钟翎
- 作品数:35 被引量:177H指数:7
- 供职机构:中山大学药学院更多>>
- 发文基金:广东省科技计划工业攻关项目国家自然科学基金广东省重点科技攻关项目更多>>
- 相关领域:生物学农业科学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- NMDA受体的活化调节原代皮层神经元的Wnt/β-catenin信号通路被引量:1
- 2012年
- 经典的Wnt/β-catenin信号通路在中枢神经系统突触形成和功能中发挥重要的调节作用。作为兴奋性神经递质的谷氨酸,与其受体结合,参与许多信号调节活动。为了探讨NMDA受体活化对Wnt/β-catenin信号通路的作用,该文利用18 d的C57小鼠胚胎培养皮层神经元(离体10 d),用10μmol/L谷氨酸钠(monosodium glutamate,MSG)和50μmol/L N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)处理细胞,通过蛋白免疫印迹技术或者细胞免疫荧光染色分析Wnt/β-catenin信号通路关键成员。结果发现,NMDA受体的活化能使GSK-3β的Ser9位磷酸化水平增加,活性被抑制,胞浆内β-catenin蛋白降解减少,入核增加,激活下游基因表达。这些结果提示,NMDA受体激活能够上调Wnt/β-catenin信号通路。
- 彭彦茜万仙子李屹晨李莎莎张薇Tang Shaojun钟翎
- 关键词:NMDA受体WNT/Β-CATENIN信号通路原代培养皮层神经元
- 应用TD-PCR技术和限制性内切酶技术鉴定猴B病毒被引量:2
- 2003年
- 从DNA水平上鉴定猴B病毒,并区别人单纯疱疹病毒(HSV-1);用PCR技术对猴B病毒和HSV-1进行扩增,并用限制性内切酶技术对扩增产物进行酶切,对PCR扩增产物和酶切产物进行电泳;电泳结果显示猴B病毒和HSV-1的PCR扩增产物为128bp,酶切后,B病毒能产生72bp和56bp片段,而HSV-1不能产生酶切产物;该方法能较好地鉴定猴B病毒,同时也将有密切抗原关系的HSV-1区分开来。
- 刘忠华黄韧钟翎
- 关键词:单纯疱疹病毒降落PCR
- 水稻中新的核仁小分子RNA及其基因的研究
- 该文通过两个途径寻找和发现水稻中新的核仁小分子RNA:1.计算机分析与实验相结 合的方法;2.构建水稻细胞核RNA cRNA文库.采用计算机分析与实验相结合的方法,在水稻(O.sativa)Hsp70基因的第一个内含子中...
- 钟翎
- 关键词:水稻核仁小分子RNAHSP70基因SNORNA基因簇转基因烟草
- PCR方法检测犬细小病毒生长动态及与其它方法的比较被引量:10
- 2002年
- 将可疑犬细小病毒 ( CPV)粪样分别接种于 FK81、MDCK、BHK2 1、Vero细胞及鸡胚成纤维细胞中 ,用 PCR、HA、EL ISA三种方法检测在上面 5种细胞中 CPV的生长动态 ,结果表明 :PCR方法能在第 1、2、3代 FK81细胞中检出 CPV的生长 ,而 HA、EL ISA则只在第 3代 FK81细胞中才能检出 CPV的生长 ;PCR方法能在 MDCK、BHK2 1、Vero细胞及鸡胚成纤维细胞中检出 CPV的生长 ,而 HA、EL ISA则均不能。因此 ,PCR方法可作为培养细胞中检测病毒生长动态的一种灵敏、快速的方法。
- 刘忠华钟翎张钰程树军
- 关键词:犬细小病毒PCR方法
- mTOR信号通路及其与阿尔茨海默病的关系被引量:15
- 2010年
- 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白mTOR是一个进化上十分保守的蛋白激酶,属于PIKK超家族。在细胞内mTOR存在两种功能不同的复合体mTORC1和mTORC2。mTOR主要通过接受上游信号分子Rheb、TSC1/TSC2的调控来整合细胞内外信号,其下游效应器是4E-BP和p70S6K,通过影响特定mRNA的翻译调节细胞的生长和增殖。在神经系统方面,神经元的发育、突触可塑性的调节、学习和记忆的形成都依赖于适当的mTOR通路的活化。新近的研究显示,神经退行性疾病阿尔茨海默病患者表现mTOR通路的异常,在双转基因鼠中,APP和PS1表达与mTOR/P70S6K下调关联,并影响精神状态评分。mTOR信号通路生理功能和调节机制的研究对了解AD的发病机理和寻找药物靶点具有重要意义。
- 汝文娟唐少君钟翎
- 关键词:MTOR增殖分化阿尔茨海默病
- 原小檗碱类多靶点抗老年性痴呆症药理作用被引量:9
- 2009年
