ω-3脂肪酸去饱和酶基因(sFat-1)的猪胚胎被引量：7
- 2009年
- 本研究通过脂质体介导的方法将来源于线虫C.Briggsae的ω-3脂肪酸去饱和酶基因(sFat-1)转染至大白猪胎儿成纤维细胞。采用600μg.mL-1G418药物浓度,经连续10 d筛选及PCR、RT-PCR鉴定,获得11个转基因阳性细胞克隆。以体外成熟42 h的猪卵母细胞与转基因细胞构建重构胚。经体外培养后观察,转基因克隆胚胎与非转基因胚胎的卵裂率(76.6%±4.1%vs.81.6%±3.1%)和囊胚率(10%±1.97%vs.9.7%±1.4%)均无显著差异(P>0.05)。采用放线菌酮进行化学二次激活时,胚胎的囊胚率显著高于采用电二次激活胚胎(20.6%±0.89%vs.10%±1.97%,P<0.05),但二者的卵裂率并无显著差异(72.4%±4.96%vs.76.6%±4.1%,P>0.05)。研究表明,通过脂质体介导的方法,可以获得转sFat-1基因大白猪胎儿成纤维细胞系;以该细胞系为核供体构建的转基因克隆胚胎与非转基因克隆胚胎的发育能力无显著差异;二次激活采用放线菌酮进行化学激活能够显著提高胚胎的囊胚发育率。
- 冯冲周艳荣龙川刘晓陈红星潘登科杨博辉
- 关键词：胎儿成纤维细胞体细胞核移植
- 小型猪生长激素基因启动子区SNPs分析被引量：7
- 2009年
- 利用PCR-SSCP方法检测4种小型猪(五指山猪、巴马猪、香猪和藏猪)和2种中大型猪(达兰猪和长白猪)生长激素(GH)基因的单核苷酸多态性。发现小型猪中有3处碱基突变发生在5′-调控区,对基因型和等位基因频率进行分析,4种小型猪生长激素5′-侧翼区基因位点中,等位基因A和D为优势等位基因,与达兰猪和长白猪中的分布差异显著(P<0.05)。以上结果表明猪品种间的体型差异可能与GH基因5′-调控区的基因突变和前导肽中的氨基酸变异有关。
- 郑茂恩潘登科冯书堂刘晓叶绍辉浦亚斌何晓红赵倩君关伟军马月辉
- 关键词：小型猪生长激素
