郝春芳
- 作品数:2 被引量:3H指数:1
- 供职机构:厦门大学生命科学学院细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室更多>>
- 发文基金:厦门市科技计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学更多>>
- 一种新型广谱的原核型分泌表达载体的建立及人表皮生长因子的表达被引量:1
- 2007年
- 通过Cyanobase藻类学数据库查询,从集胞藻6803转译后加工过程中的某些蛋白的分泌信号序列得到了可以用于分泌型表达的信号序列,进一步通过SignalP3.0Server分析软件预验证,从集胞藻6803得到4种不同蛋白的信号序列A、B、C、D,将这些信号序列插入pET-His-EGF表达载体hegf基因上游,得到了带有分泌型信号的pS-X系列分泌型表达载体,人表皮生长因子(hEGF)在其中的pS-A载体中实现了分泌型表达,hEGF分泌到周质空间的相对表达量约为1%,在其它3个载体中未见表达。获得的pS-A分泌型表达载体是一种新型分泌型表达载体,它利用蓝藻信号序列作为分泌表达的信号肽,实现了hEGF多肽在大肠杆菌中分泌表达,通过融合白亚细胞定位法处理得到的hEGF多肽在胞质、周质空间和培养基中表达的比例为85∶33∶25(density intensity/mm^2),利用渗透休克处理方法得到的比例为50∶37∶25。由于A信号序列本身是集胞藻6803膜蛋白(ID:s110172/NCBI-GI:1001433)的分泌信号肽,说明pS-A载体是一种广谱的原核型分泌表达载体。这一结果为实现hEGF在螺旋藻中的分泌型表达奠定了基础。
- 郝春芳徐虹章军刘仁海
- 关键词:信号肽序列分泌型表达
- 采用PhR-L20C光生物反应器培养转胸腺素α1基因蓝藻的研究被引量:2
- 2004年
- 采用PhR L20C光生物反应器对转胸腺素α1基因聚球藻Synechococcussp.PCC7942进行6批次的培养,结果表明,采用本实验室优化后的培养条件,根据该型气升式光生物反应器所具备的各项性能指标和参数条件进行培养,一个培养收获周期为6d,平均生长速率为0.61OD730/d,6d后藻细胞平均终浓度达到OD730=4.27,绘制了转基因藻细胞的光密度与其干质量的标准曲线,通过曲线得出产率平均约为0.36g/(Ld),最高0.40g/(Ld);最终细胞密度平均可达2.52g/L,最高2.84g/L.
- 刘俊郑锦乾黄小花郝春芳周克夫徐虹刘仁海章军
- 关键词:蓝藻免疫调节剂