您的位置： 专家智库 > >

陈桂兰

作品数：10 被引量：12H指数：2
供职机构：泸州医学院心血管医学研究所更多>>
发文基金：国家自然科学基金四川省教育厅重点项目四川省教育厅资助科研项目更多>>
相关领域：医药卫生生物学更多>>

合作作者

文献类型

  • 8篇期刊文章
  • 1篇会议论文
  • 1篇科技成果

领域

  • 8篇医药卫生
  • 2篇生物学

主题

  • 6篇心房
  • 6篇钾通道
  • 5篇心房肌
  • 5篇钙激活
  • 5篇钙激活钾
  • 5篇钙激活钾通道
  • 4篇小电导钙激活...
  • 4篇基因
  • 3篇细胞
  • 3篇基因表达
  • 2篇心房颤动
  • 2篇心肌
  • 2篇心肌细胞
  • 2篇英文
  • 2篇质粒
  • 2篇生理学
  • 2篇基因表达质粒
  • 2篇肌细胞
  • 2篇房颤
  • 2篇表达质粒

机构

  • 10篇泸州医学院

作者

  • 10篇曾晓荣
  • 10篇陈桂兰
  • 10篇杨艳
  • 7篇谭晓秋
  • 5篇刘智飞
  • 4篇毛亮
  • 4篇李涛
  • 3篇裴杰
  • 3篇李畅
  • 3篇李妙龄
  • 2篇白志茹
  • 2篇李鹏云
  • 2篇黄文俊
  • 2篇雷明
  • 2篇井上勋
  • 2篇周文
  • 2篇李涛
  • 1篇文静
  • 1篇魏燕
  • 1篇兰欢

传媒

  • 6篇泸州医学院学...
  • 1篇中华心血管病...
  • 1篇中国应用生理...

