钟部帅
- 作品数：21 被引量：15H指数：3
- 供职机构：南京农业大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金转基因生物新品种培育专项国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 肝细胞治疗的新型种子细胞——诱导性多能干细胞被引量：2
- 2010年
- 在回顾iPS细胞研究的基础上,针对肝细胞治疗的研究现状,就iPS细胞诱导分化为肝细胞的研究进展及其在肝病细胞治疗中的潜力进行了探讨,并提出了目前面对的主要问题,希望促进iPS细胞在肝病细胞治疗上的应用。
- 闫益波齐巍巍钟部帅吴勇聪王锋
- 关键词：胚胎干细胞诱导性多能干细胞肝病细胞治疗分化
- 小鼠胚胎干细胞单层定向诱导分化为肝样细胞的研究
- 2011年
- 在建立小鼠胚胎干细胞(ES细胞)无饲养层单层培养体系的基础上,使用丁酸钠(NaB)和表皮生长因子(EGF)作为前期诱导分化剂,诱导分化7 d,再用肝细胞生长因子(HGF)和地塞米松(Dex)诱导分化12 d,建立了体外两步法单层诱导ES细胞分化为肝样细胞的方法,并对诱导分化所得的肝样细胞从形态学、基因表达、蛋白分子标记及细胞功能等方面进行了检测,证明了分化所得细胞为肝细胞,肝细胞分化率为41.67%,为肝细胞来源提供了新的方法。
- 闫益波齐巍巍钟部帅樊懿萱宋洋黄荣万永杰王锋
- 关键词：小鼠胚胎干细胞肝样细胞诱导分化小鼠
- 高繁殖力黄淮山羊大卵泡颗粒细胞上调表达基因的研究被引量：1
- 2010年
- 旨在对山羊卵巢有腔卵泡发育中基因表达特点进行研究。本研究应用抑制消减杂交技术(SSH)对黄淮山羊卵泡期卵巢非闭锁大卵泡(6 mm)和小卵泡(4 mm)颗粒细胞内差异表达基因进行了研究,建立了消减cDNA文库,通过斑点杂交分析,从正向文库中随机挑取96个克隆进行差异表达的筛选,结果发现,其中有8个与已知功能基因高度相似,12个全新的表达序列标签(EST)。结果显示,这些基因可能影响着山羊卵泡的发育成熟和排卵。
- 庞训胜王子玉应诗家张艳丽吴勇聪闫益波孟立钟部帅王锋
- 关键词：黄淮山羊卵泡颗粒细胞抑制消减杂交
- 梅山猪骨髓间充干细胞的分离培养及生物学特性研究
- 本研究采用全骨髓法分离培养的BMSCs从生长规律来看，存在早期生长延缓和晚期生长抑制现象，并具有多向分化潜能，分离方法简便，为BMSCs的进一步实验研究提供了良好的细胞模型。
- 樊懿萱张艳丽杨岳王子玉宋辉钟部帅孟立王锋
- 关键词：骨髓间充质干细胞体外分离培养梅山猪生物学特性
- SB转座子介导的hLF乳腺表达载体的构建及鉴定
- 引言"睡美人"(sleeping beauty,SB)转座子是Tcl/mariner转座因子超家族中的一员,是应用于脊椎动物中的第一个功能性Ⅱ型转座子,具有易生产、易标准化、分子纯度高、安全性高以及可将外源基因稳定整合到...
