陈翀
- 作品数:149 被引量:150H指数:6
- 供职机构:徐州医学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金江苏省“六大人才高峰”高层次人才项目江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学农业科学电子电信更多>>
- Blimp-1在小鼠异基因造血干细胞移植后对GVHD的影响
- 陈翀宋旭光张焕新曹江潘彬安立才刘凯歌徐开林
- 关键词:BLIMP-1异基因造血干细胞移植GVHD
- GST-NRP-1融合蛋白的原核表达及纯化被引量:1
- 2015年
- 目的:构建带有GST标签的人NRP-1融合蛋白原核表达载体,在大肠埃希菌(E.coli)中诱导其表达,并进行包涵体的复性及纯化。方法:利用RT-PCR扩增人NRP-1基因,将其克隆至p CR-blunt载体,酶切制备NRP-1基因片段,插入表达载体p GEX-4T-1,生成p GEX-4T-1-NRP-1,转入BL21感受态细胞以IPTG诱导其蛋白的表达。裂解细菌后行Western blot检测GST-NRP-1融合蛋白的表达,表达的包涵体经复性后用Glutathione Sepharose 4B纯化。结果:RT-PCR扩增出NRP-1基因并连入p CR-blunt载体;经亚克隆构建了融合蛋白表达载体p GEX-4T-1-NRP-1。转入BL21感受态细胞后考马斯亮蓝染色检测到GST-NRP-1融合蛋白的表达,经包涵体复性后得到纯化的融合蛋白。结论:成功构建带有GST标签的人NRP-1融合蛋白原核表达载体,为进一步研究NRP-1的结构、功能及其与之相互作用的蛋白奠定了基础。
- 韩正祥张梦瑾徐杰王红梅杜秀平陈翀徐开林
- 关键词:NRP-1原核表达融合蛋白纯化
- 基因工程Treg细胞对小鼠异基因骨髓移植后GVHD和GVL效应的影响被引量:2
- 2010年
- 目的 探讨输注慢病毒载体介导的小鼠基因工程调节性T淋巴细胞(Treg细胞)对小鼠异基因骨髓移植后移植物抗宿主病(GVHD)及移植物抗白血病(GVL)效应的影响.方法 利用慢病毒载体介导,将小鼠叉状头螺旋转录因子(Foxp3)基因转导入Balb/c小鼠的CD4+CD25-T淋巴细胞,即为基因工程Treg细胞.以Balb/c小鼠为供者.C57BL/6小鼠为受者,进行异基因骨髓移植,移植当天受者接受X线直线加速器全身照射.用随机数字表法将受者分为5组,每组10只.(1)单纯照射组:经受者尾静脉输注RPMI 1640培养液0.2 ml;(2)白血病对照组:经受者尾静脉输注供者骨髓细胞5×106个+C57BL/6小鼠T淋巴细胞白血病/淋巴瘤细胞株(EL4细胞)500个;(3)移植对照组:经受者尾静脉输注供者骨髓细胞5×106个+脾细胞5×106个+EL4细胞500个;(4)工程Treg组:经受者尾静脉输注供者骨髓细胞5×106个+脾细胞5×106个+EL4细胞500个+基因工程Treg细胞5×106个;(5)空载体对照组:经受者尾静脉输注供者骨髓细胞5×106个+脾细胞5×106个+EL4细胞500个+空载体转导的CD4+CD25-T淋巴细胞5×106个.每天观察受者存活情况;记录GVHD及白血病的发生情况;各组均于小鼠濒死前取其肝脏、小肠、皮肤、脾脏等组织,进行病理学观察;取长期存活(超过60 d)受者的骨髓细胞,检测嵌合情况.结果 单纯照射组、白血病对照组、移植对照组、工程Treg组和空载体对照组小鼠存活时间分别为(10.3±1.5)d、(20.7±1.9)d、(26.0±4.3)d、(49.0±17.7)d和(24.4±4.1)d,工程Treg组小鼠存活时间明显长于其他各组,差异有统计学意义(P<0.05).白血病对照组小鼠肝、脾组织病理切片均存在白血病细胞浸润表现,移植对照组及空载体对照组小鼠肝脏、皮肤和小肠病理切片存在GVHD病理改变,而工程Treg组长期存活小鼠各组织病理切片结构基本正常,
- 曹江李莉陈翀曾令宇李振宇程海徐开林
- 关键词:移植物抗宿主病移植物抗白血病
- 小鼠造血干细胞移植后移植物抗宿主病与内皮细胞损伤的关系
- 2010年
- 目的 探讨异基因造血干细胞移植后移植物抗宿主病(GVHD)与内皮细胞损伤的关系.方法 以C57BL/6小鼠为供者、Balb/c小鼠为受者,分4组进行异基因造血干细胞移植,每组受者15只:对照组(仅输入磷酸盐缓冲液)、单纯骨髓移植组(仅输入骨髓单个核细胞)、GVHD组(输入骨髓单个核细胞和脾细胞)、GVHD减轻组(在GVHD组基础上加用环孢素A).分别于移植后不同时间观察受者的表现,检测外周血中内皮细胞及组织病理学变化.结果 术后第5天,各组受者均无典型的GVHD表现及组织病理学改变;术后第9天,GVHD组受者出现明显的GVHD的表现及病理学改变,并于15 d内全部死亡.术后第5天,单纯移植组、GVHD组和GVHD减轻组受者的外周血中内皮细胞数分别为(11.51±7.40)、(7.34±1.26)和(7.36±0.16)个/μl,三组间差异均无统计学意义(P>0.05);术后第9天,内皮细胞数分别为(10.49±5.61)、(153.64±35.35)及(47.82±4.69)个/μl,三组间差异均有统计学意义(P<0.05).术后第5天,单纯移植组、GVHD组、GVHD减轻组受者GVHD靶器官组织病理学评分分别为3.33±0.58、4.33±1.53及4.0±1.73,三组间差异均无统计学意义(P>0.05);术后第9天,评分分别为3.33±1.15、10.0及4.33±0.58,三组间差异均有统计学意义(P<0.05);术后第14天,评分分别为2.33±1.25、10.33±2.58和3.33±1.15,三组间差异均有统计学意义(P<0.05).结论 GVHD的发生再次引起内皮的损伤,同时损伤的内皮加重了GVHD.
