郭洪 作品数:15 被引量:39 H指数:4 供职机构: 新疆农垦科学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家绒毛用羊产业技术体系建设专项 国家高技术研究发展计划 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 更多>>
绵羊高硫角蛋白KAP1.3基因启动子活性分析 被引量:4 2012年 旨在研究高硫角蛋白基因启动子及相关调控序列的表达活性。以绵羊基因组为模板,克隆KAP1.3基因启动子序列,对其进行5个系列缺失片段pGL4.10表达载体构建,将不同重组质粒转染小鼠成纤维细胞,通过裂解细胞测定其荧光值方法来检测启动子的表达活性。结果显示,除KAP1.3-P5片段其余片段均具有表达活性,其中KAP1.3-P1片段表达活性最高,而缺失-944至-707处的KAP1.3-P2对启动子的活性没有显著影响,但缺失-944至-394处KAP1.3-P3片段对启动子活性影响比较大,从P3和P4的结果中可以看出,虽然两个片段都缺失了转录因子bHLH的结合位点,但P4的活性比P3高出约20%,由此推测在-394至-195之间可能存在一个负调控元件,在-195和-4之间可能存在一个增强元件,但具体的调控元件还需要再进行细致地分析,优化出活性最高且特异性不变的启动子片段。 朱汇 张红琳 代蓉 万鹏程 郭洪 石国庆关键词:绵羊 启动子活性 EGF和β-巯基乙醇对羔羊卵母细胞体外受精和体外发育的影响 被引量:9 2012年 [目的]为优化幼畜卵母细胞体外培养体系提供理论基础。[方法]研究在成熟液中添加EGF和β-巯基乙醇对绵羔羊卵母细胞受精和卵裂、囊胚情况的影响,并与成年绵羊卵母细胞进行比较。[结果]在成熟液中添加不同浓度的EGF对羔羊卵母细胞卵裂率和囊胚率无显著影响(P>0.05)。添加不同浓度的β-巯基乙醇可以提高羔羊卵母细胞囊胚率,其中添加100μmol/Lβ-巯基乙醇有显著影响(P<0.05),但对卵裂率影响不显著(P>0.05)。羔羊卵母细胞卵裂率和囊胚率均显著低于成年羊(P<0.05)。添加100μmol/L的β-巯基乙醇能显著提高羔羊卵母细胞正常受精率(P<0.05),且与成年羊卵母细胞受精率差异不显著(P>0.05)。未添加β-巯基乙醇多精入卵率显著高于成年羊(P<0.05),而添加100μmol/L的β-巯基乙醇多精入卵率与成年羊差异不显著(P>0.05)。成熟液中不添加β-巯基乙醇时未受精率(20.0%)高于成年羊组(12.3%)和β-巯基乙醇(13.5%),但差异不显著(P>0.05)。[结论]添加100μmol/L的β-巯基乙醇能显著提高羔羊卵母细胞发育能力,提高正常受精的比例并减少多精子受精的发生,但羔羊卵母细胞发育能力仍显著低于成年羊。 郭洪 万鹏程 石文艳 倪建宏 代蓉 毛青青 朱汇 张宾 刘长彬 石国庆关键词:卵母细胞 体外受精 EGF 不同品种绵羔羊超数排卵及胚胎体外生产技术研究 被引量:13 2012年 探讨品种对羔羊超数排卵效果和卵母细胞发育能力的影响,并将体外受精胚胎进行了移植,为研究利用绵羊羔羊卵母细胞生产后代提供理论和技术方法。对4~8周龄不同品种羔羊用FSH+PSMG处理后获得的平均卵母细胞数量和体外胚胎卵裂率和囊胚率进行了比较,并比较成熟液中有无β-巯基乙醇对胚胎卵裂率和囊胚率的影响。结果:各品种获得的平均卵母细胞数分别为:哈萨克为210.22枚,湖羊为0枚,美利奴为135.80枚,湖羊与哈萨克的杂交后代为37.80枚,湖羊羔羊和湖羊与哈萨克羊的杂交羔羊获得的平均卵母细胞数显著低于哈萨克羔羊(P<0.01,P<0.05)。哈萨克羔羊卵裂率(69.0%)显著高于湖羊与哈萨克羊杂交羔羊(66.4%,P<0.05);哈萨克羔羊囊胚率(17.5%)和美利奴羔羊囊胚率(16.2%)显著高于湖羊×哈萨克羔羊(13.8%)(P<0.01,P<0.05)。