年份

  • 2篇2014
  • 1篇2013
  • 1篇2012
  • 1篇2011
  • 3篇2010
  • 2篇2009
共 10 条 记 录，以下是 1-10
全选 清除 导出
排序方式：
慢性心房颤动患者心房肌KChIP2基因mRNA水平的定量检测被引量：2
2009年
目的心房颤动（房颤）是最为常见的快速性心律失常之一。钾通道相关蛋白2（K^＋ channel interacting protein 2，KChIP2）是心肌细胞瞬时外向钾通道的重要辅助亚单位，在Ito发挥正常功能中起着重要的作用。报告采用实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）技术通过对房颤时KChIP2和Kv4．3基因mRNA水平进行定量研究，探讨KChIP2在房颤中的作用和对于瞬时外向钾通道的可能调控机制。方法（1）30例风湿性心脏病患者分为两组：窦性心律组（窦律组）13例，持续性房颤组（房颤组）17例，取其常规切除的右心耳组织作为研究对象；（2）提取心房肌组织总RNA，通过RT-PCR和TA克隆技术构建含有目的基因片段的质粒标准品；（3）以GAPDH为内参照基因，采用SYBR Green Ⅰ法实时荧光定量PCR技术检测持续性房颤和窦律患者KChIP2和Kv4．3基因mRNA水平。结果（1）标准曲线和熔解曲线：标准曲线线性关系良好，相关系数R^2〉0．99。熔解曲线呈明显单峰状，退火温度与预测值基本一致；（2）窦律组和房颤组KChIP2／GAPDH比值分别为0．2200±0．0388、0．1468±0．0452，房颤组KChIP2基因mRNA水平低于窦律组，P〈0．01；窦律组和房颤组Kv4．3／GAPDH比值分别为0．5257±0．1427、0．3946±0．1826，房颤组Kv4．3基因mRNA水平低于窦律组，P〈0．05。结论与窦律患者相比，房颤患者KChIP2基因和Kv4．3基因明显下调，KChIP2和Kv4．3基因下调是房颤时Ito电流下调的分子基础。
谭晓秋杨艳刘智飞白志茹周文裴杰陈桂兰曾晓荣
关键词：心房颤动钾通道基因表达
人心房肌小电导钙激活钾通道在HEK293细胞上的表达与电生理学特性被引量：1
2013年
目的:克隆人心房肌小电导钙激活钾通道亚型2(SK2),构建稳定表达SK通道的HEK293细胞系并研究其基本电生理学特性。方法:以人心房肌为标本,通过逆转录,重叠PCR法和定向克隆构建真核表达载体pIRES-hrGFP-SK2,采用脂质体法转染至HEK293细胞并筛选稳定表达的细胞系;使用全细胞和单通道膜片钳技术进行电流记录,研究其基本电生理学特性。结果:全细胞和单通道膜片钳均能在表达的HEK293细胞上记录到SK2通道电流,其电流具有明显的胞内钙离子依赖性。结论:成功构建稳定表达人心房肌SK2通道的HEK293细胞系,为以后研究通道功能活动奠定了基础。
谭晓秋陈桂兰李畅李妙龄李涛杨艳井上勋曾晓荣
关键词：小电导钙激活钾通道基因转染心房颤动
大电导钙激活钾通道在血管舒缩调控中的功能作用及其临床意义研究
曾晓荣杨艳周小波李鹏云刘智飞谭晓秋程俊李妙龄黄文俊李涛毛亮兰欢文静陈桂兰周文陈蓎葶周锐曾博魏燕李畅王娜黄鹂裴杰
该成果由3个国家自然科学基金、1个卫生部、2个科技厅、4个教育厅、1个卫生厅和1个科技局共12项目产生的成果组成：国家自然科学基金（1994-1996，NO：39370270）：冠状动脉血管平滑肌钙激活钾通道活动的电生理...
关键词：
关键词：病理生理学疾病防治
人心房组织膜蛋白SK2的提取方法(英文)被引量：1
2010年
目的:优化人心房组织膜蛋白提取方法。方法:分步离心法提取心肌膜蛋白,SK2膜蛋白用western-blot检测。结果:BCA检测出蛋白浓度,western-blot检测出蛋白条带。结论:此方法能够提取人心房组织的膜蛋白SK2,该方法简单,稳定,可靠,提取的膜蛋白质量好,浓度高,并能进行下一步的western-blot的实验,以便将来检测SK2膜蛋白在窦性和房颤患者心房组织之间表达的差异。
李涛曾晓荣毛亮陈桂兰谭晓秋刘智飞杨艳
关键词：心房组织
α-actinin2增加SK2通道在HEK293膜蛋白的表达(英文)
2014年
目的:证实α-Actinin 2与小电导钙激活钾通道(Small Conductance Ca^(2+)-activated K^+Channels,SK)的共同表达增加SK2在HEK293细胞膜上的表达。方法:HEK293细胞用RPMI 1640培养基培养。将HEK293细胞分为两组,对照组细胞转染pIRES—SK2质粒,实验组细胞共转染pIRES—SK2和pcDNA3—α-actinin2质粒。免疫荧光共聚焦屈微镜和蛋白印迹技术检测SK2通道蛋白在HEK293细胞膜上的表达。结果:免疫荧光共聚焦显微镜检测到转染pIRES—SK2质粒的HEK293细胞膜上有SK2通道蛋白的表达。蛋白印迹技术显示实验组蛋白条带亮度明显高于对照组。结论:α—Actinin 2能增加SK2在HEK293细胞膜上的表达。