- 闫志凌贾路许世娟徐开林潘彬宋国梁陈翀曾令宇
- 关键词:造血干细胞移植内皮细胞内皮损伤移植物抗宿主病
- Prdm1基因敲除小鼠的繁育和基因型鉴定被引量:1
- 2012年
- 本研究目的是繁育和鉴定prdm1基因敲除的小鼠,为进一步研究Blimp-1蛋白的功能奠定基础。将所引进的2种转基因纯合子小鼠B6.prdm1flox/flox和B6.Lck-Cre进行饲养并繁殖,繁殖成功后获得第1代小鼠,将第1代小鼠再次进行交配获得基因型为:B6.prdm1wild/wild.Lck-Cre、B6.prdm1wild/wild、B6.prdm1flox/flox.Lck-Cre、B6.prdm1flox/wild.Lck-Cre、B6.prdm1flox/flox、B6.prdm1flox/wild。提取第2代小鼠基因组DNA,应用聚合酶链反应(PCR)扩增Cre和loxp基因片段后琼脂糖凝胶电泳分别检测cre和loxp基因组DNA的大小。取基因型为B6.prdm1flox/flox.Lck-Cre即为条件性基因prdm1敲除小鼠,选择B6.prdm1flox/wild.Lck-Cre、B6.prdm1flox/flox、B6小鼠作为对照,应用磁珠分选脾脏T淋巴细胞和B淋巴细胞,并应用Western blot方法检测Blimp-1目的蛋白。结果表明,2种转基因纯合子小鼠均有繁殖能力,其子代相互繁殖后第2代小鼠分离比例基本符合孟德尔遗传规律,亦可以成功获得较多的prdm1基因敲除小鼠。结论:应用Cre-loxp系统可以成功地获得prdm1基因敲除的小鼠。
- 陆小云陈翀潘秀英曾令宇李振宇宋旭光徐开林
- 关键词:BLIMP-1PRDM1基因敲除
- ADAM10 antagonist as a novel approach to against PTEN mutated T-cell acute lymphoblastic leukemia via inhibition of NOTCH1 and AKT activation
- Mutation of PTEN in T-ALL cells resulted in hyper-activation of PI3K-AKT pathway and often generates resistanc...
- 陈翀马莎王雪徐开林
- 急性移植物抗宿主疾病中CD4+T细胞和CD8+T细胞亚群的动态调节
- 赵恺陈翀潘彬曾令宇李振宇徐开林
- E116.大剂量地塞米松对原发免疫性血小板减少症患者IL-22生成及相关CD4+T细胞亚群的影响
- 陈翀李秀芹曾令宇李振宇潘秀英徐开林
- 文献传递
- TLR4信号通路在多发性骨髓瘤硼替佐米耐药中的作用
- 目的:利用分子生物学及细胞生物学方法,体外实验检测Toll样受体活(Toll like receptors,TLRs)化后对多发性骨髓瘤细胞株硼替佐米(Bortezomib,BTZ)药物敏感性的影响.方法:选取多发性骨髓...
- 姚瑶边月平吴庆运陈翀赵恺徐开林
- 关键词:TOLL样受体多发性骨髓瘤硼替佐米
- 长春瑞滨上调小鼠尾静脉血管内皮细胞Toll样受体4的表达
- 2012年
- 背景:Toll样受体4除与抗感染免疫有关外,在心肌梗死、脑梗死等组织损伤和自身免疫病等非感染性炎症反应中也发挥着重要作用。目的:观察长春瑞滨对小鼠尾静脉血管内皮细胞Toll样受体4表达的影响。方法:取20只BALB/c小鼠,随机分为实验组和对照组,实验组尾静脉注射长春瑞滨,对照组注射生理盐水。结果与结论:注射后48h,实验组小鼠尾静脉血管出现内皮细胞脱落、血栓形成和炎细胞浸润,损伤部位内皮细胞高表达Toll样受体4;对照组小鼠尾静脉血管无明显损伤表现,血管内皮细胞Toll样受体4阴性或弱表达。表明长春瑞滨上调了小鼠尾静脉血管内皮细胞Toll样受体4表达,提示Toll样受体4可能参与了长春瑞滨致静脉血管内皮损伤的发生过程。
- 钱韦韦陈翀曹江高立艳周莹谭迎春李振宇
- 关键词:TOLL样受体4炎症