魏风
- 作品数：3 被引量：2H指数：1
- 供职机构：吉林大学更多>>
- 发文基金：山东省自然科学杰出青年基金中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 噬菌体展示技术在动物病毒抗原表位筛选中的应用
- 抗原表位的筛选和鉴定是抗原分子结构和功能、抗原-抗体反应机制、分子疫苗、分子诊断技术研究的基础,在疫病防制中起着重要作用。噬菌体展示技术是20世纪80年代逐步建立并发展起来的一种用于基因表达与筛选和改造功能性多肽的分子生...
- 王金良魏风庄金秋沈志强
- 关键词：动物病毒抗原表位基因筛选噬菌体展示技术
- 文献传递
- 噬菌体展示技术在动物病毒抗原表位筛选中的应用
- 抗原表位的筛选和鉴定是抗原分子结构和功能、抗原-抗体反应机制、分子疫苗、分子诊断技术研究的基础,在疫病防制中起着重要作用。噬菌体展示技术是20世纪80年代逐步建立并发展起来的一种用于基因表达与筛选和改造功能性多肽的分子生...
- 王金良魏风庄金秋沈志强
- 关键词：噬菌体展示技术动物病毒抗原表位
- 文献传递
- 狂犬病“靶向性”Th表位DNA疫苗的构建与瞬时表达研究被引量：2
- 2012年
- 用RT-PCR扩增BALB/c小鼠P31基因,在不影响氨基酸序列前提下,对序列中461nt NcoⅠ酶切位点进行定点突变;采用定向克隆方法将狂犬病病毒核蛋白、糖蛋白及NS蛋白主要Th抗原表位核苷酸序列替换P31序列中CLIP区域,进行新一轮PCR反应获得带有Kozak调控序列的P31-Th分子,以增加目的基因的表达量,并将含有Kozak序列的P31-Th分子克隆入真核表达载体pCI-neo多克隆位点,通过PCR与限制性内切酶酶切方法进行鉴定;最后将各Th表位表达载体转染COS-7细胞,Western-blot检测目的基因的瞬时表达。测序分析结果表明,BALB/c小鼠P31基因CDS区长648bp,编码215个氨基酸,与Gen-Bank中登录的Ii分子(NM_010545)的核苷酸序列、氨基酸序列均存在多个位点差异;定点突变后获得了P31分子突变体,经PCR及限制性内切酶酶切方法证明,成功构建了携带P31-Th分子的真核表达载体;Western-blot分析证实,各P31-Th分子均在COS-7细胞中获得瞬时表达,且表达的目的产物能够与兔抗P31多克隆抗体发生抗原抗体结合反应。结果表明,作者成功构建了狂犬病病毒主要Th抗原表位的"靶向性"核酸疫苗,为开展在小鼠的免疫学试验奠定了基础。
- 肖跃强管宇谢金文郭广君魏风刘吉山沈志强
- 关键词：定点突变定向克隆
