金晗英 作品数:10 被引量:21 H指数:3 供职机构: 浙江大学医学院附属第一医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 浙江省科技厅项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
芬太尼复合布比卡因用于颈丛阻滞的疗效观察 被引量:3 2002年 目的:探讨阿片类药物芬太尼的外周镇痛作用;方法:选择ASA Ⅰ-Ⅱ级的择期甲状腺手术病人44例,随机分为A、B两组,A组采用0.2%布比卡因,B组采用 含芬太尼的0.2%布比卡因作双侧颈深、浅丛阻滞,记录阻滞起效时间、完善作用时间、作 用持 续时间以及麻醉效果。数据结果作统计学处理;结果:A、B两组在阻滞起效时间上无差异, B组完善作用时间明显缩短,作用持续时间明显延长,麻醉效果明显改善;结论:芬太尼复 合布比卡因能加强周围神经阻滞作用。 安肖霞 金晗英关键词:芬太尼 布比卡因 颈丛阻滞 外周镇痛作用 甲状腺手术 腺病毒载体在抗HBV基因治疗中的应用 被引量:2 2006年 HBV持续感染是导致慢性肝炎后肝硬化、肝细胞癌等疾病的重要原因,尚缺乏能彻底治疗的手段。基因治疗是近年迅速发展的一种治疗HBV感染的方法。理想的基因治疗载体是基因治疗的一个重要方面。腺病毒载体由于其特有的一些优点在抗HBV的基因治疗中受到重视。文中就腺病毒载体在抗HBV基因治疗中的应用作了综述。 金晗英 陈智关键词:乙型肝炎病毒 基因治疗 腺病毒载体 tRNA^(val)-shRNA表达框在筛选HBV C基因小干扰RNA靶位中的应用 被引量:6 2006年 目的:以tRNAval-shRNA表达框技术筛选高效的HBV C基因siRNA靶位。方法:针对HBV C基因序列设定5个siRNA靶位,以一步重叠延伸PCR技术生成含tRNAval启动子的shRNA表达框(SEC),分别与HBV C基因与EGFP融合表达质粒(pC-EGFP)共转染AD 293细胞,转染后48 h,流式细胞术检测融合基因荧光表达情况,半定量RT-PCR法检测HBV-C基因mRNA表达水平。以筛选的shRNA表达框转染hepG 2.2.15细胞,72 h后放免法检测细胞培养上清HbsA g、HbeA g水平,RT-PCR检测细胞HBV pgRNA水平。结果:共转染shRNA表达框能有效抑制融合表达质粒(pC-GFP)荧光强度和HBV C mRNA表达,其中SEC-492 i抑制效率最佳,而SEC-282 i相对较差。选定的492 i表达框(SEC-492 i)及282 ishRNA表达框(SEC-282 i),均呈剂量依赖性抑制hepG 2.2.15细胞HbeA g分泌和HBV pgRNA水平,其中SEC-492 i抑制HbeA g和HBV pgRNA水平明显优于SEC-282 i。结论:在选定的5个siRNA靶位中,以492 i靶位RNA i效率最高。tRNAval-shRNA表达框技术可用于抗HBV高效siRNA靶位的筛选,有进一步推广应用价值。 潘修成 陈智 倪勤 羊正纲 徐宁 金晗英关键词:乙型 基因 小干扰RNA HBV C基因 小干扰RNA体外抑制HBV表面抗原融合基因的表达 目的:利用增强型绿荧光蛋白(EGFF)和小发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)表达载体技术,初步建立一种行之有效且相对经济的验证siRNA 有效性的方法。方法:将HBV s 基因融合到EGFP 中... 羊正纲 陈智 倪勤 徐宁 潘修成 金晗英 李星仪关键词:小干扰 GFP 体外抑制 HBV 文献传递 tRNAval-shRNA表达框在筛选HBV C基因小干扰RNA靶位中的应用 目的目前生成siRNA的五种方法中,小发夹RNA(small hairpin RNA shRNA)或siRNA表达框技术被认为是快速经济筛选siRNA靶位的有效方法。我们首次以重叠延伸一步PCR法分别制备了三种RNA P... 潘修成 陈智 倪勤 羊正纲 徐宁 金晗英文献传递 腺病毒载体介导的RNA干扰体外抑制HBV复制的研究 目前全世界约有3.5亿慢性HBV(hepatits B virus,HBV)感染者,HBV持续感染是导致慢性肝炎后肝硬化、肝细胞性肝癌等疾病的重要原因,严重威胁着人类健康.