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旋转发生器培养扩增人皮肤成纤维细胞被引量：1: 2011年; 目的:研究旋转发生器扩增人皮肤成纤维细胞的可行性。方法:利用组织贴壁法从人皮肤中分离出人真皮成纤维细胞(hDFBs),使用DIO标记细胞后结合微载体在旋转发生器(RCCS)中培养,细胞贴附微载体的状况使用荧光显微镜、扫描电镜观测。并且检测细胞周期和分析细胞群体倍增时间,以比较微重力培养与平面培养的体外增殖能力差异。对照组细胞按常规平面培养。结果:在旋转发生器的微重力培养体系中,人成纤维细胞能快速贴附到微载体表面,在培养过程中达到很大的细胞密度,旋转发生器培养的细胞倍增时间为(2.99±0.50)d,对照组为(3.43±0.42)d(P<0.05);旋转发生器培养细胞增殖指数48.2±4.3,对照组35.2±3.4。结论:利用生物反应器和微载体悬浮培养人皮肤成纤维细胞,是大量制备皮肤组织工程种子细胞的一种有效方法。; 晁洋倪华兰青艳李娟王卫华金岩; 关键词：微载体人真皮成纤维细胞

去势大鼠骨髓基质干细胞分离培养鉴定及增殖特性的变化被引量：1: 2009年; 目的:对去势大鼠骨髓基质干细胞(BMSCs)进行分离培养鉴定,研究去势后大鼠BMSCs增殖特性的变化.方法:以去势大鼠作为绝经后骨质疏松症模型,分为去势组和假手术组.密度梯度离心分离骨质疏松大鼠的BMSCs,利用BMSCs的多向分化培养及流式细胞仪分析对去势大鼠BMSCs进行鉴定,倒置相差显微镜观察细胞增殖情况,MTT法测量两组BMSCs增殖能力.结果:去势组大鼠体质量、雌二醇及整体股骨骨矿物质密度(BMD)与假手术组比较差异有显著性(P<0.01),诱导培养后两组大鼠BMSCs油红O染色和VonKossas染色实验阳性,流式细胞仪显示骨髓间充质细胞具有的表面抗原CD29和CD44阳性而造血干细胞具有的表面抗原CD45和CD133为阴性.MTT法测定在7d内,去势组细胞的增殖速率要高于假手术组.结论:成功建立了大鼠骨质疏松模型.采用成骨诱导和成脂诱导也进一步证实了所分离的细胞为具有多向分化潜能的BMSCs.去势后3mo大鼠BMSCs增殖能力增强.; 章斌丁寅曹猛倪华; 关键词：卵巢切除术骨髓基质干细胞体外培养增殖

人牙周膜干细胞的分离培养及生物学特性研究被引量：8: 2008年; 目的:分离筛选人牙周膜干细胞,研究其生物学特性并进行初步鉴定。方法:采用STRO-1为标记物以免疫磁珠分离筛选人牙周膜干细胞,观察细胞生长及克隆形成情况,流式细胞仪细胞周期、细胞表型分析,免疫细胞化学染色技术检测STRO-1、Vimentin表达,并测定细胞体外多向分化能力。结果:免疫磁珠法可获得人牙周膜干细胞,细胞具有克隆形成能力,增殖速度低。细胞周期分析大多数细胞处于G0/G1期,为慢周期性;细胞表型分析证实CD146、CD44高表达,CD34、CD45低表达。STRO-1及Vimentin均为阳性染色,矿化诱导和成脂诱导证实该细胞具有多向分化能力。结论:免疫磁珠法是有效的分离纯化牙周膜干细胞的方法。所分离细胞具有干细胞的细胞周期、表型特点及多向分化能力。; 潘峰丁寅王光赵宇倪华; 关键词：干细胞人牙周膜干细胞免疫磁珠免疫细胞化学

使用旋转式生物反应器体外扩增人表皮细胞被引量：1: 2011年; 目的:使用Cytodex-3微载体和高截面纵横比的旋转式生物反应器容器作为培养系统大规模扩增人表皮细胞(hECs)。方法:使用中性蛋白酶和胰蛋白酶-EDTA两步骤法从人皮肤中分离出人表皮细胞,使用DIL标记细胞后结合微载体后在旋转式生物反应器(RCCS)中培养,细胞贴附微载体的生长状态使用倒置显微镜,扫描电镜观测。并且分析细胞群体倍增时间来比较微重力培养与平面培养的体外增殖能力差异。结果:在旋转式生物反应器的微重力培养体系中,人表皮细胞能快速贴附到微载体表面,在培养过程中达到很大的细胞密度,并且表现出很强的增殖能力和细胞活性。结论:使用旋转式生物反应器和微载体悬浮培养人表皮细胞,是大量制备皮肤组织工程种子细胞的一种有效方法。; 晁洋倪华兰青艳李娟王卫华金岩; 关键词：微载体人表皮细胞

旋转式生物反应器培养扩增人皮肤成纤维细胞的特性研究: :使用自体细胞构建的组织工程皮肤是快速有效修复各类皮肤缺损的重要方法,而足够数量的种子细胞是成功构建组织工程皮肤的关键.尝试使用Cytodex-3微载体和高截面纵横比的旋转式生物反应器(RCCS)容器作为培养系统,大规模...; 晁洋倪华李娟刘源; 关键词：人真皮成纤维细胞

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倪华