李涛陈桂兰黄文俊毛亮李畅杨艳曾晓荣
关键词：小电导钙激活钾通道HEK293HEK293
胞外不同钠浓度对培养新生小鼠心肌细胞钠电流的影响
2011年
目的:探讨细胞外液不同的钠浓度对培养新生小鼠心肌细胞Na+电流的影响。方法:采用膜片钳技术,在浴液不同的钠离子浓度下,记录培养新生小鼠的心肌细胞钠电流的激活、失活以及恢复曲线。结果:相对于低钠浴液,高钠浴液记录的培养新生小鼠心肌细胞钠电流明显延迟,电流幅度增加也不明显,激活曲线不圆滑。结论:胞外高钠不是记录钠电流最合适的实验方案。
李涛李鹏云雷明李妙龄陈桂兰杨艳曾晓荣
关键词：钠电流膜片钳心肌细胞
胞内游离钙浓度测定平台的建立被引量：2
2010年
目的:建立一种简单有效的细胞内游离钙浓度测定平台。方法:用Fura-2作为荧光指示剂标记细胞内Ca2+,在倒置荧光显微镜下交替检测340nm和380nm激发的荧光强度,计算F340/F380代表的Ca2+相对浓度,再校正为标准浓度。结果:给予细胞刺激(如10mM咖啡因),F340/F380迅速增高,表明细胞内游离钙浓度迅速升高。对于快速变化的胞内Ca2+信号,系统反应灵敏、迅速,能很好地捕捉相关钙浓度变化。结论:由此建立起了一种简单有效的细胞内游离钙浓度测定平台,并应用于实际工作。这一平台在平滑肌细胞及心肌细胞游离钙浓度测定中都得到了充分的应用,平台建设中的第一手资料具有重要参考价值。
雷明曾晓荣陈桂兰刘智飞杨艳
关键词：FURA-2钙离子浓度咖啡因
稳定人心房肌小电导钙激活钾通道的HEK293细胞系的构建和鉴定
目的:小电导钙激活钾通道是近年来在心肌组织发现的离子通道,参与了心肌细胞复极化过程,同时在胞内钙离子调控中起重要作用。本研究拟克隆人心房肌小电导钙激活钾通道（SK2）,并构建稳定表达SK2通道的HEK293细胞系并鉴定,...
谭晓秋陈桂兰杨艳Isao Inoue曾晓荣
文献传递
重叠PCR法构建人心房肌SK2(KCNN2)基因表达质粒及鉴定和序列分析被引量：7
2012年
目的:小电导钙激活钾通道亚型2(SK2)在心房肌功能活动中起重要作用,但是由于其表达密度低,直接进行RT-PCR一步法无法得到该基因(KCNN2)的编码区全长序列,本研究旨在采用Overlapping PCR(重叠PCR)法进行基因全长序列的扩增和表达质粒的构建,探讨其在长片段基因扩增的应用。方法:收集人心房肌标本,采用提取总RNA之后逆转录为cDNA,分三段设计KCNN2基因(AY258141)引物进行分段扩增,同时进行分段测序,然后采用Overlapping PCR得到KCNN2基因编码区全长序列,通过限制性酶切位点定向克隆到表达载体pIRES-hrGFP上。采用酶切法和测序法进行鉴定。结果:三段KCNN2基因扩增产物大小与预测值一致,最后得到的表达质粒测序结果与基因库数据基本一致。结论:成功构建人心房肌SK通道基因表达质粒pIRES-hrGFP-SK2,Overlapping PCR能够很好的用于长片段基因扩增。
谭晓秋陈桂兰李涛毛亮井上勋杨艳曾晓荣
关键词：小电导钙激活钾通道重叠PCR基因工程
人心房肌KChIP2基因表达质粒pEGFP-KChIP2的构建和鉴定
2009年
目的:KChIPs作为瞬时外向钾通道(Ito)最重要的辅助亚基,在调控通道基因表达和电流特性中起重要作用。本实验拟构建人心房肌KChIP2基因表达质粒,为研究KChIP2对Ito的调控功能奠定基础。方法:①提取人心房肌总RNA,逆转录得到cDNA;②通过特异性引物进行PCR扩增得到KChIP2编码区全长序列,亚克隆到pMD18-T载体中,得到重组克隆质粒pMD18-T-KChIP2;③再设计带有酶切位点Hind Ⅲ和BamH Ⅰ的特异性引物,对重组克隆质粒pMD18-T-KChIP2进行PCR扩增,得到含有酶切位点的KChIP2编码区全长序列;④对含有酶切位点的KChIP2全长片段和pEGFP-c1进行Hind Ⅲ和BamH Ⅰ双酶切反应,然后进行电泳后胶回收,再进行连接和转化反应;⑤提取质粒,测序鉴定。结果:质粒测序结果与PubMed数据库KChIP2(AY026328)序列比对,同源性为99%。结论:成功构建人心房肌KChIP2基因表达质粒,为下一步转染实验研究KChIP2对瞬时外向钾通道的功能调控奠定了基础。
谭晓秋曾晓荣白志茹杨艳刘智飞陈桂兰裴杰
关键词：心肌细胞基因克隆
全选 清除 导出
共1页<1>
聚类工具0