刘双双 作品数:23 被引量:51 H指数:5 供职机构: 浙江大学医学院 更多>> 发文基金: 浙江省教育厅科研计划 中央高校基本科研业务费专项资金 浙江省分析测试科技计划项目 更多>> 相关领域: 生物学 文化科学 医药卫生 自动化与计算机技术 更多>>
基于双光子显微镜技术的脑微血栓动物模型的建立与评价 被引量:5 2018年 利用正置双光子显微镜系统和荧光探针标记技术,构建脑深部微血管血栓动物模型。麻醉小鼠,制作活体小鼠颅骨开窗样本,尾静脉注射血浆标记物fluorescein isothiocyanate-dextran(FITC-dextran),通过z序列扫描检测脑内血管系统的三维分布;通过飞秒激光定点照射脑内目标血管建立微血栓动物模型;利用线扫描测量目标血管形成血栓后的血流速度,评价微血栓形成的效果。通过双光子显微镜可以探测到脑内500μm处的血管分布和走向,图像清晰且信噪比高;通过光刺激能够在脑内形成稳定的微血栓;微血栓形成后血流速度明显变慢。利用双光子显微镜诱导微血栓技术初步建立,为基础研究和医药应用提供了微血栓动物模型。 刘双双 尹伟 肖桂凤 宣君丽关键词:微血管 血栓 血流速度 倒置激光共聚焦显微镜的共享使用与维护 被引量:5 2015年 为给科研人员和仪器管理者提供系统、直观的激光共聚焦显微镜的使用与维护方法,介绍了Olympus倒置激光共聚焦显微镜与活细胞工作站(IX81-FV1000)的配置、软硬件组成和技术参数,样品制备要求,单光子、活细胞图像采集常用操作规程,共享成效、日常维护和管理等方面。浙江大学医学院公共技术平台的倒置激光共聚焦显微镜实行开放共享,近三年来使用率高,共享效果好。根据仪器使用经验总结出了一些获得高分辨率图像的方法,供大家探讨。 尹伟 肖桂凤 刘双双 吴航军 孙启才关键词:共聚焦显微镜 研究生大型仪器操作能力培养的探索和实践 2022年 文章以浙江大学医学院公共技术平台为例,从制度建设和组织保障、综合培养体系建设等方面阐述如何推动和实施研究生的大型仪器操作能力培养,如何实现共享平台大型仪器的高效利用和研究生培养的有机结合。实践表明,提升研究生的大型仪器操作能力,不仅显著提高大型仪器的使用效率和开放共享水平,而且助推研究生高水平科研产出,促进科研高水平和高质量发展。 方三华 杨丹 刘丽 黄莹莹 刘双双 肖桂凤双光子显微镜技术在脑微循环研究中的应用 被引量:2 2021年 双光子显微镜突破传统光学显微镜和激光扫描共聚焦显微镜的局限,应用双光子吸收理论,采用飞秒脉冲激光技术,深入组织内部非线性激发荧光。双光子显微镜具有穿透能力强和光毒性小的特性,可实现活体动物脑内微循环系统的长时程可视化观测,对研究动物大脑皮层微循环网络结构以及血流灌注和血氧代谢特征具有独特优势。近年来双光子显微镜技术不断迭代发展,其应用不断拓展,利用双光子显微镜可实现软脑膜下单根微血管血流信号的检测及光化学操控,为缺血性脑血管疾病和阿尔兹海默症发病机制的基础和临床研究开辟了有价值的微循环检测窗口。从双光子显微镜技术的成像原理入手,介绍其技术特点和进展,并从量化血流动力学变化、测量氧分压、检测白细胞-内皮细胞相互作用和建立脑中风模型4个方面概述应用现状,分析存在的问题并提出解决对策。 刘双双 王君 尹伟 娄绘芳 沈逸关键词:脑微循环 随机光学重构超高分辨显微镜的使用研究与共享管理 2021年 随机光学重构超高分辨成像技术(STORM)采用基于光控荧光分子的单分子定位算法,横向和轴向分辨率分别达到~20 nm和~50 nm。本文结合使用和管理经验,对超高分辨STORM显微镜的原理、软硬件组成和技术参数、样品制备方法、超高分辨图像采集的常用操作流程、环境要求、日常维护、共享平台管理、STORM显微镜的应用等方面加以介绍,并对进一步提高STORM时空分辨率进行展望。 