- 宋洋张艳丽王子玉钟部帅孟立闫益波王锋
- 文献传递
- 梅山猪骨髓间充质干细胞的分离培养及生物学特性分析被引量：6
- 2011年
- 为建立梅山猪骨髓间充质干细胞(BMSC)体外分离培养方法及对梅山猪BMSC的生物学特性进行分析,本研究采用全骨髓法分离培养并传代梅山猪BMSC,倒置相差显微镜下观察细胞形态,以计数法检测细胞增殖状况,流式细胞术检测细胞周期,细胞压片进行染色体分析,免疫细胞化学和RT-PCR法检测细胞表面标志和转录因子的表达情况,并检测成骨和成脂分化能力。结果显示:梅山猪BMSC体外生长良好,细胞形态呈成纤维细胞样,具有稳定分裂增殖能力;CD29、CD44、CD90等表面标志基因及Fou5F1、Sox2、Nanog等转录因子基因表达呈阳性,CD45、Lin28表达呈阴性;在特定诱导液作用下,BMSC可分化为成骨样细胞及成脂肪样细胞。采用全骨髓法成功分离培养出大量纯度较高的梅山猪BMSC,其生长状态良好,可作为后续BMSC相关研究的种子细胞。
- 樊懿萱张艳丽杨岳王子玉宋辉闫益波钟部帅孟立聂海涛葛婷王锋
- 关键词：骨髓间充质干细胞体外分离培养梅山猪生物学特性
- 人乳铁蛋白cDNA乳腺特异性表达载体的构建及其生物学功能分析
- 本试验的目的是构建人乳铁蛋白(hLF)基因的乳腺特异性表达载体并验证其在乳腺细胞中的表达情况。本载体以山羊β-casein基因上游包括启动子、外显子1、内含子1、部分外显子2作为5’端调控序列,下游包括部分外显子7、内含...
- 孟立张艳丽许欣钟部帅闫益波黄荣宋洋王子玉王锋
- 关键词：HLF生物学功能
- 文献传递
- 山羊MSTN基因打靶载体的构建与鉴定
- 根据绵羊、猪、小鼠和牛的Myostatin(MSTN)基因序列,设计引物,通过PCR方法扩增了山羊MSTN基因的5'同源臂和3'同源臂,其长度分别为5.2kb、1.1kb.在ploxPneo载体的neo基因上游和下游分别...
- 钟部帅王立中邢慧君孟立张艳丽王锋
- 关键词：山羊肌肉生长抑制素基因序列限制性内切酶
- 文献传递
- 转绵羊IRF-1基因牛胎儿成纤维细胞的BVDV抗性研究
- 2012年
- 为研究IRF-1基因在抗病毒方面的作用,将IRF-1基因转染牛胎儿成纤维细胞,制备了瞬时表达IRF-1基因的转基因细胞,再将携带单股正链RNA的牛病毒性腹泻病毒(BVDV)作用于上述转基因细胞,观察该病毒在转基因细胞和非转基因细胞上的滴度变化及2种细胞形态、增殖、凋亡和基因表达情况上的差异。结果显示:与非转基因细胞相比,病毒在转基因细胞上滴度显著提高,病毒作用48和72 h后转基因细胞病变程度明显低于非转基因细胞;流式细胞仪检测发现72 h时细胞凋亡率显著降低,荧光定量PCR检测结果显示,转基因细胞中IRF-1基因的表达水平显著提高。结论:IRF-1基因具有促进细胞抗BVDV感染的作用。
- 齐巍巍唐泰山王子玉闫益波钟部帅吴勇聪张常印茆达干王锋
- 关键词：转基因抗病毒
- 人乳铁蛋白cDNA基因乳腺表达载体的构建与鉴定被引量：1
- 2011年
- 为了构建人乳铁蛋白基因（hLF）的乳腺表达载体并验证其在乳腺细胞中的表达情况,本载体以山羊β-casein基因上游包括启动子、外显子1、内含子1、部分外显子2作为5′端调控序列,下游包括部分外显子7、内含子7、外显子8、内含子8、外显子9及3′部分基因组片段作为3′端调控序列,长度分别为6.2 kb和7.1 kb,将hLF基因（目的基因）和Neo基因（筛选标记）分别插入到5′端调控序列和3′端调控序列的下游,构建成pBC1-hLF-Neo载体,其全长为25.348 kb。为了检测该载体的生物学功能,用脂质体介导法将其分别导入到山羊乳腺上皮细胞GMC和小鼠乳腺癌细胞株C127中进行表达验证,经G418抗性筛选8~10 d,得到了药物抗性细胞克隆,经催乳素、胰岛素及氢化可的松诱导培养,通过RT-PCR、Western blotting以及重组hLF抑菌圈试验表明,山羊β-casein基因启动子驱动的hLF基因能够在C127和GMC乳腺上皮细胞中转录翻译,且重组hLF具有抑制大肠杆菌生长的生物活性,这为下一步建立稳定整合hLF基因奶山羊胎儿成纤维细胞系奠定了基础。
- 孟立张艳丽许欣王子玉闫益波庞训胜钟部帅黄荣宋洋王金玉王锋
- 关键词：HLF生物学功能