- 原小檗碱是一类异喹啉生物碱,具有相同的药效基团。本研究检测了以小檗碱和四氢黄藤素为代表的原小檗碱多靶点抗AD效应及分子作用机制。以人神经母细胞瘤SH-SY5Y为研究对象,利用Western blot检测药物对细胞全长APP和BACE1蛋白水平的影响;ELISA技术检测细胞外可溶性淀粉样前体蛋白α(sAPPα)的分泌;酶活性检测试剂盒检测乙酰胆碱酯酶(AChE)的活性。结果显示,药物处理细胞24 h后,二者均能显著地抑制BACE1蛋白的表达,并可使sAPPα的分泌显著增加,但未见细胞APP蛋白含量明显变化,同时对该细胞的AchE的活性具有显著的抑制作用。以上结果证明:原小檗碱生物碱药理活性涉及预防和减少Aβ沉积和增强乙酰胆碱对脑胆碱受体的作用,并通过细胞自身的代谢增加具有神经营养作用的sAPPα的分泌。提示此类化合物具有多靶点抗老年痴呆的潜能,通过结构优化改造,将有望获得副作用小的新一代抗AD有效药物。
- 陈青奉文尚何峰钟翎
- 关键词:淀粉样前体蛋白乙酰胆碱酯酶
- 共轭亚油酸单体诱导乳腺癌细胞MCF-7凋亡及其作用机制的研究被引量:4
- 2009年
- 目的:研究2种共轭亚油酸(conjugated linoleic acid,CLA)单体——顺9,反11-CLA(cis 9,trans11-CLA,c9,t11-CLA)和反10,顺12-CLA(trans10,cis12-CLA,t10,c12-CLA)诱导乳腺癌细胞MCF-7凋亡及其作用机制。方法:采用MTT法检测CLA对MCF-7细胞的生长抑制作用,锥虫蓝染色绘制CLA作用后MCF-7细胞的生长曲线;荧光显微镜观察及FCM检测MCF-7细胞的凋亡和细胞周期的改变;RT-PCR和Western印迹法检测MCF-7细胞PPARγ、Bcl-xL和Bcl-xS mRNA以及PPARγ、Bcl-2、Bax和caspase-3的蛋白表达。结果:2种CLA单体均可抑制MCF-7细胞增殖并诱导细胞凋亡,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05);RT-PCR和Western印迹法检测结果显示,2种CLA单体均可以提高PPARγ、Bcl-xS mRNA和PPARγ、Bax、caspase-3蛋白的表达,降低Bcl-xL mRNA和Bcl-2蛋白的表达,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);且2种CLA单体对PPARγ与凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2和caspase-3的表达影响呈剂量和时间依赖性及同步相关性。结论:c9,t11-CLA和t10,c12-CLA对乳腺癌MCF-7细胞具有抑制生长和促凋亡的作用,CLA可能作为PPARγ的配体通过激活PPARγ-Bcl-2-caspase-3细胞凋亡信号通路而实现抑制肿瘤细胞生长的作用。
- 袁贤琳陈青杨湘玲钟翎
- 关键词:乳腺肿瘤细胞凋亡细胞周期细胞MCF-7
- 犬细小病毒的PCR检测试剂盒的研制
- 通过在犬细小病毒的基因组中设计的特异性寡核苷酸引物,建立了检测犬细小病毒的特异、敏感、快速的PCR方法:在特定的反应条件下,使用该特异寡核苷酸引物能检出10ng的CPV病毒DNA,被测粪样只需进行简单煮沸就能进行PCR反...
- 刘忠华钟翎张钰陆勇军程树军
- 文献传递
- NMDA受体激活引起的突触活动对Wnt非经典通路的影响被引量:2
- 2011年
- 目的探讨NMDA受体激活引起的突触活动诱导Wnt非经典通路的活化。方法构建C57BL/6J胎鼠大脑皮层神经元原代培养体系,用NMDA处理神经元细胞,并结合Western blotting、双免疫荧光染色等技术,检测神经元细胞内Wnt非经典通路的相关蛋白的变化。结果免疫荧光染色显示成功建立了C57BL/6J胎鼠大脑皮层神经元体外培养体系,原代神经元细胞在体外培养10d生长良好,且纯度达90%;体外培养的神经元细胞内存在Wnt5a神经递质,经NMDA的刺激,发现Wnt非经典通路的两个标志性蛋白CaMKII和JNK的磷酸化水平显著增加,且Wnt非经典通路的一种受体Frizzled-5的蛋白表达水平也显著增加。进一步的研究显示,用NMDA竞争性抑制剂DAP5能够阻断NMDA引起的CaMKII和JNK蛋白的磷酸化水平的提高。结论 NMDA受体的激活会诱导Wnt非经典通路的活化。
- 李屹晨万仙子杨湘玲杨成张薇钟翎
- 关键词:原代培养NMDA受体
- Z7 snoRNA:酿酒酵母中一种新的核仁小分子RNA被引量:1
- 1997年
- 通过计算机分析国际分子生物学数据库和分子杂交等方法,在酿酒酵母(Saccharomvces cerevisiae)中发现了一种新的核仁小分子RNA:Z7 snoRNA。该snoRNA具有boxC和boxD等结构元素,并有14个核苷酸与18S rRNA中的一段保守序列互补,属于典型的以核酸序列指导大分子rRNA甲基化的snoRNA类型。Z7 snoRNA指导酿酒酵母18S rRNA中第578位的尿嘧啶核苷酸的核糖甲基化,Z7snoRNA长88个核苷酸,富集于核仁区,由位于酿酒酵母13号染色体上的一个独立基因编码。
- 屈良鹄陆勇军钟翎周惠施苏华
- 关键词:SNORNA酿酒酵母RRNA甲基化核仁