尹伟 刘双双 方三华关键词:共享管理 基于双光子技术的脑血管结构和功能检测方法的建立 被引量:1 2021年 双光子显微镜是结合了激光扫描共聚焦显微镜和双光子激发技术的一项新技术,具有探测能力强、光漂白小的特点,在活体动物脑血管研究中具有特殊优势。该文介绍了双光子显微镜的基本原理和组成,并从仪器开机、操作流程、注意事项等方面介绍了双光子显微镜的使用方法。详细阐述了双光子显微镜在脑血管研究中检测方法的建立和注意事项。具体包括观察脑血管立体分布和增值,量化血流速度,检测白细胞与内皮细胞的相互作用,构建脑血栓动物模型。建立了利用双光子显微镜检测活体动物脑血管平台,为脑疾病基础研究和创新药物开发提供了先进的技术手段。 刘双双 方三华 尹伟 娄绘芳 陈晓娟关键词:脑血管 血流速度 血栓 大型仪器共享平台运行机制综合创新探析 被引量:4 2023年 大型仪器不仅是高校科学研究和社会服务的物质基础,也是高校研究生实验技能培养的重要载体。推进大型仪器共享平台运行机制创新是服务于高校创新驱动发展战略的重要举措。文章以浙江大学医学院大型仪器共享平台为例,阐述平台在组织构架、大型仪器调研和论证、研究生操作技能培养、实验技术队伍建设、安全管理等五个方面的创新举措。该校通过综合创新,建立高效、安全的大型仪器共享平台运行体系,提升平台服务能力和水平,促进平台内涵式发展,为高校科学研究、研究生培养和社会服务提供了良好的技术支撑。 方三华 李艳伟 黄莹莹 刘双双蔡司Axio Scan.Z1全自动数字玻片扫描系统的应用 被引量:1 2019年 全自动切片扫描技术优势大,应用范围广,已逐步成为形态学和病理学研究的一种变革性辅助手段。本文介绍了蔡司AxioScan.Z1切片扫描系统的配置参数(光学系统、物镜、分辨率、扫描速度、相机等)和成像特点,阐述了蔡司AxioScan.Z1在大批量全组织扫描、组织病理学、神经生物学等研究领域的重要应用。总结了仪器在使用过程中遇到的问题,分析了原因并提出解决方案,为科研工作提供更好的共享服务。 尹伟 刘双双 郑艳榕 张翔南构建一流公共仪器平台的关键与对策 被引量:8 2015年 构建大型仪器设备共享平台是当前各高校提高仪器设备使用率的主流趋势,也是确保教学和科研工作的重要物质保障。医学院结合公共技术平台近3年来仪器共享管理工作的探索与实践,就有效管理组织和机构、信息化开放预约管理系统、开展培训工作、实验队伍建设等,对构建一流大型公共仪器平台的关键环节进行了分析和探讨。并针对存在的问题,从争取稳定的投入资金及项目支持、完善效益评价体系、加强高层次人才队伍建设、加强大型仪器设备维修管理等方面提出了发展建议,对全国公共技术平台的建设可供参考。 尹伟 肖桂凤 刘双双 周小峰 赵月琴关键词:共享平台 利用双光子显微镜检测活体动物脑内Ca^(2+)动态变化 被引量:3 2014年 利用正置双光子显微镜系统和荧光探针标记技术,观察脑内Ca2+分布,建立测量活体动物脑内Ca2+动态变化的实验方法。制作活体动物颅骨开窗样本,脑内负载Ca2+标记物Oregon Green 488 BAPTA-1和星型胶质细胞标记物Sulforhodamine 101,利用双光子显微镜分别检测神经元和星型胶质细胞内Ca2+分布和动作电位引起的Ca2+瞬变。结果显示双光子显微镜可探测到脑内250μm处荧光信号,图像清晰且信噪比高,并能实时检测神经元和星型胶质细胞内Ca2+信号的动态变化。活体脑内Ca2+检测技术平台的建立为基础研究和医药应用提供了在体实验依据。 刘双双 廖美华 尹伟 林赵肖楠 肖桂凤关键词:星型胶质细胞