魏明玉
- 作品数:2 被引量:4H指数:2
- 供职机构:江苏大学生命科学研究院更多>>
- 发文基金:国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域:生物学农业科学更多>>
- 油菜种子含油量相关的脂肪酶基因BnSDP1克隆与表达分析被引量:2
- 2011年
- 通过电子延伸和RACE(cDNA末端快速扩增)克隆得到一个与油菜种子含油量相关的脂肪酶基因,命名为BnSDP1,其开放阅读框为2 472bp,编码分子量为92kD的蛋白,预测等电点为6.75,具有保守的patatin结构域,跨膜域位于N端和中间,序列分析显示BnSDP1拥有GXSXG脂肪酶的基本特征序列GSSVG。利用RT-PCR技术分析发现,在种子发育的成熟期(即脱水期),BnSDP1在低油品系种子中的转录水平高于高油品系,在根、茎、叶、花中均有表达,但在根和叶片中表达量高,在根中尤其显著,且受蔗糖诱导上调表达。
- 魏明玉周佳闫素珍王政谭小力
- 关键词:甘蓝型油菜含油量脂肪酶基因实时定量PCR
- 从萌发的油菜种子中制备脂肪酶被引量:2
- 2011年
- 测定不同萌发期油菜幼苗的脂肪酶活性,采用"盐析→超滤→M-Bondapak-C18柱层析"的工艺路线,建立一种简单且高效的油菜脂肪酶纯化方法。结果表明:通过测定不同培养时间的油菜幼苗的脂肪酶比活力,发现培养6d的油菜幼苗脂肪酶比活力最高,此时期的油菜幼苗适合作为脂肪酶提取的材料;对脂肪酶比活力为1.89U/mg的油菜蛋白粗提物采用盐析法沉淀脂肪酶时,得到脂肪酶的比活力为2.07U/mg,回收率为82.47%;采用截留分子质量为10000D的超滤膜对脂肪酶盐析物进行脱盐和除去小分子杂蛋白处理,得到的脂肪酶的比活力为2.46U/mg,回收率为75.84%;进一步采用M-Bondapak-C18柱层析纯化超滤液,脂肪酶最高比活力为9.14U/mg,回收率为34.13%。所得到的脂肪酶的活性达到了商品化脂肪酶的水平。
- 谭小力魏明玉袁伟伟
- 关键词:脂肪酶盐析超滤柱层析