β-巯基乙醇对羔羊胚胎卵裂率影响不显著,对囊胚率影响极显著(P<0.01)。哈萨克羔羊卵子体外受精获得的2-8细胞胚胎进行输卵管移植,14只受体羊中7只妊娠,妊娠率为50.0%;共产羔9只,其中8只存活。 郭洪 万鹏程 石文艳 倪建宏 代蓉 周平 王立民 石国庆关键词:羔羊 超数排卵 发育能力 胚胎移植 羔羊卵母细胞体外胚胎生产影响因素分析 被引量:10 2013年 利用幼畜胚胎体外生产与胚胎移植(Juvenile in vitro embryo transfer,JIVET)技术能够获得大量卵母细胞,缩短世代间隔,加快育种进程。但幼畜卵母细胞形态及代谢与成年动物存在差异,这导致幼畜胚胎发育能力低。目前,对JIVET技术的研究主要是通过改进激素处理方案及体外培养条件来增加卵母细胞数量并增强卵母细胞发育能力。从供体羔羊的选择、激素处理和卵母细胞的发育等方面对该技术进行了分析。 郭洪 万鹏程 代蓉 石国庆关键词:VITRO EMBRYO 绵羔羊JIVET技术相关影响因素的研究 幼畜胚胎体外生产技术(JIVET)是集幼畜超数排卵,卵母细胞的体外成熟和体外受精,胚胎体外培养和胚胎移植技术为一体的生物高新技术体系。本研究就羔羊卵母细胞体外培养体系优化,品种对羔羊超数排卵和卵母细胞发育能力的影响以及羔... 郭洪关键词:卵母细胞 发育能力 超数排卵 文献传递 成熟液添加半胱胺对羔羊卵母细胞体外成熟、受精和发育的影响 成熟液中添加含巯基化合物(GSH前体物质,如半胱胺、半胱氨酸和胱氨酸等)能够提高细胞质中GSH的浓度,保护卵母细胞及精子免受活性氧(ROS)的氧化损伤,提高卵母细胞的成熟、受精和胚胎的发育能力。 郭洪 万鹏程 石国庆关键词:胚胎学 卵母细胞 体外受精 半胱胺 BMP4对小鼠毛囊数量的影响 被引量:14 2012年 利用PolⅡ型人角蛋白14基因的启动子K14驱动eGFP-shRNA整合转录本的表达方法,制备在皮肤组织中高效表达靶向BMP4基因的siRNA转基因小鼠模型。利用Northern杂交的方法验证siRNA在转基因小鼠皮肤中高表达,但未从mRNA水平分析BMP4基因的表达变化。以建立的转基因小鼠模型为基础,检测小鼠皮肤组织中BMP4基因的表达变化,并观察妊娠18.5d(E18.5)转基因胎鼠与同窝阴性胎鼠背部皮肤组织切片中毛囊数量的变化,选择5个不同的视野进行毛囊数量计数后统计分析。结果表明,转基因小鼠皮肤组织中BMP4基因的表达下调,同时毛囊数量显著增加。表明利用融合表达载体制备转基因小鼠实现目的基因RNAi的方法可以有效地抑制动物体内目的基因的表达,同时也从胎鼠毛囊数量分析统计的结果发现,该基因对小鼠毛囊的发生发育有一定的影响。 毛青青 代蓉 沈思军 郭洪 万鹏程 周平 石国庆关键词:转基因小鼠 RNAI BMP4 组织特异RNAi转基因小鼠BMP4基因表达分析 RNAi作为一个便捷有效的检测技术,已经广泛应用于基因功能鉴定、药物有效靶点筛选和基因治疗等的研究中。本研究小组利用Pol II启动子K14表达eGFP-shRNA融合mRNA,制备了转基因小鼠,经Northern杂交验... 毛青青 沈思军 郭洪 万鹏程 周平 石国庆 代蓉关键词:基因表达 文献传递 EGF和β-巯基乙醇对羔羊卵母细胞体外受精和体外发育的影响 本研究旨在优化绵羔羊卵母细胞体外成熟条件,比较了不同浓度表皮生长因子(EGF)和β-巯基乙醇(ME)对绵羔羊卵母细胞受精情况、卵裂率和囊胚率的影响。 郭洪 万鹏程 石国庆关键词:卵母细胞 体外受精 表皮生长因子 繁殖育种 利用羔羊超排卵母细胞生产体外胚胎的方法 本发明公开了一种羔羊超排卵母细胞生产体外胚胎的方法,通过以下技术方案实现的:将从羔羊体内采集到的卵母细胞在成熟液中进行体外培养成熟为卵子,再经体外受精和培养,使卵子发育为胚胎,即可将成活的胚胎移植到代孕母羊体内进行繁育。... 万鹏程 石国庆 倪建宏 石文艳 郭洪 代蓉 刘长彬 张宾文献传递