目前使用的药物如干扰素、核苷类似物等在治疗的有效... 金晗英关键词:乙型肝炎病毒 RNA干扰 腺病毒载体 文献传递 抑制HBV复制的小干扰RNA的重组腺病毒构建与鉴定 2009年 目的构建可同时表达绿荧光蛋白(GFP)和针对HBVS区基因的小干扰RNA(siRNA)的重组腺病毒,并研究该siRNA在体外对HBV的抑制作用。方法采用PCR技术自质粒pEGFP-C1中扩增含CMV启动子的GFP表达框,自质粒pAVU6+4sh579中扩增含U6启动子的针对HBV S 区579-597位基因的siRNA表达框,分别将两个表达框克隆至穿梭载体质粒pShuttle内,与质粒pADEasy-1在大肠杆菌BJ5183内进行同源重组,将阳性重组体DNA转染至人胚肾细胞株HEK293细胞中进行包装、扩增,并在HepG2.2.15细胞中初步观察其对HBV复制的抑制疗效。结果构建了可同时表达GFP和siRNA的重组腺病毒,其可在HEK293细胞中进行包装、扩增,并在HepG2.2.15细胞中对HBV-DNA、HBsAg和HBeAg的表达具有抑制作用。结论成功构建了可同时表达GFP和针对HBV的siRNA的重组腺病毒,并在体外实验中证实了其对HBV复制具有抑制作用。 金晗英 陈智 羊正纲 潘修成关键词:HBV 腺病毒载体 RNA干扰 小干扰RNA体外抑制HBs-GFP融合基因的表达 被引量:4 2005年 目的利用增强型绿荧光蛋白(EGFP)和小发夹RNA(shRNA)表达载体技术,建立一种行之有效且相对经济的验证siRNA的方法。方法将HBVS基因融合到EGFP中,建立HBs-GFP融合基因表达载体;同时构建带U6+27RNA转录启动子的shRNA表达载体pAVU6+4sh357。二载体共转染HepG2细胞后,流式细胞仪检测HBs-GFP蛋白的荧光强度;同时RT-PCR和实时定量PCR法检测HBs-GFPmRNA水平的改变。结果小干扰RNA有效抑制目的基因的表达,共转染后第72h荧光蛋白抑制率为55.4%;HBs-GFP融合基因的RNA表达受到显著抑制,抑制率达到90%。结论载体法表达的小干扰RNA体外显著抑制HBs-GFP融合基因的表达。 羊正纲 陈智 倪勤 徐宁 潘修成 金晗英 李星仪关键词:RNA干扰 表面抗原 载体法筛选乙型肝炎病毒S基因小干扰RNA靶位体系的建立 被引量:8 2004年 目的 构建4个针对乙型肝炎病毒(HBV)S基因序列的小发夹RNA(shRNA)表达载体,作用于增强型绿色荧光蛋白(EGFP)和HBV S基因融合表达载体,观察shRNA对融合蛋白的抑制作用,筛选出有效靶位。 方法 利用pAVU6+27质粒,设计并构建4个shRNA表达载体,与融合表达载体共转染AD293细胞,荧光显微镜下观察融合蛋白的荧光表达情况并通过流式细胞仪分析shRNA对融合蛋白的抑制作用。同时,逆转录聚合酶链反应法验证其筛选的有效性。 结果 成功构建shRNA表达载体和HBs-EGFP融合表达载体;4组shRNA表达载体均可不同程度抑制融合基因的表达,其中以579位点最有效,荧光表达抑制率为69.8%,RNA水平抑制率为74.6%。 结论 筛选出有效抑制HBV S基因的siRNA靶位。 羊正纲 陈智 徐宁 倪勤 潘修成 金晗英 李敏伟关键词:小干扰RNA 靶位 乙型肝炎病毒S基因 融合表达载体 EGFP 增强型绿色荧光蛋白 109例高血压性脑出血患者急诊手术的麻醉 2001年 目的 提高脑出血患者急诊手术的麻醉技术 ,减少与麻醉相关的并发症的发生率。方法 在 10 9例高血压性脑出血患者急诊手术中 ,采用快速静脉诱导气管内插管 ,异氟醚吸入加用异丙酚微泵静注复合全麻 ;甘露醇及控制PETCO2 降低颅内压 ;对血压≥ 180 /10 0mmHg和 /或血糖 >2 5 0mg/dl者作适当处理。 结果 10 9例患者术后 1周内无 1例死亡。并发肺部感染 5 0例 (45 8% )、急性肾功能衰竭 15例 (13 8% )、消化道出血19例 (17 4 % ) ,同时患有其中两个并发症者 5例 (4 6 % ) ,死于并发症者 17例 (15 6 % )。结论 急诊手术可降低高血压性脑出血患者死亡率和多器官功能衰竭的发生率 。 赵文胜 虞金松 金晗英 庆廉关键词:高血压脑出血 手术 麻醉