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香蕉线条病毒广东分离物基因组序列测定和特征分析: ＜正＞由香蕉线条病毒（Banana streak virus,BSV）引致的香蕉线条病毒病在中国大陆首次由费继锋等（2001）发现并报道,饶雪琴等（2005）利用 PCR 检测法在华南地区不同香蕉种芽中检测出 BSV ...; 谢丽君何云蔚陈秀赵芹阮小蕾李华平; 文献传递

香蕉线条病毒ORFⅡ基因的原核表达及抗体制备被引量：2: 2009年; ORFⅡ gene of Banana streak virus GuangDong isolate(BSV-GD) was amplified from a BSV-GD recombinant plasmid by PCR,and the gene was expressed by being cloned into prokaryote expression vector pET-28b(+).The fusion protein was about 16.5 kDa in size and was soluble with SDS-PAGE analysis.The purified protein was obtained by using the histidine labeling kit of N-terminus of protein.The antiserum was obtained by immunizing healthy rabbits with the purified protein.Western blot and ELISA analysis showed that the special antiserum of BSV possessed high titer,which was tested as 1∶51 200.The study was a base for further research on BSV including ORFⅡ gene function and virus detection.; 何云蔚陈秀阮小蕾刘福秀李华平; 关键词：香蕉生产抗体制备原核表达 ORF

噬菌体对水稻细菌性条斑病的防治效果研究: 本试验用4个水稻品种研究了噬菌体对水稻细菌性条斑病的防治效果。结果表明:对品种采用针刺法接种时,噬菌体对病斑的扩展无明显抑制作用;而采用喷雾接种病菌时,在接种前、后10d喷施噬菌体,都表现出一定的防效,以接种病菌前5d施...; 成国英涂立超何云蔚孙新城曹一菲; 关键词：水稻细菌性条斑病噬菌体防效; 文献传递

水稻瘤矮病毒基因组第11片段编码一个RNA沉默抑制子被引量：2: 2008年; 水稻瘤矮病毒(Rice gall dwarf virus,RGDV)是中国及东南亚国家水稻上的一个重要病原,但有关RGDV与植物细胞互作的分子机制仍不清楚.本研究利用农杆菌共渗透的方法鉴定了RGDV基因组S11片段编码蛋白Pns11在转GFP(green fluorescent protein)基因本生烟纯合系(Nicotiana benthamiana line16c)中的抑制子活性.在该系统中,Pns11能抑制由GFP正义RNA介导的局部和系统沉默,并能灭活RNA沉默信号或阻断沉默信号的移动.体外表达Pns11能增强马铃薯X病毒(Potato virus X,PVX)在本生烟上的致病性.该抑制子在局部和系统沉默抑制实验中能降低siRNA的累积,但不能完全消除其存在.结果表明,Pns11干扰了RNA沉默途径的起始阶段.; 刘福秀赵芹阮小蕾何云蔚李华平; 关键词：基因沉默抑制子

香蕉线条病毒侵染性克隆的构建: 本文根据香蕉线条病毒广东分离物的基因组序列设计引物，分别克隆了病毒基因组第6404～779bp和4784～2300bp两段序列，分别命名为BSV-A,BSV-T。将BSV-A和试验室先前克隆的BSV-17(包含第5133...; 何云蔚阮小蕾陈秀刘福秀李华平; 关键词：香蕉线条病毒侵染性克隆重组质粒基因序列

望江南中核糖体失活蛋白新基因CassinⅠ的克隆及特征分析被引量：5: 2008年; 【目的】克隆在植物抗病虫过程中具有重要作用的核糖体失活蛋白新基因,为该类蛋白基因功能研究和有效利用创造条件。【方法】通过分析多种不同来源的植物核糖体失活蛋白的氨基酸序列,据其保守区域设计1对植物通用简并引物P1和P2,对药用植物望江南基因组进行PCR扩增,获得一种新的RIP基因片段。通过RACE法,获得了其全长cDNA序列-CassinⅠ。【结果】CassinⅠ基因全长为882bp,其推导的氨基酸序列与葫芦科两个代表核糖体失活蛋白β-luffin和Trichosanthin(TCS)的相似性分别为58.2%和34.7%,与GenBank中其它核糖体失活蛋白的序列无显著相似性。多重序列比对发现:CassinⅠ有9个氨基酸残基与TCS的N-糖苷酶活性位点的残基完全相同,另外两个残基发生了变化。所有的活性位点都在P1/P2扩增区段内。【结论】首次在望江南中克隆和报道一种新的核糖体失活蛋白基因,为进一步研究该基因的功能、并应用于作物转基因抗病虫害育种研究奠定了基础。; 阮小蕾刘丽芳何云蔚刘福秀李华平; 关键词：望江南核糖体失活蛋白基因克隆

湖北省柑桔裂皮类病毒的检测及序列分析被引量：2: 2007年; 以表现柑桔裂皮病典型症状的罗伯逊脐橙为材料,采用双向电泳、RT-PCR和RNA斑点杂交及组织印迹杂交的方法,对柑桔裂皮类病毒进行了检测,结果表明RT-PCR和2种核酸杂交技术均可用于该类病毒的有效检测。对该类病毒全长RNA的RT-PCR产物进行了克隆和序列分析,该分离株（命名为CEVd-HB分离株）的全长RNA由371个核苷酸组成,与已报道的其它不同来源分离株相似性为90%～99%。; 何云蔚洪霓徐文兴王国平; 关键词：克隆

香蕉线条病毒侵染性克隆构建和遗传多样性分析: 本文通过构建香蕉线条病毒(Banana streak virus，BSV)的侵染性克隆，为进一步分析其基因组结构和功能奠定基础。此外，实验中制备的BSV-GD分离物抗血清，也助于该病害的检测和BSV-ORFⅠ、ORFⅡ编...; 何云蔚; 关键词：香蕉线条病毒侵染性克隆原核表达; 文献传递

桃潜隐花叶类病毒中国分离株P_3的克隆与序列分析被引量：7: 2005年; 本研究以提取的类病毒cRNA为模板,采用RT-PCR方法,从5株表现明显花叶症状的'雨花露'桃树上检测到桃潜隐花叶类病毒(PLMVd),并对其中的样品P3通过2次RT-PCR扩增,然后分别将扩增产物回收、克隆测序,确定了该分离株(命名为PLMVd-P3分离株)的全长核苷酸序列,其cDNA分子全长为337 nt,这与已经报道的PLMVd典型分离株基因组大小相似.序列比较分析结果表明,该分离株与已经报道的不同地区来源的其它分离株相似性为90%～96%.; 徐文兴王国平何云蔚洪霓; 关键词：RT-PCR 克隆生物学特性

水稻瘤矮病毒基因组第6片段(S6)序列测定与分析被引量：4: 2007年; 【目的】了解水稻瘤矮病毒(RGDV)基因组结构与功能。【方法】根据已报道的RGDV基因组各片段末端序列及其反向重复特性,采用4轮RT-PCR的方法扩增RGDV基因组第6片段(S6),用生物学软件进行序列分析。【结果】得到了该病毒S6的全序列。S6全长1651bp,G+C含量39.13%,包含一个长的ORF,起始于第25位,终止于第1497位,编码490个氨基酸,分子量为53.3kD。【结论】该蛋白与伤瘤病毒(WTV)的P7的相似性为30.0%,与水稻矮缩病毒(RDV)的P7的相似性为31.7%。这是RGDVS6全序列的首次报道。; 刘福秀阮小蕾何云蔚李华平

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